河南省部分地區(qū)豬瘟流行病學(xué)調(diào)查及綜合防控措施研究.pdf

1、豬瘟(Classical swine fever，CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的一種急性、熱性、烈性、高度接觸性傳染病，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。目前，各國對(duì)該病均采取了嚴(yán)格的防控措施。我國長期以來堅(jiān)持采取以免疫接種為核心的綜合防控措施，在降低豬瘟感染率及發(fā)病率方面取得了較好效果。但由于多種原因該病仍在全國范圍內(nèi)不斷的流行，并呈現(xiàn)復(fù)雜化。位于中國中部地區(qū)的河南省生豬存欄量占全國的十

2、分之一，也深受該病的影響，經(jīng)濟(jì)損失十分巨大。為全面了解河南地區(qū)豬瘟流行情況，本文分析了豬瘟病毒核衣殼蛋白E0和E2變異方向，對(duì)河南省部分豬場的臨床病例進(jìn)行了豬瘟病毒的RT-PCR檢測和免疫效果調(diào)查，并制定了適合河南省的豬瘟控制方案。
　　1河南省豬瘟病毒E2基因和E0基因的序列分析
　　針對(duì)E0基因設(shè)計(jì)了一對(duì)套擴(kuò)引物，對(duì)臨床上有代表性的疑似豬瘟病例進(jìn)行了病毒核酸擴(kuò)增，并進(jìn)行了序列分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)河南省的豬瘟病毒之間E0基因同源

3、性極高，且其E0基因從密碼子程度上一直在向遠(yuǎn)離經(jīng)典毒株石門株和疫苗株HCLV的方向發(fā)展。而其編碼RNase酶活性區(qū)域氨基酸未有明顯變化。針對(duì)豬瘟病毒E2基因設(shè)計(jì)了簡并引物和內(nèi)套引物且進(jìn)行了擴(kuò)增，結(jié)果表明其中4株豬瘟病毒E2基因與經(jīng)典毒株石門株E2基因相比存在14個(gè)氨基酸變化，1株和石門株E2基因存在4個(gè)氨基酸變化。分析河南省豬瘟病毒的E2基因發(fā)現(xiàn)了一個(gè)糖基化位點(diǎn)的突變。對(duì)E2基因和E0基因進(jìn)行進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)河南省豬瘟病毒承受凈化選擇壓力。

4、以E2基因?yàn)榛A(chǔ)對(duì)河南地區(qū)豬瘟病毒進(jìn)行分型，首次發(fā)現(xiàn)河南省共同存在豬瘟基因1型和基因2型。這些研究提示河南省豬瘟病毒變異種類更加多樣化。
　　2河南省臨床病例豬瘟病毒的RT-PCR檢測
　　對(duì)來自河南地區(qū)的566份樣品采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示豬瘟感染率為19.07％。結(jié)合1957-2009河南四季時(shí)間和空間分布差異，使用5d滑動(dòng)平均溫度的方法劃分季節(jié)，發(fā)現(xiàn)春秋季節(jié)豬瘟感染率高于其他季節(jié)，

5、且差異顯著。這提示人們豬瘟病毒的傳播可能和季節(jié)有關(guān)。比2013年和2014年豬瘟病原陽性率有所下降。3河南省部分豬場豬瘟抗體監(jiān)測
　　用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì)2014年1月至2015年1月間采自河南省部分豬場的2365份血清樣品進(jìn)行了豬瘟抗體檢測，結(jié)果顯示母豬、仔豬、保育豬、育肥豬、后備豬及公豬抗體陽性率分別為80.0％、66.4％、52.9％、64.1％、78.9％、92.4％。公豬與經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體陽性率達(dá)到國家要求，

6、且抗體離散度較低，免疫效果較好。后備母豬的抗體陽性率雖然合格，但是離散度較大，免疫效果不理想，其他階段豬群免疫合格率未達(dá)到國家要求。與近3年豬瘟免疫抗體相比發(fā)現(xiàn)，陽性率逐年升高。河南地區(qū)豬瘟免疫情況有所好轉(zhuǎn)。
　　4豬瘟綜合防控措施的制定與應(yīng)用
　　在河南選定1個(gè)規(guī)模化豬場，根據(jù)豬場情況和之前對(duì)河南地區(qū)豬瘟的研究制定了防控策略，經(jīng)過1年防控措施的實(shí)施，比對(duì)本豬場在生產(chǎn)等各方面數(shù)據(jù)（豬瘟病原陽性率、各階段豬群抗體保護(hù)率、各階段