人工雌核發(fā)育鰱近交F-,1-的同工酶和微衛(wèi)星標(biāo)記研究.pdf

1、鰱是我國(guó)淡水主養(yǎng)魚類之一，在我國(guó)淡水養(yǎng)殖業(yè)中占有重要地位，但是由于缺乏選種保種技術(shù)，導(dǎo)致鰱的優(yōu)良種質(zhì)退化。雌核發(fā)育是快速建立純系得有效手段之一，目前在我國(guó)已初步建立了鰱的人工雌核發(fā)育近交系。為了檢測(cè)雌核發(fā)育鰱的遺傳特點(diǎn)，我們進(jìn)行了同工酶和微衛(wèi)星標(biāo)記的研究。采用聚丙烯酰胺水平平板電泳法研究了雌核發(fā)育近交F<,1>Ⅰ系、Ⅱ系、野生鰱、普通鰱和鯉的肌肉蛋白以及肝、腎、心、眼和肌肉5種組織的酯酶（EST）和乳酸脫氫酶（LJDH）。比較發(fā)現(xiàn)：（1

2、）雌核發(fā)育鰱近交F<,1>Ⅰ系、Ⅱ系和野生鰱的同工酶譜基本一致，鯉明顯區(qū)別于鰱；（2）從酯酶圖譜可發(fā)現(xiàn)，雌核發(fā)育近交鰱F<,1>Ⅱ系的群體內(nèi)有多態(tài)現(xiàn)象，肝、腎、肌肉的多態(tài)位點(diǎn)比例分別為0.6000、0.3333、0.5000，遺傳雜合度分別為O.7485、0.6622、0.1139；（3）肝臟的乳酸脫氫酶中出現(xiàn)C帶，且C帶表現(xiàn)多態(tài)性。（4）沒(méi)有發(fā)現(xiàn)能區(qū)別鰱群體的遺傳標(biāo)記。 利用鰱的微衛(wèi)星引物，對(duì)雌核發(fā)育鰱近交F<,1>Ⅱ系和野生

3、鰱、雄鯉進(jìn)行了微衛(wèi)星標(biāo)記的遺傳分析。通過(guò)DNA提取、PCR擴(kuò)增、凝膠電泳檢測(cè)等一系列分子操作技術(shù)，分析了3個(gè)群體在37個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上的群體遺傳變異，包括有效等位基因數(shù)、等位基因頻率、多態(tài)位點(diǎn)比例、群體雜合度、Shannon遺傳多樣性指數(shù)、固定指數(shù)、群體間遺傳距離等，并用UPGMA法對(duì)3個(gè)群體進(jìn)行了聚類。結(jié)果表明：（1）鯉在25個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上產(chǎn)生了特異性擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明這25對(duì)引物對(duì)鯉和鰱具有通用性。（2）37個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)中有25個(gè)表現(xiàn)多態(tài)

4、性。野生鰱和II系的多態(tài)位點(diǎn)比例分別是78.38％和75.68％，平均觀測(cè)雜合度分別是0.5108和0.5078，平均期望雜合度分別是4725和0.4004，Shannon遺傳多樣性指數(shù)分別是0.834．8和0.6370，表明Ⅱ系的遺傳多樣性比野生鰱低。（3）固定指數(shù)的Fst表明有93.25％的遺傳變異是由群體內(nèi)個(gè)體間的差異造成的，群體內(nèi)的變異程度較大。（4）在BL75位點(diǎn)上，Ⅱ系達(dá)到純合狀態(tài)。（5）沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雌核發(fā)育的異精效應(yīng)。