東方蜜蜂微孢子蟲在浙江省西方蜜蜂中的流行性調(diào)查及其防治研究.pdf

1、養(yǎng)蜂業(yè)不僅是畜牧業(yè)的重要組成部分，在提高農(nóng)作物產(chǎn)量和質(zhì)量以及維護生物多樣性等方面也發(fā)揮重要作用。然而，近年來，世界養(yǎng)蜂業(yè)形勢普遍嚴峻，許多歐美養(yǎng)蜂國家蜂群嚴重衰退，不僅給蜂農(nóng)造成巨大損失，也引起人們對授粉危機的擔憂。東方蜜蜂微孢子蟲（Nosema ceranae）是一種以專營成年蜜蜂腸道細胞為主的寄生蟲，通過吸取蜜蜂的營養(yǎng)和能量，實現(xiàn)其在蜜蜂體內(nèi)的大量繁殖。作為西方蜜蜂(Apis melliferaL.)的一種新型病原，N.cerana

2、e嚴重威脅西方蜜蜂健康。該病原不僅破壞蜜蜂腸道組織、影響蜜蜂正常的消化道功能，降低蜜蜂的免疫力，促使蜜蜂采集行為提前，同時也會為其他病原菌的入侵提供可乘之機，最終使蜜蜂壽命縮短，蜂群群勢下降。
　　研究發(fā)現(xiàn)，在我國，N.ceranae已基本取代（西方）蜜蜂微孢子蟲(Nosemaapis)。然而，關(guān)于N.ceranae在我國西方蜜蜂中的流行病學研究較少。浙江省是我國主要的養(yǎng)蜂大省之一，由N.ceranae在西方蜜蜂中引起的蜜蜂孢子蟲

3、病在浙江尚未有系統(tǒng)的研究。此外，我國目前缺乏防治N.ceranae的有效且安全藥物。因此，為了明確N.ceranae在浙江省西方蜜蜂中的流行情況和危害，開發(fā)出有效防治蜜蜂孢子蟲病的藥物，本課題于2013年4月至2016年1月對浙江省西方蜜蜂蜂群中N.ceranae的流行情況進行定期調(diào)查，并結(jié)合歐盟利用植物制劑防治蜜蜂孢子蟲病和我國防治其他動物孢子蟲病的經(jīng)驗，篩選有效抑制孢子增殖的植物提取物。研究內(nèi)容和主要結(jié)果如下:
　　1.N.c

4、eranae在浙江省西方蜜蜂蜂群中的流行情況
　　(1)2013年4月至2016年1月，從浙江省8個縣、市地區(qū)19家定地蜂場采集的701份樣品用于蜜蜂微孢子蟲種類的鑒定及其孢子量的檢測。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，目前感染浙江省西方蜜蜂的微孢子蟲主要為N.ceranae，未檢出N.apis。
　　(2)在2013年至2016年的不同季度中，8個地區(qū)19家蜂場均有N.ceranae感染。在701群蜜蜂中，有74％的蜂群感染N.ceranae，其

5、中，以中等感染水平為主(58％);嚴重感染率為0;輕微感染率為16％。
　　(3)從季節(jié)性感染情況看，N.ceranae在浙江省不同地區(qū)西方蜜蜂蜂群中全年感染，且春、夏兩季感染水平普遍相對偏高，平均感染率都在85％以上。N.ceranae在秋、冬兩季的感染率相對較低，但也均在50％以上。
　　(4)自2014年3月起，金華地區(qū)N.ceranae的總體平均感染率逐漸升高，并以中等感染水平為主。其中，DJH、WFH和ZGQ等3家

6、蜂場全年嚴重感染N.ceranae;盡管CWC蜂場在2014年3月至2014年12月期間均未檢出N.ceranae，但自2015年4月起，N.ceranae的感染水平顯著增加。
　　(5)平湖地區(qū)不同季度N.ceranae的總體感染水平季度差異不顯著，但均以中等感染水平為主。總體上，5家蜂場N.ceranae的平均感染率均在80％左右，但冬季的感染水平略低。
　　2.植物提取物防治蜜蜂孢子蟲病的效果
　　(1)實驗室條

7、件下，采用1％濃度研究11味植物提取物防治蜜蜂孢子蟲病的效果。結(jié)果表明，穿心蓮水煎劑、葡萄皮醇提物以及黃柏水煎劑均能有效抑制N.ceranae孢子的增殖。
　　(2)采用0.5～7％之間不等的5個濃度探究3種有效植物提取物抑制孢子增殖的劑量效應(yīng)。結(jié)果表明，穿心蓮水煎劑和黃柏水煎劑對孢子增殖的抑制具有顯著的劑量效應(yīng)(p＜0.05)，濃度越高，其抑制孢子增殖的效果越好。5個不同濃度的葡萄皮醇提物均能顯著降低患病蜜蜂體內(nèi)的孢子數(shù)，但劑量

8、效應(yīng)不顯著(p＞0.05)。
　　3.穿心蓮水提物對蜜蜂健康的影響
　　通過初篩和劑量效應(yīng)研究發(fā)現(xiàn)，穿心蓮水煎劑不僅能有效抑制孢子增殖，且對蜜蜂安全。因此，我們從蜜蜂壽命水平和腸道穩(wěn)態(tài)（組織形態(tài)水平以及分子水平）探討7％穿心蓮水煎劑對蜜蜂健康的影響，并對穿心蓮水煎劑及其有效成分單體抑制孢子的效果進行比較。研究結(jié)果表明:
　　(1)穿心蓮水煎劑能顯著提高感染N.ceranae的蜜蜂存活率(p＜0.05)。
　　(2

9、)與感染N.ceranae且不給藥的蜜蜂相比，感染N.ceranae的蜜蜂在給飼穿心蓮水煎劑后，其中腸組織更加致密、完整。這表明，穿心蓮水煎劑促進了患病蜜蜂腸道組織的修復。此外，無論是患病蜜蜂還是健康蜜蜂，在飼喂7％穿心蓮水煎劑后，其中腸組織中再生細胞數(shù)目明顯增多，這表明穿心蓮水煎劑能促進蜜蜂腸道細胞的更新。
　　(3)穿心蓮水煎劑通過促進armadillo、basket以及frizzled等3個基因的上調(diào)表達，并抑制grouch