蘋果三倍體品種“喬納金”的胚狀體誘導(dǎo)與再生體系建立.pdf

1、該文以蘋果三倍體品種"喬納金"試管苗葉片為試材,研究其最優(yōu)胚狀體發(fā)生體系建立的方法,測(cè)定胚狀體發(fā)生過程中的多胺變化,并對(duì)形態(tài)學(xué)和組織學(xué)作了分析,結(jié)果如下:將喬納金試管苗葉片接種在MS+BA 2.0 mg·L<'-1>+IAA 6.0 mg·L<'-1>+2,4-D 0.3 mg·L<'-1>培養(yǎng)基上預(yù)誘導(dǎo)6d,獲得胚性細(xì)胞,然后轉(zhuǎn)入MS+BA 2.0 mg·L<'-1>培養(yǎng)基上誘導(dǎo)胚狀體發(fā)生,最高誘導(dǎo)率可達(dá)96.1％.激素配比及濃度是誘

2、導(dǎo)胚狀體發(fā)生的關(guān)鍵.除激素配比外,影響喬納金最優(yōu)胚狀體發(fā)生體系建立的因素還有很多.其它影響因素的最佳組合為:取繼代培養(yǎng)30天的試管苗前三片葉,橫切三刀,近軸面向上平鋪在培養(yǎng)基上,蔗糖濃度為30 mg·L<'-1>,暗培養(yǎng)30天.在附加有2.0 mg·L<'-1>BA、6.0 mg·L<'-1> IAA和0.3 mg·L<'-1>2,4-D的MS培養(yǎng)基上,創(chuàng)傷葉片經(jīng)過6d胚性細(xì)胞誘導(dǎo)后,大部分葉片基本形態(tài)無明顯變化,個(gè)別葉片形態(tài)發(fā)生扭曲,

3、但傷口處無愈傷組織發(fā)生,傷口細(xì)胞呈淡褐色,傷口附近細(xì)胞呈淡黃色.胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)30d后,大部分已經(jīng)發(fā)育成熟.此時(shí),宜將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至MS+BA0.5 mg·L<'-1>+IAA0.1 mg·L<'-1>的培養(yǎng)基,光照條件下進(jìn)行壯苗培養(yǎng).20d后,將壯苗培養(yǎng)生長(zhǎng)至2cm左右的無根苗轉(zhuǎn)至MS+IBA 0.8mg·L<'-1>+IAA 0.7 mg·L<'-1>的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,生根率可達(dá)90％以上.一個(gè)月后長(zhǎng)成健壯的完整植株,煉苗后即可出瓶