基于自然群體定位亞洲棉抗黃萎病關鍵基因及功能分析.pdf

1、棉花是我國重要的經濟作物之一，也是世界第二大紡織纖維工業(yè)原料和食用油原料。但是，棉花的種植長期以來都受到黃萎病的影響，導致棉花的產量和纖維品質都受到巨大破壞，給廣大棉農帶來重大經濟損失。而隨著科學技術的發(fā)展，尤其是轉基因技術在棉花中的成功應用，給徹底戰(zhàn)勝黃萎病帶來了希望。
　　近年來，通過各種技術手段，越來越多的抗病基因被挖掘。其中，GST(GlutathioneS-transferase)已經成為植物抗逆研究中的熱點。越來越多的

2、研究表明，GST能對植物受到的多種生物和非生物脅迫做出反應，并且在水楊酸信號通路中發(fā)揮了重要作用。
　　本研究以215份自然群體（亞洲棉）為實驗材料，利用GWAS(genome wide association study)分析得到與黃萎病密切相關的基因。通過VIGS(virus induced gene silencing)在抗病品種中對其分子生物學特性進行分析，再通過將基因轉化擬南芥后對其進行抗病鑒定以及利用多種分子生物學手段

3、分析其與SA(Salicylic acid)之間的關系，得到以下實驗成果:
　　1.基因表達模式分析
　　qRT-PCR實驗結果表明GaGSTF9在抗病品種中被黃萎病菌誘導表達，而在感病品種中表達量變化不大。此外，還有很多病原相關基因被誘導表達，這表明這些基因相互協作，共同幫助植物抵御大麗輪枝菌的侵染。激素處理結果表明，GaGSTF9可被SA誘導表達。
　　2.VIGS實驗
　　通過構建VIGS干涉載體干涉棉花，

4、以及統計病指、大麗輪枝菌定量實驗、恢復實驗和臺盼藍染色，我們發(fā)現抗病品種中的GaGSTF9被沉默后變得感病。這說明，GaGSTF9在抗病品種對抗大麗輪枝菌侵染過程中起到了重要作用。
　　3.轉基因擬南芥的功能分析
　　利用農桿菌介導的方法將GaGSTF9轉入擬南芥中進行超表達，產生轉基因擬南芥。通過對轉基因進行抗病鑒定以及一系列的分子實驗后發(fā)現:轉基因擬南芥的抗病性比野生型擬南芥要高。而且通過檢測SA標記基因表達量、SA含量