倍他福林改善胰島素抵抗的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本課題研究目的旨在通過建立體內(nèi)、體外胰島素抵抗模型，觀察β3-AR激動(dòng)劑倍他福林對(duì)胰島素抵抗的影響，從而為開發(fā)抗糖尿病藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：(1)體外實(shí)驗(yàn)研究中，在培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞中加入5×10-7M的胰島素，孵育16h，通過測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中的葡萄糖的消耗量來評(píng)價(jià)HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。然后加入倍他福林(1×10-6～10-4M)與之共孵育24h，，觀察葡萄糖消耗量的變化，并以western blottin

2、g法檢測(cè)倍他福林對(duì)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞GLUT-4蛋白表達(dá)的影響。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究中，以地塞米松(1 mg/kg，隔日肌注)3周建立大鼠胰島素抵抗模型，然后給予倍他福林(劑量分別為7 mg/kg/d，20mg/kg/d和60mg/kg/d)治療3周，以試劑盒檢測(cè)血葡萄糖、甘油三酯，胰島素以及肝臟肝糖原的含量變化，并以western blotting法檢測(cè)肝臟GLUT-4蛋白表達(dá)，HE染色觀察胰島的病理改變。 結(jié)果：(1)體

3、外實(shí)驗(yàn)研究中，在培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞中加入5×10-7M的胰島素，孵育16h，葡萄糖的消耗量與對(duì)照組相比顯著減少(P＜0.01)。與模型組相比，倍他福林可呈濃度依賴性的增加胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗量(P＜0.05)，倍他福林也可呈增加胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的GLUT-4的表達(dá)(P＜0.01)。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，大鼠給予地塞米松(1mg/kg，隔日肌注)3周，大鼠血糖與對(duì)照組相比顯著增加(P＜0.01)。與模型組相比，倍他福

4、林可呈濃度依賴性的降低胰島素抵抗大鼠血糖、血甘油三酯、血胰島素、肝糖原含量(P＜0.05)，倍他福林也可增加胰島素抵抗大鼠肝臟GLUT-4蛋白表達(dá)(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)HepG2細(xì)胞中加入5x10-7M的胰島素，孵育16h，可以使HepG2細(xì)胞對(duì)胰島素產(chǎn)生抵抗。倍他福林可以增加胰島素抵抗細(xì)胞的葡萄糖消耗量，具有改善胰島素抵抗的作用。(2)地塞米松(1mg/kg，隔日肌注)3周可以誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生胰島素抵抗。倍他福林通過增加