丹參酮ⅡA對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄高血壓大鼠心肌肥厚的作用及分子生物學(xué)機(jī)制.pdf

1、心肌肥厚是心臟對(duì)多種疾病包括高血壓、機(jī)械壓力負(fù)荷、心肌梗塞、心律失常、內(nèi)分泌機(jī)能紊亂以及心肌收縮蛋白基因突變而產(chǎn)生的適應(yīng)性病理反應(yīng)。在疾病早期，因心臟作功增加可引起代償性心肌肥厚反應(yīng)。持續(xù)性的心肌肥厚能夠引起擴(kuò)張性心肌病、心律失常、心力衰竭甚至猝死。心肌肥厚是引起心血管疾病發(fā)病率和病死率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　 研究發(fā)現(xiàn)在心肌肥厚時(shí)左心室重量普遍增高，心血管事件發(fā)生率是無(wú)心肌肥厚者的2-4倍。心肌肥厚不僅是一個(gè)病理生理過(guò)程，而更是

2、一個(gè)影響其短期和長(zhǎng)期預(yù)后的失代償性變化。它的不可逆性進(jìn)展可以直接導(dǎo)致心力衰竭。目前臨床上用于治療心肌肥厚的治療藥物主要有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑和鈣離子通道阻滯劑，但皆因存在不同程度的副作用而使其臨床應(yīng)用受到一定限制。而心肌肥厚的治療是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程，因此尋找一些療效好而毒副作用低的藥物顯得十分必要。
　　 丹參酮ⅡA是中藥丹參的主要脂溶性成分。目前已發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA可以減輕、逆轉(zhuǎn)高血壓左心室肥厚，但其具體作用

3、機(jī)制尚未闡明。
　　 本研究擬在腹主動(dòng)脈縮窄的高血壓大鼠上構(gòu)建心肌肥厚模型，將丹參酮ⅡA與經(jīng)典的抗心肌肥厚藥物血管緊張素1型受體拮抗劑――纈沙坦比較，以探討丹參酮ⅡA逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的分子生物學(xué)機(jī)制。目的：研究丹參酮ⅡA對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)后大鼠左室心肌肥厚的作用。
　　 方法：40只健康SD大鼠，行腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)建立高血壓左室心肌肥厚模型，另取8只大鼠行假手術(shù)。術(shù)后4周將手術(shù)大鼠隨機(jī)分為心肌肥厚組、丹參酮低劑量組(10mg/K

4、g/d腹腔注射)、丹參酮高劑量組(20mg/Kg/d腹腔注射)及纈沙坦組(10mg/Kg/d灌胃)。用藥8周后通過(guò)超聲心動(dòng)圖測(cè)定左室后壁、室間隔的厚度及左室射血分?jǐn)?shù)(EF)；取左心室組織檢測(cè)左心室質(zhì)量指數(shù)(left ventricular mass index，LVMI)、病理切片HE染色測(cè)量心肌纖維直徑(myocardial fiber dimension，MFD)。
　　 結(jié)果：
　　 1.心肌肥厚組、丹參酮組(高、

5、低劑量)的血壓顯著高于假手術(shù)組及纈沙坦組(p＜0.01)，丹參酮高、低劑量組及心肌肥厚組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p﹥0.05)，纈沙坦組的血壓值降至正常、但仍明顯高于假手術(shù)組(p＜0.05)。
　　 2.丹參酮高、低劑量組和纈沙坦組的室間隔厚度均高于假手術(shù)組(p＜0.05)，顯著低于心肌肥厚組(p＜0.01)；丹參酮兩組的室間隔厚度無(wú)差異(p﹥0.05)，但高于纈沙坦組(p＜0.05)。
　　 3．丹參酮低劑量、高劑量組及纈沙

6、坦組之間左室后壁值數(shù)據(jù)沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)，此三組左室后壁值均明顯低于心肌肥厚組(p＜0.01)，但尚未恢復(fù)至正常水平(p＜0.05)。
　　 4．所有各組的EF值均在正常值范圍(>60％)，尚未表現(xiàn)出心功能衰竭。但心肌肥厚組的EF值小于其他各組(p＜0.05)，丹參酮組的EF也小于纈沙坦組(p＜0.05)。
　　 5．丹參酮低劑量和高劑量組間LVMI和MFD沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)，纈沙坦組和丹參酮各組

