茯苓多糖提取工藝的優(yōu)化及開發(fā)利用研究.pdf

1、對茯苓多糖的浸提、分離、純化工藝及其單糖組分等進(jìn)行了研究，結(jié)果如下： 1．茯苓多糖的熱水浸提工藝優(yōu)化 首先對溶劑的用量、溶劑pH、浸提溫度、浸提時(shí)間、浸提次數(shù)進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，然后選取靈敏因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。確定熱水浸提的最佳工藝條件為：浸提時(shí)間：3小時(shí)，浸提溫度：80℃，浸提次數(shù)：2次，浸提固液比1：40。 2．茯苓多糖的酶解+熱水浸提法工藝研究 首先對酶加入量、酶解液pH值、酶解溫度、酶解時(shí)間、固液比

2、等進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，然后選取靈敏因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。確定酶解+熱水浸提法的最佳工藝條件為：固液比1：10，溫度：48℃，時(shí)間：90min，pH值=5，加酶量：1％。酶解反應(yīng)和熱水浸提兩個(gè)階段。酶解后熱水浸提溫度確定為80℃，酶解后熱水浸提時(shí)間為90min，酶解后熱水浸提時(shí)的固液比為1：30，酶解后熱水浸提次數(shù)為一次。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用酶解+熱水浸提法提取茯苓多糖，能顯著提高茯苓多糖的浸出率，是熱水浸提法的2,32倍，并且具有浸

3、提時(shí)間縮短，提取條件溫和，所得茯苓多糖立體結(jié)構(gòu)不易被破壞、生物活性高等優(yōu)點(diǎn)。 3．乙醇沉淀工藝研究 通過實(shí)驗(yàn)探討上述兩種方法的浸提液濃縮比和乙醇加量對多糖沉淀率的影響，結(jié)果表明熱水浸提液醇沉醇沉最佳工藝條件為濃縮液占原體積的1/10，乙醇濃度為80％時(shí)，沉淀率達(dá)到82.03％，沉淀中多糖的含量為20.16％。酶解+熱水浸提液醇沉醇沉最佳工藝條件為濃縮液占原體積的1/5，乙醇濃度為80％時(shí)，沉淀率達(dá)到83.15％，沉淀中多

4、糖的含量為29.13％。 4．除蛋白質(zhì)方法的比較 本文比較了的Sevag法和酶解+Sevag法、10％三氯乙酸和鞣酸沉淀法去除茯苓多糖提取物中的蛋白質(zhì)成分。綜合考慮蛋白質(zhì)清除率和多糖損失率后確定采用酶解+Sevag法去除茯苓多糖提取物中的蛋白質(zhì)。去蛋白后醇沉所得的多糖含量為：55．820／0。 5．大孔樹脂純化茯苓多糖 在9種大孔吸附樹脂中進(jìn)行篩選確定用AB-8大孔吸附樹脂進(jìn)行茯苓多糖的繼續(xù)純化。詳細(xì)研究

5、AB-8大孔吸附樹脂純化茯苓多糖的過程，確定條件為：洗脫速度：2ml/min，NaCl溶液濃度：0.2mg/ml。 6．茯苓多糖的DEAE-纖維素分離 取純化茯苓多糖上DEAE．纖維素柱，結(jié)果蒸餾水洗脫得一種中性多糖PPS1，0.1、0.2、0.3mol/LNaCl溶液分別洗脫得三種不同的酸性多糖PPS2、PPS3、PPS4。 7．茯苓多糖的單糖組分研究 采用氣相色譜法測定PPS2的單糖組分，結(jié)果表明主要