藥物制劑分析第二軍醫(yī)大學(xué)

1、1,,【注射液的裝量】 【注射用無(wú)菌粉末的裝量差異】 【可見(jiàn)異物】 【無(wú)菌】 【熱原】或【細(xì)菌內(nèi)毒素】 【不溶性微?！?指藥物制成的供注入體內(nèi)的滅菌溶液、乳狀液或混懸液，以及供臨用前配成溶液或混懸液的無(wú)菌粉末或濃溶液。注射劑大都血管內(nèi)直接給藥，部分肌肉注射。安全性要求與檢查必須特別嚴(yán)格。,,注射劑,2,不溶性微粒檢查在可見(jiàn)異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈滴注用注射液（裝量為100ml以上者）中不溶性微粒。除另有規(guī)定外

2、，每1ml中含有10μm以上的微粒不得超過(guò)20粒，含25μm的微粒不得超過(guò)2粒。顯微計(jì)數(shù)法、光阻法,3,熱原（pyrogen）檢查法,熱原活的微生物的代謝產(chǎn)物或是死亡的微生物尸體，是微生物的一種內(nèi)毒素，注射后會(huì)引起體溫異常升高，嚴(yán)重的還會(huì)出現(xiàn)昏迷、虛脫，甚至有生命危險(xiǎn)。熱原檢查法本法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，觀(guān)察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。,4,檢查法 取適用的家

3、兔3只，測(cè)定其正常體溫后15分鐘以?xún)?nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測(cè)量其體溫1次，共測(cè)6次，以6次體溫中最高的一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度(℃)。如3只家兔中有1只體溫升高0.6℃或0.6℃以上，或3只家兔體溫升高均低于0.6℃，但體溫升高的總和達(dá)1.4℃或1.4℃以上，應(yīng)另取5只家兔復(fù)試。結(jié)果判斷,5,1、注射劑中主藥含量大，附加成分不干擾，可直接測(cè)定　　　　　葡萄糖酸

4、鈣的原料藥和注射劑：絡(luò)合滴定法；2、主藥遇熱不穩(wěn)定而易分解，常采用有機(jī)溶劑提取后測(cè)定3、主藥含量較少，采用靈敏度高的方法－－排除附加劑干擾,注射劑含量測(cè)定,6,注射劑的溶劑,包括: 水性溶劑、植物油及其他非水性溶劑等。 最常用的水性溶劑為注射用水，亦可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液。 非水溶劑有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。 常用的油溶劑為注射用大豆油。其質(zhì)量應(yīng)符合大豆油(供注射用)的標(biāo)準(zhǔn)。,7,,附加劑一般有

5、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑等。抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等。常用的抑菌劑及其濃度(g/ml)為苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。抑菌劑用量應(yīng)能抑制注射液內(nèi)微生物的生長(zhǎng)。加有抑菌劑的注射液，仍應(yīng)用適宜的方法滅菌。,附加劑,8,排除附加劑干擾,抗氧劑（亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、維生素C等）NaCl（等滲溶液） 穩(wěn)定劑(乳酸鈣或其他鈣鹽) 溶劑水溶劑油,9,,抗氧劑

6、 具有還原性藥物的注射劑中常加抗氧劑。 對(duì)氧化還原滴定有干擾。,NaHSO3 + CH3COCH3 ? (CH3)2C(OH)-SO3Na碘量法測(cè)定維生素C注射液,Na2S2O5 + H2O→2NaHSO3NaHSO3 + HCHO ? HO-CH2-SO3Na碘量法測(cè)定安乃近注射液。但是，甲醛也具有還原性。氧化電位高時(shí)不宜。,亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉加入丙酮、或甲醛消除。,1、加掩蔽劑,10

7、,【規(guī)格】 (1)1ml∶0.25g (2)2ml∶0.5g【含量測(cè)定】 精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，立即精密量取10ml，置錐形瓶中，加乙醇2ml、水6.5ml與甲醛溶液0.5ml，放置1分鐘，加鹽酸溶液(9→1000)1.0ml，搖勻，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定（控制滴定速度為每分鐘3～5ml），至溶液所顯的淡黃色在30秒鐘內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/

