miR-498、miR-let-7d及miR-let-7e與乳腺癌相關(guān)性的研究乳腺葉狀腫瘤的臨床特點(diǎn)及預(yù)后分析.pdf

1、第一部分miR-498、miR-let-7d和miR-let-7e與乳腺癌相關(guān)性的研究
　　目的:本研究的目的是分析miR-498、miR-let-7d5p、miR-let-7d3p、miR-let-7e5p及miR-let-7e3p在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。
　　方法:前期研究中，我們利用Snail誘導(dǎo)永生化的乳腺癌細(xì)胞系MCF-10A發(fā)生EMT，然后利用miRNA芯片分析發(fā)生EMT前后MCF-1

2、0A中miRNA的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)miR-498在EMT后表達(dá)量明顯升高，說(shuō)明這個(gè)miRNA可能對(duì)EMT有促進(jìn)作用。另外，我們構(gòu)建了一個(gè)含有1000多種microRNAs前體的病毒庫(kù)，然后用該病毒庫(kù)去感染非轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞系MCF-7，通過(guò)Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)去選擇并富集這些透膜細(xì)胞，并形成單克隆。最后，對(duì)這些單克隆進(jìn)行microRNAs測(cè)序，發(fā)現(xiàn)了一些對(duì)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移可能具有促進(jìn)作用的microRNAs，其中包括miR-let-7d

3、及miR-let-7e。然后，利用RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)miR-498、miR-let-7d5p、miR-let-7d3p、miR-let-7e5p及miR-let-7e3p在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達(dá)，并同時(shí)收集這些乳腺癌患者的臨床病理資料。
　　結(jié)果:相比乳腺正常組織，miR-498、miR-let-7d3p及miR-let-7e3p在乳腺癌中的表達(dá)下調(diào)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0004，0.0012及0.0453）

4、。miR-let-7d3p在乳腺癌組織中的表達(dá)與患者月經(jīng)初潮年齡、P53及脈管瘤栓呈相關(guān)性(P=0.0177，0.0044及0.0166)。miR-let-7e5p在乳腺癌組織中的表達(dá)與ER、PR、EGFR及分子分型有相關(guān)性（P=0.0091，0.0096，0.0166及0.0287），但與Her-2表達(dá)及Ki-67指數(shù)無(wú)關(guān)(P=0.6733，P=0.8121)，與CK5&6有相關(guān)趨勢(shì)(P=0.0550)。miR-let-7e3p在乳腺

5、癌組織中的表達(dá)與脈管瘤栓呈相關(guān)性(P=0.0398)。
　　結(jié)論: miR-498、miR-let-7d3p及miR-let-7e3p在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中可能具有抑癌作用。miR-let-7d3p在月經(jīng)初潮晚、無(wú)脈管瘤栓及P53陽(yáng)性的乳腺癌患者中表達(dá)量高，其與P53的具體相互作用機(jī)制不詳，但前者提示，miR-let-7d3p在乳腺癌中是一種保護(hù)性因素。miR-let-7e5p在ER(+)、PR(+)、CK5&6(-)、EGFR(-

6、)及Luminal型乳腺癌中高表達(dá)，提示miR-let-7e5p在乳腺癌中是一種保護(hù)性因素，且miR-let-7e5p與ER、PR、CK5&6及EGFR間的相互聯(lián)系及作用機(jī)制，有待于進(jìn)一步研究。miR-let-7e3p與脈管瘤栓成負(fù)相關(guān)，提示miR-let-7e3p在乳腺癌中可能具有抑制轉(zhuǎn)移的作用。
　　第二部分乳腺葉狀腫瘤的臨床特點(diǎn)及預(yù)后分析
　　目的:初步探討乳腺葉狀腫瘤三種組織學(xué)類(lèi)型間臨床特征方面的差異及影響葉狀腫瘤無(wú)

7、病生存情況的因素。
　　研究方法:回顧性分析我院2002年1月至2012年12月間收治的共246例女性乳腺葉狀腫瘤患者的相關(guān)臨床資料，包括患者發(fā)病年齡、就診年齡、病程、初治腫瘤大小、腫瘤部位、病理類(lèi)型、有無(wú)潰瘍、初治手術(shù)時(shí)間及方式、有無(wú)局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、有無(wú)纖維腺瘤病史、復(fù)發(fā)期間有無(wú)病理改變、局部復(fù)發(fā)次數(shù)及術(shù)后治療。并進(jìn)行隨訪至2014-5-20日。中位隨訪時(shí)間為48個(gè)月，56例出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)，5例出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，1例局部復(fù)發(fā)伴遠(yuǎn)處

8、轉(zhuǎn)移。65人失訪，失訪率為26％。
　　結(jié)果:乳腺葉狀腫瘤三種組織學(xué)類(lèi)型間單因素分析，發(fā)現(xiàn)發(fā)病年齡，就診年齡，初治腫瘤大小，有無(wú)潰瘍，初治手術(shù)方式及有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移P值均＜0.05(P=0.014，P=0.018，P＜0.000，P=0.003，P＜0.000，P=0.001)，即三種組織學(xué)類(lèi)型的葉狀腫瘤在上述方面存在差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而無(wú)病生存時(shí)間及有無(wú)復(fù)發(fā)P值分別為0.055及0.060，接近0.05，趨向于有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

9、多因素分析采用有序多分類(lèi)Logistic回歸，模型中有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及局部腫物切除P值分別為0.041及0.018，均＜0.05，表現(xiàn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而初治腫瘤大小P值為0.052，趨向于有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在研究乳腺葉狀腫瘤無(wú)病生存的預(yù)測(cè)因素時(shí)，Kaplan-Meier單因素分析發(fā)現(xiàn)，有無(wú)纖維腺瘤病史為預(yù)測(cè)葉狀腫瘤復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，P值＜0.000.而局部腫物切除術(shù)比乳腺單純切除及改良根治術(shù)有著更高的局部復(fù)發(fā)率，P值為0.043。且三種病理類(lèi)型葉