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1、第一部分:目的:探討常年變應(yīng)性鼻炎患者外周血中Th17細(xì)胞的功能狀況。方法:選取塵螨過敏性常年性變應(yīng)性鼻炎患者(AR)及健康對照者(HC)各10人。從外周血分離單個核細(xì)胞(PBMCs),分為離子霉素組(空白組),塵螨組,PMA組:離子霉素組加入離子霉素1ug/ml和莫能霉素2umol/l;塵螨組加入離子霉素1ug/ml和塵螨變應(yīng)原nDer p1 1ug/ml及莫能霉素2umol/l;PMA組加入PMA 20ng/ml,離子霉素1ug/m
2、l和莫能霉素2umol/l,在37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)6h。用流式細(xì)胞技術(shù)檢測Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞百分比,分析常年變應(yīng)性鼻炎患者外周血中Th17細(xì)胞的功能。結(jié)果:HC空白組、塵螨組和PMA組Th17細(xì)胞百分比均低于對應(yīng)的AR(p<0.05);經(jīng)PMA刺激后,HC和ARTh17細(xì)胞百分比較空白組均增高(p<0.05),AR增幅更大;經(jīng)nDerp1刺激后,HCTh17百分比較空白組無明顯改變,而ARTh17百分比較空白組顯著
3、降低(p<0.05)。結(jié)論:提示Th17細(xì)胞可能參與變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機制。PMA刺激可以引起能分泌IL-17的CD4+T數(shù)量增加。
第二部分:目的:探討常年變應(yīng)性鼻炎患者外周血中記憶性Th1和Th2細(xì)胞的功能狀況。方法:選取塵螨過敏性常年性變應(yīng)性鼻炎患者(AR)及健康對照者(HC)各10人。從外周血分離單個核細(xì)胞,分為離子霉素組(空白組),塵螨組,PMA組:離子霉素組加入離子霉素1ug/ml和莫能霉素2umol/l;塵螨組
4、加入離子霉素1ug/ml和塵螨變應(yīng)原nDer p1 1ug/ml及莫能霉素2umol/l;PMA組加入PMA 20ng/ml,離子霉素1ug/ml和莫能霉素2umol/l,在37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)6h。培養(yǎng)6小時后,收集PBMCs,進(jìn)行胞膜和胞內(nèi)染色,用流式細(xì)胞技術(shù)檢測記憶性Th1/Th2細(xì)胞占CD4+CD45RO+T(Tm)細(xì)胞百分比,分析常年變應(yīng)性鼻炎患者外周血中記憶性Th1/Th2細(xì)胞的功能。結(jié)果:HC空白組外周血中記憶
5、性的Th2百分比高于AR空白組,經(jīng)塵螨刺激后,HC記憶性的Th2百分比無明顯改變,而AR增加,且效應(yīng)性的Th2百分比增加更明顯(p<0.05)。HC外周血中記憶性的Th1百分比高于AR,經(jīng)塵螨刺激后,HC和AR均下降,但是HC下降更明顯,雖然沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。經(jīng)PMA刺激后,HC和AR外周血中記憶性的Th2百分比均顯著下降(p<0.05);HC和AR外周血中記憶性的Th1百分比均顯著上升(p<0.05)。結(jié)論:AR存在對塵
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