7、的LVMI、MFD均高于假手術(shù)組(p＜0.05)，顯著低于心肌肥厚組(p＜0.01)；丹參酮兩組的LVMI、MFD均高于纈沙坦組(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 丹參酮Ⅱ-A對(duì)心肌肥厚的逆轉(zhuǎn)作用是非血壓依從性的。丹參酮Ⅱ-A與血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑纈沙坦均可阻止、逆轉(zhuǎn)高血壓心肌肥厚的發(fā)展，但其作用弱于纈沙坦。
　　 第二部分 丹參酮ⅡA對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄大鼠肥厚心肌
　　 血管緊張素受體的影響

8、>　　 目的：通過(guò)研究丹參酮ⅡA對(duì)腹主動(dòng)脈大鼠肥厚心肌血管緊張素受體及細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的影響，探討丹參酮ⅡA逆轉(zhuǎn)高血壓左心室肥厚的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　 方法：取各組大鼠的左心室組織，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、免疫印記法(Western blotting)分別檢測(cè)AT1、AT2受體mRNA和蛋白的表達(dá)水平。利用激光共聚焦顯微鏡測(cè)定心肌細(xì)胞內(nèi) Ca2+濃度的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1．心肌肥

9、厚組的AT1 mRNA和蛋白的表達(dá)顯著高于其他各組(p＜0.01)；丹參酮ⅡA高、低劑量組間無(wú)差異(p﹥0.05)，丹參酮ⅡA組高于纈沙坦組(P＜0.05)；丹參酮ⅡA組和纈沙坦組的AT1基因表達(dá)均未降至假手術(shù)組水平(p＜0.05)。
　　 2.纈沙坦組的AT2 mRNA和蛋白表達(dá)水平較其他各組升高(p＜0.05)，其他各組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p﹥0.05)。
　　 3．心肌肥厚組細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]I明顯高于其他各組(p＜

10、0.01)；丹參酮高劑量組與假手術(shù)組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p﹥0.05)；纈沙坦組和丹參酮低劑量組仍高于假手術(shù)組和丹參酮高劑量組(p＜0.05)；丹參酮低劑量組細(xì)胞內(nèi)鈣濃度與纈沙坦組之間無(wú)差異(p﹥0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 丹參酮ⅡA和纈沙坦均可通過(guò)下調(diào)AT1基因表達(dá)、阻止心肌細(xì)胞的鈣離子內(nèi)流發(fā)揮逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的作用，AT2有可能參與了纈沙坦降低血壓、逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的作用。
　　 第三部分 丹參酮IIA對(duì)腹主動(dòng)脈

11、縮窄高血壓大鼠
　　 肥厚心肌一氧化氮合酶的影響
　　 目的：通過(guò)研究丹參酮ⅡA對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄大鼠肥厚心肌一氧化氮合酶的影響，探討丹參酮ⅡA逆轉(zhuǎn)高血壓左心室肥厚的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　 方法：取各組大鼠的左心室組織，利用硝酸還原酶法測(cè)定心肌組織的NO含量，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、免疫印記法(Western blotting)分別檢測(cè)eNOS的基因表達(dá)水平和蛋白激酶C(PKC)的活性。
　

12、　 結(jié)果：
　　 1.假手術(shù)組的心肌組織NO含量明顯高于其他各組(p＜0.01)；丹參酮高、低劑量組與纈沙坦組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p﹥0.05)，但此三組的NO含量明顯高于心肌肥厚組(p＜0.01)。
　　 2．心肌肥厚組的eNOS mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯低于其他各組(p＜0.01)，纈沙坦組低于假手術(shù)組和丹參酮組(p＜0.05)，丹參酮高、低劑量組與假手術(shù)組之間無(wú)差異(p﹥0.05)。
　　 3．心肌肥厚組