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文檔簡介
1、分類號:R7421密級:學位類別:科學學位口專業(yè)學位曲學校代碼:10062學號:2010702282學科門類:醫(yī)學西天坪眚科袁警Illl蠢NJlN麓蠢OH:l睢U—n,鼉囊lSllrY碩士學位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目:牛磺酸對匹羅卡品致病大鼠海馬苔蘚纖維出芽的影響TITLE:Effectsoftaurineonthemossyfibersproutinginthehippocampusofepilepticr
2、atsinducedbypilocarpine一級學科:臨床醫(yī)學二級學科:神經病學論文作者:楊君指導教師:孔慶霞導師組成員:郝延磊馮勛剛天津醫(yī)科大學研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文捅要目的:研究?;撬釋ζチ_卡品致癇大鼠海馬苔蘚纖維出芽的影響。方法:1、制作匹羅卡品癲癇動物模型。將致癇鼠隨機分為三組,空白組、牛磺酸治療組及治療對照組,每組lO只。2、?;撬嶂委熃M于6天每天腹腔注射29/kg?;撬?。觀察牛磺酸治療組于不同時
3、間點的癇性發(fā)作行為學改變,比較其癇性發(fā)作持續(xù)時間及發(fā)作分級的差異。行為學觀察參照Racine發(fā)作分級標準,制訂行為學觀察表,觀察造模后各組大鼠癇性發(fā)作行為表現,以造模后至首次出現Racine標準III級以上發(fā)作時間計算潛伏期,分別記錄大鼠面部陣攣、節(jié)律點頭/甩尾、前肢陣攣、后肢站立/全身抽動、竄動/跌倒的次數。IV級以上大發(fā)作1h后腹腔注射10%水合氯醛(300mg/kg)終止發(fā)作,若注射水合氯醛30min后沒有終止發(fā)作,予150mg/
4、kg劑量重復注射至終止(以3次為最高限)。3、行為學觀察結束后,觀察致癇鼠海馬組織中苔蘚纖維出芽情況。Nissl染色:切片經二甲苯、梯度酒精脫脂至水,去離子水沖洗3min,1%甲苯胺藍60℃浸染30min,70%乙醇2min,95%乙醇分化(鏡下控制,以尼氏小體顯示清晰為度),無水乙醇快速脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。Timm染色:運用改良的Timm方法,切片依次浸入0I%Na2S(溶于001mol/LPBS),3%戊二醛各lh,然后
5、再回到OI%Na2S溶液浸泡1h。在暗室內將晾干的切片入新鮮配置Timm顯色液中孵育30min,(顯色液的配置:50%阿拉伯膠粉60mL,檸檬酸緩沖液10mL(pH=3),56%對苯二酚30mL,17%硝酸銀lmL,硝酸銀最后加入)。暗室中去離子水沖洗5min,再流水沖洗20min,蘇木素復染15~30s,常規(guī)梯度脫水透明封片。實驗數據采用SPSSl70軟件進行統計處理,結果以XS表示,采用單因素方差分析比較組間差異,P005為差異有統
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