轉(zhuǎn)StBADH基因T1代番茄植株的耐鹽性鑒定.pdf

1、隨著蔬菜設(shè)施栽培的發(fā)展，土壤鹽漬化和次生鹽漬化日益突出，已經(jīng)嚴(yán)重地影響了蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)。植物對(duì)鹽害耐性是有差異的，挖掘耐鹽基因并培育耐鹽作物能減小鹽害損失。通過(guò)基因工程的方法將耐鹽基因轉(zhuǎn)入作物，培育耐鹽作物新品種是開(kāi)發(fā)利用鹽堿地的一種經(jīng)濟(jì)、有效的手段。番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）是一種耐鹽性中等、栽培廣泛并具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的蔬菜。番茄也是基因工程的模式生物之一，甜菜堿被認(rèn)為是最有希望的耐鹽滲透調(diào)節(jié)

2、物質(zhì)之一，但是番茄自身不能合成甜菜堿。如果利用基因工程技術(shù)把與甜菜堿合成相關(guān)的基因轉(zhuǎn)入番茄中，使其積累甜菜堿，將有可能達(dá)到增強(qiáng)番茄耐鹽性的目的。本試驗(yàn)的目的是驗(yàn)證轉(zhuǎn)StBADH基因番茄的耐鹽能力，即在200mmol·L-1的NaCl脅迫下，對(duì)轉(zhuǎn)StBADH基因的T1代番茄植株和未轉(zhuǎn)基因?qū)φ掌贩N‘金棚一號(hào)’進(jìn)行組織化學(xué)染色、PCR檢測(cè)及耐鹽性鑒定。取得的主要研究成果如下:
　　結(jié)果表明，在200mmol·L-1的NaCl脅迫下，GU

3、S組織化學(xué)染色和PCR鑒定結(jié)果均為陽(yáng)性的轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株和對(duì)照植株的相對(duì)電導(dǎo)率均有升高，但前者增加速率明顯低于后者，轉(zhuǎn)基因番茄的相對(duì)電導(dǎo)率始終低于對(duì)照。在脅迫15d時(shí)，轉(zhuǎn)基因番茄的大分子滲漏值顯著低于對(duì)照，而前者的BADH活性顯著高于后者。此結(jié)果說(shuō)明轉(zhuǎn)基因番茄T1代植株耐鹽性明顯高于對(duì)照，目的基因正常表達(dá)。
　　在NaCl脅迫下，轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株和對(duì)照的SOD變化趨勢(shì)均呈先上升后下降的趨勢(shì)。轉(zhuǎn)StBADH基因番

4、茄植株的POD活性呈先上升后下降最后略有回升的變化趨勢(shì)，而對(duì)照到了后期不呈現(xiàn)回升的趨勢(shì)。隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株游離脯氨酸含量持續(xù)上升;而對(duì)照僅在脅迫前期和中期有上升，在脅迫9d時(shí)開(kāi)始趨于平穩(wěn)。總的來(lái)說(shuō)，轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株的各項(xiàng)指標(biāo)均顯著高于對(duì)照，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化能力。轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株和對(duì)照的O2·-生成速率、膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量均顯著增加，但前者的各項(xiàng)指標(biāo)均顯著低于后者，轉(zhuǎn)StBADH基因

5、番茄植株發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用輕于對(duì)照，受到的氧化傷害較小。
　　在NaCl脅迫下，轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株和對(duì)照植株的APX、DHAR和GR活性均呈先上升后下降的趨勢(shì)，但轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株的各酶活性顯著高于對(duì)照，AsA和GSH的再生率顯著高于對(duì)照;兩者的氧化還原力（AsA/DHA值和GSH/GSSG值）顯著下降，但轉(zhuǎn)StBADH基因番茄植株下降幅度顯著小于對(duì)照，H2O2含量顯著低于對(duì)照。表明NaCl脅迫下，轉(zhuǎn)StBADH基