急性弓形蟲小鼠感染模型的建立與抗動物弓形蟲病藥物的初步篩選.pdf

1、弓形蟲病是一種重要的機會致病性人獸共患寄生蟲病,能在人和多種哺乳動物之間傳播。動物感染后不但會影響生產性能,還將會成為人類弓形蟲病的傳染源,因此,對該病的防治具有重要的經濟學價值和公共衛(wèi)生學意義。本研究通過建立急性弓形蟲小鼠感染模型后,進行抗弓形蟲藥物的篩選,擬發(fā)現用于動物弓形蟲病防治的藥物,并對有效藥物的抗蟲機制進行初步研究,為臨床上用于治療動物弓形蟲病提供理論依據。
　　 1.弓形蟲復蘇方法及蟲體毒力的摸索及急性弓形蟲小鼠感

2、染模型的建立
　　 通過對弓形蟲株經不同保存時間及復蘇條件后對小鼠致病性的研究,評價蟲體保存方法。使用液氮凍存和體內傳代法,摸索出了得到毒力穩(wěn)定的蟲體最佳保存時間、復蘇代次與接種劑量。在此基礎上,確立了急性弓形蟲小鼠感染模型:使用本實驗室保存半年以內的弓形蟲RH蟲株速殖子,經小鼠體內傳代2次后,腹腔接種超過4000個蟲體／鼠／0.2 mL(KM系、體重20-24 g),將保證所有小鼠在6-10 d內全部死亡。通過模型的建立,為后

3、續(xù)弓形蟲蟲體生物學和藥物篩選研究奠定了基礎。
　　 2.抗弓形蟲病藥物篩選的研究
　　 鑒于目前無專用于動物的抗弓形蟲病藥物,本研究擬通過選用11種己用于抗動物其它原蟲病及其病原微生物的藥物,來進行抗弓形蟲病的研究。發(fā)現原用于抗動物球蟲病的藥物一磺胺氯吡嗪具有很好的抗弓形蟲效果,能明顯減少弓形蟲在小鼠體內的生長、繁殖,可保護50％以上的小鼠免于死亡并長時間存活,并無法檢測到蟲體。
　　 3.磺胺氯吡嗪對弓形蟲速殖

4、子超微結構的影響
　　 弓形蟲速殖子經磺胺氯吡嗪溶液處理后,通過掃描電鏡與透射電鏡觀察蟲體結構的變化。在掃描電鏡下,藥物處理后的蟲體大小不均,細胞膜凹凸不平、皺縮呈現不完整,部分蟲體出現破損、崩解,蟲體反光度不均一等。在透射電鏡下,藥物處理后,部分蟲體發(fā)生崩解,蟲體細胞膜和核膜結構損壞；致密斑顆粒數量明顯減少,細胞質發(fā)生均質樣改變,細胞質中出現許多空泡；細胞核發(fā)生異染色質化,染色質邊緣與核膜分離并出現空泡；頂端類錐體結構模糊,出