TNF-α對(duì)CD15、CD15s及ST3GaL家族蛋白的影響.pdf

1、目的：
　　 CD15抗原是Lewis血型抗原之一,又稱LeX,屬細(xì)胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs)成員。CAMs是位于細(xì)胞表面的糖蛋白,與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。CD15s抗原是CD15抗原的唾液酸化形式,也屬于細(xì)胞粘附分子,它是E-選擇素的主要配體,它通過結(jié)合含有E-選擇素的血小板、粒細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)癌灶細(xì)胞轉(zhuǎn)移。
　　 細(xì)胞粘附分子受多種因素的調(diào)節(jié),特別是細(xì)胞因子的作用

2、。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子,可通過激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路使胞內(nèi)儲(chǔ)存的細(xì)胞粘附分子轉(zhuǎn)移到細(xì)胞表面從而使細(xì)胞膜表面該分子增加。已有研究表明:TNF-α能夠誘導(dǎo)多種腫瘤中CD分子含量上調(diào),如TNF-α能夠誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞株SW-1990細(xì)胞表面粘附分子CD44含量上調(diào),從而影響腫瘤細(xì)胞遷移等細(xì)胞生物學(xué)功能。但TNF-α對(duì)胃肝腫瘤細(xì)胞系中細(xì)胞粘附分子CD15及CD15

3、s的影響未見相關(guān)報(bào)道。本課題旨在研究CD15,CD15s分子在胃,肝腫瘤及正常細(xì)胞系中的含量與腫瘤遷移能力的關(guān)系,并研究TNF-α對(duì)肝癌細(xì)胞系CD15,CD15s及ST3Gal家族蛋白的影響。
　　 方法：
　　 應(yīng)用細(xì)胞芯片檢測(cè)人正常胃粘膜細(xì)胞系GES-1、具有轉(zhuǎn)移潛能人胃腺癌細(xì)胞系SGC-7901、人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細(xì)胞系HGC-27,人正常肝上皮細(xì)胞系L-02、人原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2、人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系SMM

4、C-7721表面是否存在CD15、CD15s抗原;用Western blot方法驗(yàn)證細(xì)胞芯片結(jié)果,檢測(cè)上述幾種腫瘤及正常細(xì)胞系中CD15及CD15s的含量;同時(shí)檢測(cè)TNF-α對(duì)肝癌細(xì)胞系中CD15,CD15s及ST3GaL家族蛋白的影響。
　　 結(jié)果：
　　 細(xì)胞芯片檢測(cè)發(fā)現(xiàn)具有轉(zhuǎn)移潛能人胃腺癌細(xì)胞系SGC-7901及人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細(xì)胞系HGC-27表面CD15、CD15s抗原含量明顯高于人正常胃粘膜細(xì)胞系GES-1;

5、人正常肝上皮細(xì)胞系L-02表面CD15、CD15s抗原含量較少;人原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2及人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系SMMC-7721表面CD15、CD15s抗原含量均較高;Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn),CD15在具有轉(zhuǎn)移潛能胃癌細(xì)胞系SGC-7901和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性胃癌細(xì)胞系HGC-27中含量明顯高于正常胃粘膜細(xì)胞系GES-1;在高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞系SMMC7721中含量明顯高于原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2及正常肝上皮細(xì)胞系L-02;C

6、D15s在正常胃粘膜細(xì)胞系GES-1、具有轉(zhuǎn)移潛能胃癌細(xì)胞系SGC-7901、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性胃癌細(xì)胞系HGC-27中含量逐漸增加,在正常肝上皮細(xì)胞系L-02、原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2、高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中含量也逐漸增加。與細(xì)胞芯片結(jié)果基本一致。TNF-α處理的肝癌細(xì)胞系中,原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2的CD15含量較對(duì)照組下調(diào)(P＜0.05),CD15s含量較對(duì)照組明顯上調(diào)(P＜0.05),但CD15和CD15s在高

7、轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中含量較對(duì)照組無明顯改變(P＞0.05);經(jīng)TNF-α處理的HepG-2細(xì)胞系的ST3GaL家族蛋白(6種)中ST3GaL-Ⅱ,ST3GaL-Ⅳ表達(dá)較對(duì)照組明顯上調(diào)(P＜0.05),其它四種ST3Gal-Ⅰ、ST3Gal-Ⅲ、ST3Gal-Ⅴ和ST3Gal-Ⅵ表達(dá)無明顯變化(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、細(xì)胞芯片和Western blot檢測(cè)部分胃,肝腫瘤及正常細(xì)胞系CD15,

8、CD15s抗原,發(fā)現(xiàn)CD15,CD15s抗原在人胃癌細(xì)胞系SGC-7901,HGC-27中含量高于正常細(xì)胞系GES-1,在人肝癌細(xì)胞系HepG-2,SMMC7721中含量高于正常細(xì)胞系L-02,在人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中含量高于人原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2中的含量。
　　 2、在人原發(fā)性肝癌細(xì)胞系HepG-2中,TNF-α導(dǎo)致CD15s含量增加同時(shí)減少CD15的含量。
　　 3、當(dāng)人原發(fā)性肝癌細(xì)胞系Hep