雞呼吸道病的防治

1、雞呼吸道病的防治,曹永長 教授caoych@mail.sysu.edu.cn中山大學生命科學學院有害生物控制與資源利用國家重點實驗室,,,,通風空氣質(zhì)量氨氣化學藥品溫度濕度飼養(yǎng)密度,傳染性囊病馬立克氏病呼腸孤病毒感染傳染性貧血淋巴白血病沙門氏菌病,新城疫傳染性支氣管炎禽流感傳染性鼻炎傳染性喉氣管炎支原體大腸桿菌,導致雞病的綜合因素,傳染性疾病,環(huán)境及管理因素,免疫抑制,疫苗反應,,,傳染性囊病馬

2、立克氏病呼腸孤病毒感染傳染性貧血淋巴白血病沙門氏菌病,,,,霉菌毒素營養(yǎng)不良應激藥物,,,其它,,,,呼吸道病,呼吸道病是一個廣義的概念，而不是單指某一種疾病，它是一種綜合感染的癥狀。新城疫——ND禽流感——AI傳染性支氣管炎——IB傳染性喉氣管炎——ILT粘膜型雞痘——FP傳染性鼻炎—— IC支原體病——MG\MS大腸桿菌病——E.coli霉菌性肺炎不利的環(huán)境因素,呼吸道疾病,經(jīng)常發(fā)生，各種日齡的雞均

3、可感染發(fā)病率高而且容易引起多種疾病的繼發(fā)感染，可使雛雞生長發(fā)育遲緩，成年雞產(chǎn)蛋下降和引起各種日齡的雞只死亡呼吸道疾病發(fā)生后，從臨床癥狀和雞群的表現(xiàn)上都很難確定發(fā)生的是哪一種呼吸道疾病，給診斷帶來一定的困難絕大多數(shù)的商業(yè)雞群不存在單一病原體的“大腸桿菌病”、“支氣管炎”、“支原體病”、“新城疫”，而往往是以多病因呼吸道病的形式存在,環(huán)境因素的影響,空氣中氨氣的含量:在含氨達20ppm的環(huán)境中飼養(yǎng)的雞和火雞6周后可出現(xiàn)肉眼或組織學病變

4、,并且這種條件下飼養(yǎng)的雞對NDV更易感；飼養(yǎng)在含氨達10ppm或40ppm的環(huán)境中的火雞其粘膜纖毛退化、粘液分泌多、纖毛表面粗糙、氣管組織纖毛脫落，氣囊、肝和肺對大腸桿菌的清除率下降；在70或100ppm時，4天后則表現(xiàn)心肌前房壁增厚，肺毛細血管收縮；25或50ppm時，感染IBV后，體重減輕，飼料轉(zhuǎn)化率下降，肺增大，氣囊炎更為明顯,免疫接種反應,所有呼吸道病毒活疫苗均可在禽體內(nèi)增殖,并引起一定程度的細胞損傷,這種由疫苗毒增殖引起的臨診

5、癥狀及病理變化稱為免疫接種反應接種呼吸道病毒活疫苗可誘導免疫應答,但同時也可引起十分輕微的發(fā)病或輕微的免疫接種反應,IBV或NDV正常接種反應于接種后3～5天，出現(xiàn)臨診癥狀,且持續(xù)3～5天,接種的目的,隨著集約化養(yǎng)殖場的增加，疾病發(fā)生的幾率也相應增加生物安全措施和免疫接種可控制疫病發(fā)生的風險免疫接種目的是激發(fā)雞體建立自然的、可抵御疾病感染的能力為激發(fā)免疫反應，誘導免疫力產(chǎn)生，必須使雞接觸抗原免疫接種后10~14天方可建立良好的

6、免疫保護免疫接種不能替代有效的管理,母抗可針對野毒提供保護，也可針對疫苗“保護”，可能干擾疫苗主動免疫。所以，適時免疫非常重要。既要考慮母抗水平，又要考慮母抗衰減速度群內(nèi)抗體均勻度野毒致病力及感染壓力疫苗免疫方法及途徑疫苗類型,疫苗免疫考慮因素,一、SPF蛋問題，活疫苗外源性病原污染問題二、注意疫苗代次、效價、抗原濃縮馬立克氏病CVI-988的代次；活疫苗效價、滅活（苗）前效價；多聯(lián)滅活苗抗原濃縮。三、不用非法疫苗

