血清蛋白質(zhì)譜及血清HER2在乳腺癌中的應(yīng)用.pdf

1、目的： 應(yīng)用表面加強(qiáng)激光解析電離化飛行時(shí)間質(zhì)譜(SELDI－TOF－MS)技術(shù)分析健康女性人群、乳腺良性腫瘤病人及乳腺癌病人血清蛋白質(zhì)譜，篩選差異蛋白質(zhì)峰并建立乳腺癌血清蛋白質(zhì)譜模型，并分析不同分期、不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及手術(shù)前后血清蛋白質(zhì)譜差異；分析乳腺癌病人中組織HER2與血清HER2之間以及組織HER2狀態(tài)與血清蛋白質(zhì)譜之間的關(guān)系，探討乳腺癌病人的組織HER2狀態(tài)與血清HER2以及血清蛋白質(zhì)譜的相關(guān)性。 方法：

2、 應(yīng)用SELDI技術(shù)，以弱陽離子交換芯片(CM10)結(jié)合血清蛋白質(zhì)，分析113例乳腺癌病人、103例乳腺良性腫瘤病人及92例健康對(duì)照女性的血清樣本，得到其蛋白質(zhì)譜，用Biomarker Pattern軟件分析三者蛋白質(zhì)譜圖并初步建立分類樹模型，再通過盲篩驗(yàn)證分類樹模型。進(jìn)一步分析乳腺癌不同分期、不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及手術(shù)前后蛋白質(zhì)譜差異。免疫組化檢測(cè)組織HER2表達(dá)，ELISA法檢測(cè)血清HER2水平，分析乳腺癌病人的組織HER2狀態(tài)與血

3、清HER2以及血清蛋白質(zhì)譜的相關(guān)性。 結(jié)果： 乳腺癌病人與健康對(duì)照女性比較，篩選出12個(gè)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白質(zhì)峰，經(jīng)Biomarker Pattern(BPS)軟件分析選出其中3個(gè)蛋白質(zhì)峰(4179、2740、2947 Da)組合構(gòu)建為分類樹模型(模型Ⅰ)。比較乳腺良性腫瘤病人與健康對(duì)照女性，篩選出11個(gè)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白質(zhì)峰，軟件分析選出其中2個(gè)蛋白質(zhì)峰(4179、6442 Da)構(gòu)建為分類樹模型(模型Ⅱ)。比較乳腺癌病

4、人與乳腺良性腫瘤病人，篩選出2個(gè)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白質(zhì)峰，通過軟件選出2個(gè)蛋白質(zhì)峰(7985和15952Da)構(gòu)建為分類樹模型(模型Ⅲ)。聯(lián)合分析上述三組差異血清蛋白質(zhì)譜，蛋白質(zhì)峰15952 Da在乳腺癌與健康對(duì)照女性、乳腺癌與乳腺良性腫瘤比較中差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(乳腺癌峰值12.00±5.42、乳腺良性腫瘤峰值6.13±3.31、健康對(duì)照女性峰值6.08±4.23)，蛋白質(zhì)峰7985 Da在乳腺癌、乳腺良性腫瘤與健康對(duì)照女性三組比較中差

5、異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(乳腺癌峰值10.01±3.75、乳腺良性腫瘤峰值6.09±2.35、健康對(duì)照女性峰值4.08±2.27)，其余10個(gè)蛋白質(zhì)峰在乳腺癌和乳腺良性腫瘤比較中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 Ⅰ期乳腺癌與健康對(duì)照女性比較有10個(gè)具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異蛋白峰。Ⅳ期與Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌病人比較未發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異蛋白峰。腋窩淋巴結(jié)陰性與腋窩淋巴結(jié)陽性乳腺癌之間比較未發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異蛋白峰。2947、3272、7985、15952

6、 Da四個(gè)蛋白質(zhì)峰術(shù)后1個(gè)月的峰值有向正常峰值變化的趨勢(shì)，蛋白質(zhì)峰7783 Da在術(shù)后7天及術(shù)后1月均增高，蛋白質(zhì)峰4179、5642、6442、6639、8705、13771 Da在術(shù)后7天及術(shù)后1月均低于正常對(duì)照峰值水平。 ELISA法檢測(cè)得出血清HER2陽性率與組織HER2狀態(tài)相關(guān)，組織HER2陽性乳腺癌血清HER2陽性率高于組織HER2陰性乳腺癌，部分組織HER2陰性乳腺癌血清HER2增高。SELDI技術(shù)分析組織HER2

7、陽性與陰性乳腺癌血清蛋白質(zhì)譜，未發(fā)現(xiàn)兩者間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異蛋白峰。 結(jié)論： (1)利用SELDI-TOF-MS技術(shù)可篩選出乳腺癌、乳腺良性腫瘤和健康對(duì)照女性血清蛋白質(zhì)譜存在的差異蛋白峰，蛋白質(zhì)峰7985 Da峰值的變化可能可以鑒別健康女性、乳腺良性腫瘤和乳腺癌，蛋白質(zhì)峰15952 Da可能是鑒別乳腺癌與非乳腺癌的血清標(biāo)志物。 (2)乳腺癌病人術(shù)前、術(shù)后7天以及術(shù)后1月血清蛋白質(zhì)譜存在差異，蛋白質(zhì)峰2947、3