豬圓環(huán)病毒2型易感的PK15細胞系的克隆、篩選與鑒定.pdf

1、南京農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文豬圓環(huán)病毒2型易感的PK15細胞系的克隆、篩選與鑒定姓名：陳念劬申請學位級別：碩士專業(yè)：預防獸醫(yī)指導教師：姜平20090601豬圓環(huán)病毒2型易感的PKl5細胞系的克隆、篩選與鑒定為確保該細胞系在疫苗、診斷試劑和治療手段研究等后續(xù)應用，我們分別選擇第20、30和50代對其部分外源微生物進行了檢測。結(jié)果為：①用PCR／RTPCR方法檢測外源病毒豬圓環(huán)病毒1型(PCVl)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬瘟病毒(HCV

2、)和腦心肌炎病毒(EMCV)，結(jié)果均為陰性；②用支原體營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)和支原體營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)檢測支原體，結(jié)果支原體檢驗液體培養(yǎng)均無顏色變化，固體培養(yǎng)未出現(xiàn)支原體菌落；③將細胞懸液取少量分別接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基和硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基中，并將每種培養(yǎng)基分別置于37。C和25。C培養(yǎng)3—5d，進行細菌和真菌的檢測，結(jié)果均未觀察到菌落生長。該結(jié)果表明PKl5B1純凈，不存在細菌、真菌、支原體污染，且無PCVl、BVDV、HCV、EMCV等