利用天然陽(yáng)離子聚合物殼聚糖提高有效性的口服疫苗微球的研究.pdf

1、本課題致力于將疫苗藥物制備成口服有效的陽(yáng)離子微球制劑，拓展疫苗的應(yīng)用范圍。微球的粒徑大小、疏水性、荷電性等理化性質(zhì)都直接影響到微球給藥系統(tǒng)的靶向作用、轉(zhuǎn)運(yùn)效率和免疫效果。針對(duì)影響M細(xì)胞攝取微球的這三大主要因素，本課題中分別以親水性材料海藻酸鈉、殼聚糖(Cs)，疏水性材料乳酸/羥基乙酸共聚物（PLGA）作為載體，以牛血清白蛋白（BSA）為模型藥物制備表面包裹殼聚糖的陽(yáng)離子微球，考察不同類型的載體材料對(duì)微球的形態(tài)、粒徑、蛋白包封率、載藥量、

2、表面荷電情況和釋放行為的影響。 論文的第一章中，以親水性材料海藻酸鈉和殼聚糖為載體材料，采用乳化交聯(lián)法制得BSA 海藻酸鈉/殼聚糖微球，80％以上的微球粒徑在1 μm ～10μm，微球表面帶正電，包封率為（81.4±1.5）％，載藥量為（6.4±0.1）％，但是在模擬胃液和模擬腸液中突釋都很明顯（0.5 h內(nèi)超過(guò)60％），在模擬腸液中釋藥速度很快，2h內(nèi)基本釋放完全。 論文的第二章，以疏水性材料PLGA和親水性材料殼聚糖

3、為載體材料，采用W/O/W 復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制得BSA PLGA/Cs微球，90％以上的微球粒徑在1μm～10μm，隨著外水相中殼聚糖濃度的增加，微球表面由帶負(fù)電轉(zhuǎn)變?yōu)閹д?，包封率為?0.4±6.3）％，載藥量為（8.4±0.3）％。與PLGA微球相比，殼聚糖的加入顯著地減少了突釋，延緩了釋藥速度。殼聚糖的分子量對(duì)釋藥速度影響顯著。 論文第三章，以雞新城疫苗為模型藥物，創(chuàng)新性地采用S/O/W乳化-溶劑揮發(fā)法制備得到雞新城疫苗

4、PLGA/殼聚糖陽(yáng)離子微球。采用紅血球凝集反應(yīng)（HA）測(cè)定疫苗的效價(jià)，考察制備過(guò)程中各工藝因素對(duì)疫苗活性的影響。采用血凝抑制反應(yīng)（HI）檢測(cè)動(dòng)物血清中的抗體水平，對(duì)微球口服免疫效果做出初步評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：疫苗活性的喪失主要來(lái)自于有機(jī)溶劑和長(zhǎng)時(shí)間的常溫下磁力攪拌，而且與常規(guī)W/O法制備初乳的過(guò)程相比，S/O法可以明顯地保護(hù)疫苗的活性。當(dāng)口服PLGA/殼聚糖微球中藥量為滴鼻劑量的10倍時(shí)，可以產(chǎn)生與滴鼻免疫相當(dāng)?shù)拿庖咝Ч?，明顯優(yōu)于PLGA

5、微球組。 論文的第四章，以乙肝疫苗為模型藥物制備PLGA/殼聚糖陽(yáng)離子微球，并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對(duì)口服微球產(chǎn)生的的體液免疫效果做初步評(píng)價(jià)。制得的微球表面帶正電，微球平均粒徑為3.86μm，95％以上的微球粒徑小于10μm。測(cè)得微球的包封率為（70.7±3.2）％，載藥量為（9.45±0.11）％。皮下注射組產(chǎn)生的抗體水平顯著高于PLGA口服微球組和PLGA/Cs口服微球組，而PLGA/Cs口服微球組的抗體水平優(yōu)于