29800.中華蜜蜂中腸細胞培養(yǎng)及csbv感染中華蜜蜂和意大利蜜蜂幼蟲的蛋白質(zhì)組分析

1、中山大學博士學位論文中華蜜蜂中腸細胞培養(yǎng)及CSBV感染中華蜜蜂和意大利蜜蜂幼蟲的蛋白質(zhì)組分析姓名：張國只申請學位級別：博士專業(yè)：動物學指導教師：韓日疇20090605摘要幼蟲期易感染病害的原因之一。為了繁殖中蜂囊狀幼蟲病病毒，在實驗室條件下以CSBV飼喂2日齡中蜂幼蟲，飼喂2，4，6，8h的幼蟲在培養(yǎng)24h后死亡率分別為83％、167％、583％和583％，72h后死亡率分別為75O％、667％、100％和917％。本研究還分析了營養(yǎng)雜

2、交(中蜂王漿飼喂意蜂幼蟲或意蜂王漿飼喂中蜂幼蟲)的中、意蜂3日齡幼蟲蛋白表達圖譜。結(jié)果表明，營養(yǎng)雜交可改變蜜蜂幼蟲的蛋白表達。比較營養(yǎng)雜交的中蜂3日齡幼蟲的蛋白圖譜可知，差異蛋白點為4個(營養(yǎng)雜交后3個消失，1個出現(xiàn))，上調(diào)蛋白點(3倍以上)為5個，下調(diào)蛋白點(3倍以上)為11個，差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定表明，消失的蛋白分別為肌動蛋白、泛素綴合酶2(E2)和變態(tài)化學趨向蛋白(ehe3)，出現(xiàn)的蛋白為轉(zhuǎn)錄剪接因子(SF2)。比較營養(yǎng)雜交的意蜂

3、3日齡幼蟲的蛋白圖譜可知，差異蛋白點為11個(營養(yǎng)雜交后6個消失，5個出現(xiàn))，上調(diào)蛋白點(3倍以上)為8個，下調(diào)蛋白點(3倍以上)為10個，差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定表明，消失的蛋白分別為Hsp5、分子伴侶TCP1、硫氧還蛋白過氧化物酶l、轉(zhuǎn)錄延伸因子2(EF2)、延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH)和1個未知功能蛋白，出現(xiàn)的蛋白分別為線粒體節(jié)果酸脫氫酶、鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶和3個未知功能蛋白。本研究還測定了CSBV感染的中、意蜂營養(yǎng)雜交3同齡幼蟲的蛋白

4、圖譜的變化。比較中蜂3同齡幼蟲(中蜂王漿培養(yǎng))和CSBV感染的3同齡幼蟲的蛋白圖譜可知，差異蛋白點為7個(CSBV感染后1個消失，6個出現(xiàn))，上調(diào)蛋白點(3倍以上)為16個，下調(diào)蛋白點(3倍以上)為28個，差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定表明，CSBV感染后1個未知功能蛋白消失，CSBV感染后出現(xiàn)的蛋白分別為Hsp70、40S核糖體蛋白S3a、轉(zhuǎn)移聯(lián)合1型蛋白(MTAl)、Argonaute(AGO)蛋白、空泡HATP酶和過氧化物酶。比較中蜂3同齡

5、幼蟲(意蜂王漿培養(yǎng))和CSBV感染的3同齡幼蟲蛋白圖譜可知，差異蛋白點為4個(CSBV感染后2個消失，2個出現(xiàn))，上調(diào)蛋白點(3倍以上)有9個，下調(diào)蛋白點(3倍以上)有14個，差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定表明，CSBV感染后消失的蛋白為Hsp60和1個未知功能蛋白，出現(xiàn)蛋白分別為轉(zhuǎn)錄因子5A(eIF5A)、磷酸丙糖異構(gòu)酶I(TPll)。蛋白分析表明，空泡HATP酶和AGO蛋白可能與病毒感染有關(guān)。比較意蜂3日齡幼蟲(中蜂王漿培養(yǎng))和CSBV感染的