7、安全性、有效性、冷鏈保存等。四、血清型（亞型）活疫苗不主動引入新毒株，新血清型、亞型，毒力。五、性狀、有效期滅活疫苗不破乳、活疫苗凍干形狀，是否失真空。,選擇疫苗時注意事項,接種原則,接種健康動物（個別情況緊急接種）應激時期不得進行免疫接種不得使用過期疫苗于感染前進行免疫給予足劑量免疫，同時免疫經(jīng)恰當?shù)耐緩浇臃N無特定說明外，必須進行加強免疫接種可減少發(fā)病癥狀，但不能根除疾病活疫苗應在稀釋后2小時內(nèi)用完(MD還得

8、快）,免疫失敗的基本原因,1、高母原抗體可能中和了疫苗 免疫時機選擇不當，沒作母原抗體檢測 2、免疫應答能力受到影響 環(huán)境和管理，營養(yǎng)，藥物，寄生蟲 3、免疫抑制低致病性禽流感，馬立克，法氏囊病，傳貧，呼腸孤病毒感染，白血病，網(wǎng)狀組織內(nèi)皮增生癥等，霉菌毒素,免疫失敗的基本原因,4、人為因素程序不合理，接種途徑不對，疫苗保存不當，失效，免疫密度不高，應激5、疫苗問題抗原含量不夠，血清型不對，疫苗污染,問題出在哪？

9、,保存疫苗和使用設(shè)備不合理運輸不當疫苗超期使用不合理的接種途徑----較差的全群接種技術(shù)疫苗稀釋后3小時內(nèi)仍未用完接種劑量不足接種部位不當清潔設(shè)備較差,認真讀標簽說明！,疫苗保存（讀說明書）,錯誤的運輸或保存會影響疫苗效力，降低其對雞的保護所有的疫苗均應按其標簽說明進行保存應常查閱標簽信息，以防變化接收和使用疫苗時應認真記錄家禽活苗通常應凍存或冷藏滅活苗常應冷藏（2-8℃），但不能凍存冰箱內(nèi)應存放溫度計或日志記

10、錄運輸疫苗時應使用含有冰袋的保藏箱,免疫中存在的常見問題,1、疫苗毒力強，雞只應激太大2、疫苗毒力弱，保護力不足，免完后還發(fā)病3、免疫雞群與易感雞群混合,免疫抑制性病原的普遍存在,CAV、ALV、REV和呼腸孤病毒 (REOV) 都是可以經(jīng)胚傳至下一世代的種雞群的凈化特別是父母代的凈化做得不好家禽使用的活疫苗尚有相當比例是非SPF雞胚來源的,免疫抑制病原體的作用,家禽的免疫抑制性病原體有很多種，除大家熟知的馬立克氏病毒(MDV

11、)、傳染性法氏囊病病毒(IBDV)、雞傳染性貧血病毒(CAV)外，禽白血病病毒(ALV)、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)和呼腸孤病毒也產(chǎn)生很強的免疫抑制作用，而呼吸道病原體NDV、AIV 等本身也是免疫抑制性的上述病原體造成免疫抑制的機理是感染、破壞乃至殺死淋巴細胞或其前體(IBDV、CAV、MDV、AIV)；感染和破壞巨噬細胞(ILTV、AIV、REOV、ALV)；造成腫瘤轉(zhuǎn)化細胞分泌前列腺素等免疫抑制物（MDV、ALV）當發(fā)生

12、呼吸道疾病的雞群同時又存在某些免疫抑制性病原體時，則呼吸道疾病往往非常嚴重，且無法控制,重視馬立克氏病的免疫抑制作用,肉雞群的呼吸道病非常嚴重，MDV強毒感染造成的免疫抑制至少是主要原因之一發(fā)生MD免疫失敗的種雞群和蛋雞群，呼吸道疾病大都非常嚴重，有時造成大部分死亡，剖檢死亡雞發(fā)現(xiàn)全部有呼吸道疾病變化(大腸桿菌、支原體、新城疫病毒造成的復合型)除生長期較長的“三黃”雞外，肉雞是不接種MD疫苗的，但強毒感染造成生產(chǎn)性能下降和免疫抑制帶

