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文檔簡介
1、目的:通過檢測RA患者輔助性T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子的情況,分析RA患者是否存在Th1/Th2失衡,并探討患者血漿中微粒(MPs)對(duì)Th1/Th2平衡的影響,為研究RA的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
方法:(1)目前尚無Th1與Th2的特異性的細(xì)胞表面標(biāo)志,因此主要以所分泌的細(xì)胞因子來區(qū)分。IFN-γ為Th1最特異分泌的細(xì)胞因子,IL-4為Th2最特異分泌的細(xì)胞因子,即Th1:CD4+IFN-γ+,Th2:CD4+IL-4+。采用流式細(xì)胞
2、術(shù)檢測RA患者輔助性T細(xì)胞胞內(nèi)產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-γ和IL-4。采用CBA方法檢測T細(xì)胞分泌到胞外的細(xì)胞因子,包括Th1型(IL-2、IFN-γ和TNF-α)、Th2型(IL-4、IL-6和IL-10)。(2)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血中T細(xì)胞和單核細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)水平。(3)收集RA患者血漿中MPs,檢測MPs對(duì)Th1/Th2平衡的影響。
結(jié)果:(1)RA緩解期患者臨床各參數(shù)均比活動(dòng)期患者有所改善(P<0.05);(2
3、)RA患者Th1細(xì)胞(CD4+IFN-γ+)比例明顯高于對(duì)照組(17.5%(2.9-36.6%)vs.33.5%(14.8-54.8%),P<0.05);Th2細(xì)胞(CD4+IL-4+)比例兩組之間沒有顯著差異(P>0.05);RA患者Th1/Th2比值明顯高于對(duì)照組(0.21(0.04-0.96)vs.0.12(0.05-0.25),P<0.05);(3)RA患者血清促進(jìn)體外培養(yǎng)的PBMC產(chǎn)生Th1型細(xì)胞因子(IFN-γ和TNF-α)
4、而抑制Th2型細(xì)胞因子(IL-6和IL-10)的分泌,且存在劑量依賴性;(4)RA活動(dòng)期患者Th1細(xì)胞(CD4+IFN-γ+)比例明顯高于緩解組(23.5%(13.8-28.5%)vs.7.4%(4.9-8.6%));Th2細(xì)胞(CD4+IL-4+)比例也同樣高于緩解組(11.5%(9.8-14.5%)vs.5.1%(3.5-6.9%));(5)靜息狀態(tài)下,RA患者外周血單核細(xì)胞Tim-3表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05),CD4+
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