CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞在幽門螺桿菌感染中作用的初步研究.pdf

1、目的:構(gòu)建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染C57BL/6小鼠的動(dòng)物模型,綜合分析CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)量及其相關(guān)細(xì)胞因子水平來評(píng)價(jià)其在H.pylori感染過程中的作用。
　　方法:構(gòu)建H.pyori感染C57BL/6小鼠的動(dòng)物模型;用流式細(xì)胞術(shù)分析對(duì)照組、感染組、治療組小鼠胃組織固有層淋巴細(xì)胞和脾淋巴細(xì)胞中CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞的百分比;用PBS、H. pylori超

2、聲上清、PMA+Ionomycin+BFA做抗原刺激培養(yǎng)治療組小鼠脾淋巴細(xì)胞15h,用流式細(xì)胞術(shù)分析CD4+Foxp3+Treg的百分比;RT-PCR檢測(cè)小鼠胃組織Foxp3、IL-10、TGF-β1的mRNA的表達(dá);ELISA檢測(cè)小鼠胃組織勻漿上清液、血清和脾淋巴細(xì)胞抗原刺激培養(yǎng)上清中 IL-10、IFN-γ和TGF-β1的含量;免疫組化檢測(cè) Foxp3+Treg在小鼠胃組織中的分布及數(shù)量;HE染色觀察H.pyori感染對(duì)C57BL/

3、6小鼠造成的損傷和治療后的效果。
　　結(jié)果:感染組小鼠胃組織固有層淋巴細(xì)胞和脾淋巴細(xì)胞中CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞的百分比分別為1.22±0.25％,2.97±0.16%,高于PBS組和治療組,P<0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;H. pylori超聲上清刺激培養(yǎng)的脾淋巴細(xì)胞中,CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞的百分比為2.18±0.05%,高于 PBS對(duì)照組,低于陽性對(duì)照組,P<0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;感染組小鼠胃組織高表達(dá)Fox

4、p3 mRNA,PBS組和治療組幾乎不表達(dá)Foxp3 mRNA;H. pylori超聲上清刺激培養(yǎng)的脾淋巴細(xì)胞上清液中,IL-10的含量分為70.17±17.15(pg/mg),高于 PBS組和陽性對(duì)照組, P<0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, TGF-β1的含量為1234.83±126.92(pg/mg),高于 PBS組,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;感染組小鼠的胃組織中Foxp3+Treg細(xì)胞的數(shù)目為18.42±6.53,高于PBS組和治療組

5、,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　(1) H. pylori感染引起感染部位CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)目增多,其百分比上升,并伴隨著H. pylori的根除而減少,CD4+Foxp3+Treg細(xì)胞與H. pylori感染密切相關(guān)。
　　(2) H. pylori感染后,會(huì)導(dǎo)致胃組織Foxp3 mRNA表達(dá)增高。
　　(3) H. pylori超聲抗原能有效刺激脾淋巴細(xì)胞向Treg細(xì)胞轉(zhuǎn)變,并