13、來的損失是巨大的,IBD疫苗的免疫抑制作用,中等偏強毒力的IBD疫苗是能引起嚴重免疫抑制，目前在國內(nèi)占有相當大的市場份額，這種疫苗能突破IBD母源抗體干擾，對IBD的免疫效力高，但對ND疫苗免疫的抗體應答有嚴重影響不少呼吸道疾病問題嚴重的雞場，都是長期使用這種中等偏強IBD疫苗的，有的場經(jīng)變更IBD疫苗后，呼吸道疾病有明顯好轉(zhuǎn),傳染性法氏囊病病毒(IBDV),IBDV particle (Swiss Institute of Bio

14、informatics, 2009),IBDV genomic organization,雙RNA病毒科（Birnaviridae） 禽雙RNA病毒屬(Avibirnavirus),臨床癥狀與病理變化,1.突然發(fā)病，行動搖擺，毛松怕冷，頭頸震顫，伏地昏睡，拉黃白色水樣稀糞，很快虛脫死亡．死亡率3～30%。,2.法氏囊腫大、質(zhì)變硬、表面水腫，呈淡黃色透明凍膠狀，囊腔內(nèi)有灰黃色粘性滲出物或豆渣樣物，囊皺壁粗糙變黃，有時可見充血出血。

15、體積和重量可增達正常值的2～3倍。,臨床癥狀與病理變化,3.雞胸、腿肌肉出血，腺胃和肌胃交界處有條狀出血點,臨床癥狀與病理變化,臨床癥狀與病理變化,4.腎臟蒼白腫大，呈花斑狀。腎小管和輸尿管擴張，內(nèi)有尿酸鹽沉積，心包和肝臟表面也常有尿酸鹽沉積5.脾臟輕度腫脹，表面有彌散性的灰色點狀壞死灶,1、死亡率增加，由10%以下增加至10%～ 50%。發(fā)病日齡拓寬，小齡化2、新雞場發(fā)病多，死亡率較高3、病例不典型而且混合感染或者法氏囊病綜合癥

16、增多4、免疫抑制現(xiàn)象普遍存在5、出現(xiàn)不免疫不發(fā)病，一免疫就發(fā)病，主要是在免疫后3～7 d,黃羽肉雞IBD流行現(xiàn)狀,IBD流行病學調(diào)查,IBD流行病學調(diào)查,IBDV分離毒株的基本信息（1）,IBDV分離毒株的基本信息（2）,IBDV毒株系統(tǒng)進化分析,SPF雞感染IBDV分離株的死亡率,免疫接種,免疫接種是控制雞傳染性法氏囊病的主要方法，特別是種雞群的免疫，將其母源抗體傳給子代使雛雞免受法氏囊病病毒的早期感染。制訂免疫程序時，應根據(jù)當

17、地本病的疫情狀況、飼養(yǎng)管理條件、疫苗毒株的特點、雞群母源抗體水平等來決定，以便選擇適當?shù)拿庖邥r間，有效地發(fā)揮疫苗的保護作用,何時接種 ？,預防發(fā)病、死亡和免疫抑制,,Hatch 1 2 Weeks of age 4 5 6,母源抗體保護,,,34,VAXXITEK,雞傳染性法氏囊病病毒火雞皰疹病毒載體活疫苗

18、,動物實驗方案,IBDV分離株，編號GD1003,IBD抗體變化(anti-VP2),從抗體變化曲線可以看到，21d時威立克免疫組抗體要明顯高于法倍靈免疫組，14d-28d這個時間段，威立克免疫組抗體水平平穩(wěn)且維持較高的抗體滴度。法倍靈免疫組則在21d是降到最低，因為此時母源抗體衰減到最低，而法倍靈疫苗免疫還沒有產(chǎn)生足夠高的抗體。,疫苗對肉雞免疫器官發(fā)育的影響,2512免疫后引起法氏囊的腫大，vaxxitek和對照組無顯著差異。從上圖可