8、L)相當(dāng)于17.57mg的C13H16N3NaO4S·H2O。,安乃近注射液 Metamizole Sodium Injection,11,,,,2、加酸分解消除,亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉 均可被酸分解，加熱逸出SO2,Na2S2O3 + 2HCl → 2NaCl + H2S2O3(加熱),NaHSO3+HCl → NaCl + H2SO3 (加熱),SO2↑ + H2O,,SO2↑ + H2O,,,12,鹽酸普魯

9、卡因胺注射液 Procainamide Hydrochloride Injection,本品為鹽酸普魯卡因胺的滅菌水溶液。 【規(guī)格】(1)1ml∶0.1g (2)2ml∶0.2g (3)5ml∶0.5g (4)10ml∶1g 【含量測(cè)定】　精密量取本品5ml，加水40ml與鹽酸溶液(1→2)10ml，迅速煮沸，立即冷卻至室溫，照永停滴定法(附錄Ⅶ A)，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.1

10、mol/L)相當(dāng)于27.18mg的C13H21N3O·HCl。,13,,3、加弱氧化劑氧化消除,,,,過(guò)氧化氫和硝酸，將抗氧劑(亞硫酸鹽等)氧化，而不氧化被測(cè)藥物，不消耗滴定液。,Na2SO3 + H2O2→ Na2SO4 + H2O,Na2SO3 + 2HNO3 → Na2SO4 + 2NO2 + H2O,14,,鹽酸氯丙嗪注射液本品為鹽酸氯丙嗪的滅菌水溶液。本品可加適量的維生素C ( 0.01mol/L HCl中UV

11、最大吸收243nm)。【含量測(cè)定】避光操作。精密量取本品適量(約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪50mg)，置250ml量瓶中，加鹽酸溶液(9→1000)至刻度，搖勻；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加鹽酸溶液(9→1000)至刻度，搖勻，照分光光度法(附錄Ⅳ A)，在306nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系數(shù)( E )為115計(jì)算，即得。 【規(guī)格】　(1)1ml∶10mg　(2)1ml∶25mg　(3)

12、2ml∶50mg,4、UV吸收譜差消除干擾,243 254 306,氯丙嗪,維生素C,,,,,鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定,,,,16,,,甲萘氫醌二磷酸酯鈉注射液(USP)本品為滅菌水溶液。含苯甲酸、或苯酚抑菌劑，及焦亞硫酸鈉。,5. 萃取分離后 UV測(cè)定,【含量測(cè)定】　　精密移取本品適量，用0.1mol/L鹽酸稀釋配制為每1ml含甲萘氫醌二磷酸酯鈉50?g的溶液，取上述溶液10ml置于6

13、0ml分液漏斗中，用15ml三氯甲烷提取三次，棄去有機(jī)層，取水層離心分離后作為供試液，于290nm處測(cè)定其吸收值A(chǔ)。另取甲萘氫醌二磷酸酯鈉對(duì)照品同法測(cè)定，按計(jì)算含量，即得。,17,溶劑油脂溶性藥物(甾體激素等)常配制成油溶液。溶劑油對(duì)以水為溶劑的分析方法可產(chǎn)生影響：溶液渾濁，影響UV測(cè)定、容量滴定、HPLC測(cè)定。,1、有機(jī)溶劑稀釋法藥物標(biāo)示量高，稀釋倍數(shù)大或測(cè)定溶劑對(duì)油溶解性好，溶劑油對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。,18,,,,維生素E注射液

14、 Vitamin E Injection 本品為維生素E的滅菌油溶液?！竞繙y(cè)定】 精密量取本品2ml，置棕色具塞錐形瓶中，照維生素E項(xiàng)下的方法，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ml，密塞，搖勻，取1～3μl注入氣相色譜儀，并依法測(cè)定校正因子，計(jì)算，即得?！疽?guī)格】　1ml∶50mg,19,,,2、溶劑提取-HPLC法 例：丙酸睪酮注射液 Testosterone Propionate Injection本品為丙酸

15、睪酮的滅菌油溶液。 【含量測(cè)定】HPLC法測(cè)定法 用內(nèi)容量移液管精密量取本品適量(約相當(dāng)于丙酸睪酮50mg)，置50ml 量瓶中，用乙醚分?jǐn)?shù)次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml 置具塞離心管中，在溫水浴內(nèi)使乙醚揮散；用甲醇振搖提取4次(5，5，5，3ml)，每次振搖10分鐘后離心15分鐘，并用滴管將甲醇液移置25ml 量瓶中，合并提取液，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5ml,用甲醇稀釋至刻度，搖勻，取5～10

