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文檔簡介
1、食用菌具有高蛋白,低脂肪的特點,屬于“天然,營養(yǎng),多功能”食品,符合近年來國際上對食品提出的“低鹽,低糖,低脂肪,高蛋白”的新要求,隨著人們對食用菌營養(yǎng)價值及藥用價值的認識,食用菌育種工作也成為科研工作者關(guān)注的熱點。
原生質(zhì)體技術(shù)是食用菌育種工作的重要方法之一,因其具有操作簡單,容易獲得,且對誘變因子較敏感等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于各種食用菌的育種工作中。
本文以刺芹側(cè)耳為出發(fā)菌株,通過原生質(zhì)體技術(shù)結(jié)合紫外線誘變獲
2、得再生變異菌株269株,探索了適合刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體形成與再生的條件,得出適宜條件為“菌齡96h,酶解溫度30℃,酶解時間2h,酶系統(tǒng)為1%纖維素酶+1%蝸牛酶的混合酶,在該條件下,刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體產(chǎn)量達到較高水平,產(chǎn)量為1.75×107個/mL。再生過程中,以0.6mol/L的甘露醇做滲穩(wěn)劑,能使原生質(zhì)體再生率達4.8%,明顯優(yōu)于蔗糖和MgSO4。由原生質(zhì)體紫外誘變可知,刺芹側(cè)耳原生質(zhì)體對紫外線的作用非常敏感,低劑量就能達到較高致死率,
3、致死率在70%~80%時,正變率較高,因此選擇致死率80%,照射時間15s為適宜的紫外誘變時間。
通過對再生變異菌株長勢、長速、拮抗程度等方面的實驗,篩選出長速優(yōu)于出發(fā)菌株的再生變異菌株。
通過對再生菌株發(fā)酵過程中生物量、pH值、還原糖含量、胞外酶活性等指標的檢測,篩選出一株長速快、生物量高、利用還原糖能力好、胞外酶活性高的的優(yōu)良菌株08X-013,酯酶同工酶分析可知菌株08X-013譜帶表達不同于出發(fā)菌株,
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