19、看出，脾臟指數(shù)無顯著差異。臨床解剖發(fā)現(xiàn)2512免疫組有4只雞法氏囊輕微出血,法倍靈免疫96小時后，vaxxitek，法倍靈免疫組及對照組各取10只雞解剖，測法氏囊和脾臟指數(shù),21天齡攻毒保護效果,攻毒劑量：200LD50,21天齡攻毒后法氏囊和脾臟的變化,28天齡攻毒保護效果,攻毒劑量：200LD50,28天齡攻毒后法氏囊和脾臟的變化,35天齡攻毒保護效果,攻毒劑量：200LD50,35天齡攻毒后法氏囊和脾臟的變化,VAXXITEK免疫

20、對IBD強毒攻擊保護效果（第二次試驗）,攻毒劑量：1000LD50,結(jié) 論,vaxxitek疫苗免疫組在21天齡和28天齡攻毒的綜合保護效果優(yōu)于2512免疫組，但在35天齡攻毒時，兩組攻毒保護率差異不明顯，但法氏囊指數(shù)，Vaxxitek要好于2512免疫。,中國禽流感現(xiàn)狀,野禽和家禽的糞便是禽流感的主要傳播來源病雞的每克糞便可以感染10萬只以上的家禽近幾年分離的H9N2禽流感病毒占93.6%，需引起重視水禽攜帶病毒

21、，并出現(xiàn)嚴重發(fā)病H5N1感染，25%~30%的雞出現(xiàn)角膜混濁。肉髯腫脹（免疫的雞群），脾臟腫大，出現(xiàn)斑點狀壞死。胰腺壞死大感染雞的80%以上。病雞心肌炎是死亡的主要原因,溫和型禽流感癥狀,MPAIV引起野鳥的大部分感染一般不出現(xiàn)臨床癥狀。在家禽中臨床癥狀表現(xiàn)為呼吸道、消化道、泌尿生殖器官的病變。呼吸道感染最常見的癥狀有咳嗽、打噴嚏、呼吸啰音和流淚。產(chǎn)蛋雞表現(xiàn)為喜歡伏窩但產(chǎn)蛋量下降。另外，無明顯特征的臨床癥狀包括扎堆、羽毛蓬亂、精神沉郁

22、、少動、食欲和飲水量下降，以及間歇性腹瀉等。有時也有消瘦現(xiàn)象，但不常見，因為ＡＩ是一種急性疾病高發(fā)病率和低死亡率是其典型的特征，死亡率一般不到50％,MPAIV的病變,家禽典型的病變主要發(fā)生在呼吸道尤其是鼻竇，典型特征是出現(xiàn)卡他性、纖維蛋白性、漿液纖維素性、粘液性或纖維素性膿性的炎癥。氣管黏膜充血水腫，偶爾出血。氣管滲出物從漿液性變?yōu)楦衫覙?，偶爾發(fā)生通氣閉塞導致窒息?？粝赂]腫脹，鼻腔流出粘液性到粘液膿性的分泌物。在體腔（腹腔）會出現(xiàn)

23、卡他性到纖維蛋白性炎癥和卵黃性腹膜炎?？ㄋ缘嚼w維蛋白性腹膜炎也可發(fā)生在盲腸和／或腸道，尤其是火雞。輸卵管內(nèi)炎性分泌物，蛋殼上的鈣沉積減少。這樣的蛋形狀怪異并且易碎，色素沉著少。卵巢衰退，大濾泡出血，進而溶解。輸卵管水腫，由卡他性、纖維蛋白性分泌物。少數(shù)產(chǎn)蛋雞會出現(xiàn)腎臟腫脹及內(nèi)臟尿酸鹽沉積。,禽流感疫苗的免疫次數(shù),以24為免疫保護：一次免疫最長保護期為7周30日齡和120日齡兩次免疫，保護期為4個月30、60、120日齡三次免疫，

24、保護期為4個月20天90%使用的是H5型禽流感疫苗，而現(xiàn)場發(fā)生的禽流感約有50%為H9型，應引起我們的重視,禽流感免疫保護,禽流感抗體水平與保護率,杜元釗《中國家禽》2006年11期P12,免疫雞群發(fā)生ND的原因,ND毒株的毒力在不斷增強環(huán)境當中大量強毒的存在，導致早期感染免疫次數(shù)過于頻繁，免疫劑量過大導致免疫麻痹免疫程序不合理，免疫時機紊亂，免疫途徑不當，免疫操作失誤等免疫雞群中始終存在強毒感染，并且不斷排毒，在個體間相互傳

