重組人骨形成蛋白-2明膠微球的制備及其生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、研究背景:牙周缺損，包括牙周膜、牙骨質(zhì)的破壞，骨內(nèi)缺損的形成等，一直是臨床牙周治療的難點，而真正意義上的牙周組織再生應(yīng)達到以下四個標(biāo)準(zhǔn)：(1)重建功能性上皮封閉；(2)新的Sharpey’s纖維插入重建功能性牙周膜；(3)暴露根面上形成新的無細胞性牙骨質(zhì)；(4)牙槽骨高度恢復(fù)到距釉牙骨質(zhì)界2mm以內(nèi)。牙周組織再生的基礎(chǔ)是牙周膜細胞(PDLCs)，但在牙周病損部位，牙周膜細胞的來源非常有限，有研究表明，牙周膜組織及細胞中有BMP分布，BM

2、P可促進PDLCs增殖和DNA合成，升高PDLCs的堿性磷酸酶(ALP)活性。在牙周組織修復(fù)中，rhBMP-2不僅誘導(dǎo)牙槽骨的再生，而且可以促進牙骨質(zhì)和牙周纖維的再生。因此，人們在牙周引導(dǎo)組織再生術(shù)及牙周組織工程的研究中，期望rhBMP-2的參與能獲得比較理想的牙周再生。 但BMP單純植入體內(nèi)擴散太快，也易被蛋白酶水解，因而不能在有效的時間內(nèi)作用于更多的靶細胞，其生物學(xué)效能難以得到充分發(fā)揮，因此BMP的臨床應(yīng)用需要一定的緩釋載體

3、。目前生長因子及可降解的載體材料生物學(xué)的最新成就已經(jīng)成功運用于軟骨、骨以及其他相關(guān)組織的組織工程研究中，牙周組織也是主要的研究目標(biāo)之一。 微球用于藥物載體的研究始于20世紀(jì)70年代中期，自此以后的研究發(fā)展十分迅速?，F(xiàn)有的研究發(fā)現(xiàn)藥物制成微球后，因其對特定器官和組織的靶向性及微球中藥物釋放的緩釋性，已經(jīng)成為近年來研究的熱點。雖然以各類微球為載體的新型藥物輸送系統(tǒng)不斷問世，在臨床醫(yī)學(xué)多個領(lǐng)域都得到了廣泛研究，但在牙周組織再生方面的應(yīng)

4、用國內(nèi)外還鮮有報道。若能將微球緩釋系統(tǒng)引入牙周組織工程領(lǐng)域，控制rhBMP-2等生長因子的釋放，將對組織工程研究中生長因子的緩釋提供新的思路。 研究目的: 利用生物相容性好、無毒、可生物降解的明膠作為載體材料，采用優(yōu)化的雙相乳化冷凝聚合法制備rhBMP-2-GMS，并對其如下性質(zhì)：形態(tài)、粒徑、載藥率、包封率和穩(wěn)定性進行檢測，研究其在體外模擬環(huán)境下的釋藥規(guī)律，并探討其對人牙周膜細胞生物學(xué)行為的影響，進一步將其負(fù)載于珊瑚支架

5、上，嘗試構(gòu)建組織工程骨，了解其在牙周組織工程中的應(yīng)用前景。 結(jié)論: 1.探索出rhBMP-2-GMS的最佳制備方法，所得方法制備工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好。 2.制備的rhBMP-2-GMS形態(tài)園整，分散性好，4℃條件下放置穩(wěn)定，6個月內(nèi)仍具有良好生物性活性。 3.rhBMP-2-GMS體外釋藥實驗證明其具有良好的緩釋效果。 4.rhBMP-2-GMS對人PDLCs增殖和ALP活性的作用效果優(yōu)于單獨應(yīng)用r