16、μl 注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。,20,容量分析法：,標(biāo)示量%=,,V ? T ? F,V樣? 標(biāo)示量（g/ml),× 100%,紫外分光光度法：,標(biāo)示量%=,,A/ E ? 稀釋倍數(shù),100 ?標(biāo)示量（g/ml),× 100%,注射劑含量測(cè)定結(jié)果計(jì)算,21,例：馬來(lái)酸氯苯那敏注射液的含量測(cè)定 精密量取本品2.5mL（標(biāo)示量1ml:10mg），置500mL量瓶中，加鹽酸溶液稀釋至刻度；精密吸取25ml，

17、置50ml量瓶中，加鹽酸溶液稀釋至刻度。取稀釋液在264nm處測(cè)得吸收度為0.536，按吸收系數(shù)E1%1cm為217，計(jì)算其百分標(biāo)示量。,22,復(fù)方制劑分析 Assay of compound preparations,復(fù)方制劑的意義增強(qiáng)某些藥物的作用某幾種藥物有協(xié)同作用降低某些成分的毒副作用……復(fù)方制劑分析的特點(diǎn)成分更復(fù)雜含量差異懸殊……,23,復(fù)方制劑的分類(lèi),各國(guó)藥典收載的復(fù)方制劑復(fù)方解熱鎮(zhèn)痛類(lèi)復(fù)方甾體激素類(lèi)復(fù)

18、方維生素類(lèi)復(fù)方磺胺類(lèi)……,24,方法選擇原則,是否有特殊的、不受干擾的性質(zhì)由簡(jiǎn)到繁（不分離→分離測(cè)定、同時(shí)→分別測(cè)定）先準(zhǔn)確后快速新藥：HPLC優(yōu)先原則醫(yī)院制劑：UV優(yōu)先原則,25,復(fù)方磺胺甲噁唑片是由磺胺甲噁唑（SMZ）、甲氧芐啶（TMP）兩種有效成分組成。處方： 磺胺甲噁唑 400g 甲氧芐啶

19、 80g ——————————— 制成 1000片ChP（2000版）: 雙波長(zhǎng)分光光度法ChP（2005、2010版）: 高效液相色譜法,復(fù)方制劑分析示例,26,ChP（2000版）: 雙波長(zhǎng)分光光度法原理：選擇二個(gè)測(cè)定波長(zhǎng)λ1 與λ2 干擾組分a在這兩個(gè)波長(zhǎng)

20、處有等吸收待測(cè)組分b在這兩個(gè)波長(zhǎng)處有顯著的△A△A與b濃度成正比，與a濃度無(wú)關(guān),復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量測(cè)定,27,測(cè)定SMZ時(shí)，把TMP作為干擾成分SMZ λmax = 257 nmTMP A257nm = A304nm 測(cè)定TMP 時(shí)，把SMZ作為干擾成分TMP λ = 239 nm （有較大紫外吸收）SMZ A239nm = A295nm,28,復(fù)方左炔諾孕酮片,本品每片中含左炔諾孕酮(C21H28

21、O2)應(yīng)為0.135～0.1725mg，含炔雌醇(C20H24O2)應(yīng)為27.0～34.5μg。【處方】　　　左炔諾孕酮　　　150mg　　　　　　　　炔雌醇　　 　30mg ───────────────　　　　　　　　　 制　成　　1000片ChP 2005年版—分光光度法ChP 2010年版---HPLC法,29,ChP2005年版---分光光度法【含量測(cè)定】　對(duì)照品溶液的制備　精密

22、稱(chēng)取左炔諾孕酮對(duì)照品15mg，…搖勻(每1ml中含左炔諾孕酮75μg、炔雌醇15μg)。 供試品溶液的制備　取本品5片，置分液漏斗中，加水6ml，振搖使崩解，用氯仿振搖提取5～6次，每次約7～8ml，提取液經(jīng)同一棉花濾入50ml量瓶中,加氯仿稀釋至刻度,搖勻即得。左炔諾孕酮　精密量取供試品溶液10ml，置50ml具塞錐形瓶中，在水浴上蒸干，精密加乙醇5ml使溶解；另精密量取對(duì)照品溶液2ml，置另一具塞錐形瓶中，加乙醇3ml。在上述各