囊狀幼蟲病毒在中華蜜蜂幼蟲體內(nèi)的增殖規(guī)律研究.pdf

1、蜜蜂囊狀幼蟲病是由囊狀幼蟲病毒（Sacbrood virus）侵染引起蜜蜂幼蟲蛻皮液積累導(dǎo)致幼蟲不能化蛹而死的病毒病。
　　本試驗(yàn)建立了檢測(cè)中華蜜蜂囊狀幼蟲病毒的分子標(biāo)記，對(duì)該分子標(biāo)記克隆并測(cè)序后與數(shù)據(jù)庫(kù)中序列對(duì)比，驗(yàn)證了該分子標(biāo)記的特異性、靈敏性、應(yīng)用性，并將重組質(zhì)粒大量擴(kuò)增，純化后作為后期熒光定量的標(biāo)準(zhǔn)品；以SYBR Green I熒光定量PCR檢測(cè)囊狀幼蟲病毒靈敏度在1×101～4×102copies/μL之間；測(cè)得病蟲體內(nèi)

2、病毒含量達(dá)到3.0×1016 copies/μL，以飼喂的方式使-80℃保存的囊狀幼蟲病毒侵染中華蜜蜂幼蟲，發(fā)現(xiàn)能使幼蟲發(fā)病，出現(xiàn)明顯的囊狀幼蟲病癥狀，說(shuō)明-80℃保存3個(gè)月可以保持囊狀幼蟲病毒的侵染活性；對(duì)中華蜜蜂進(jìn)行室內(nèi)飼養(yǎng)，化蛹率達(dá)到76.0％，之后將病毒加入飼料中對(duì)健康幼蟲進(jìn)行病毒接種，化蛹率為31.3%，利用熒光定量PCR絕對(duì)定量方法測(cè)定不同時(shí)期幼蟲體內(nèi)病毒的絕對(duì)濃度，對(duì)幼蟲體內(nèi)病毒的增殖情況做出檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)該病毒在蜜蜂幼蟲體內(nèi)