25、播，反復感染應激因素的存在，如溫度、通風、換料、噪聲等；病毒在免疫壓力和自然因素的作用下F蛋白產(chǎn)生變異，基因型發(fā)生了改變免疫抑制病的早期感染， MD、 RE、REO、ALL、CAA、IBD,揚州大學劉秀梵院士等對近百個雞場的調(diào)查結(jié)果表明，免疫雞群中強毒的感染，群感染率為63%，平均個體感染率為12%；有非典型性新城疫臨床癥狀的雞群，個體感染率為30%以上疫苗為主的控制策略所帶來的特有問題，忽視了嚴格的消毒、隔離和其它衛(wèi)生措施。疫

26、苗免疫只能減少強毒入侵雞群時帶來的損失，而不能阻止強毒侵入雞群，更不能消滅雞群中已經(jīng)存在的強毒,雞新城疫的應對措施,1、嚴格的隔離措施——防止強毒侵入雞場2、全進全出的飼養(yǎng)制度3、優(yōu)質(zhì)的疫苗、正確的使用4、早期免疫——孵化室免疫主動免疫的保護比母源抗體堅強的多！5、合理的疫苗免疫程序—重視局部免疫6、產(chǎn)蛋期的定期免疫不容忽視(每6-8周補強一次)7、緊急免疫接種——注射/飲水8、免疫監(jiān)測,高母抗雛雞不同日齡攻毒結(jié)果,首免

27、日齡與疫苗選擇,提倡早期免疫,母源抗體不會全部中和掉疫苗抗原主動免疫具有受體站位效應、局部免疫效應和細胞介導免疫作用免疫記憶效應會使再次免疫產(chǎn)生抗體更快、效價更高、更持久主動免疫比母源抗體具有更堅強的抵抗力發(fā)病時緊急免疫,傳染性支氣管炎,傳染性支氣管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽傳染性支氣管炎病毒(Infectious bronchitis virus, IBV)引起的雞的一種急性、高度接觸傳染性疾

28、病。可在呼吸道、生殖道（輸卵管）、腎臟、腸道、腺胃等組織器官的上皮細胞中復制增殖并引起相應病變。,流行廣泛 對養(yǎng)禽業(yè)危害嚴重,變異株數(shù)量龐大 血清型眾多,交叉反應弱,IB現(xiàn)狀,,病原:傳染性支氣管炎病毒,雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）屬冠狀病毒科冠狀病毒屬，為單股正鏈ＲＮＡ病毒。有囊膜，囊膜表面有花冠狀的纖突。纖突蛋白Ｓ１片段與誘導產(chǎn)生病毒中和抗體和血凝抑制抗體有關(guān)，Ｓ２片段與病毒吸附細胞有關(guān)。雞傳染性支氣管炎病毒本身沒有

29、血凝特性，但是經(jīng)胰酶、卵磷脂酶Ｃ、家兔Ａ型魏氏梭菌等處理后具有血凝活性。傳染性支氣管炎病毒能干擾新城疫病毒的增殖。雞氣管上皮細胞對該病毒易感性很高。,傳染性支氣管炎病毒（IBV）,IBV genomic organization,IBV particle,,,致病型與血清型,基因型,美國：Mass、Conn、Ark歐洲：Mass 、4/91 、Italy02、QXIBV 澳大利亞：亞群1和亞群2 日本：Mass、Gray、 4

30、/91、 JPⅠ、JPⅡ(Taiwan)、JPⅢ(China)中國： Mass、 4/91 、QXIBV,血清型,致病型,基因型,根據(jù)不同毒株致病時對組織的親合力不同而將IBV劃分為：呼吸型、腎型、肌肉型、腸型、腺胃型等。,,,,,腺胃型（QX）,1995年后始有報導出現(xiàn)多發(fā)于20～110日齡雞只，病程為10～25天。病雞消瘦，有的有呼吸道癥狀，拉稀，陸續(xù)死亡腺胃腫大，呈球狀，腺胃壁增厚，腺胃乳頭潰瘍,腺胃腫大,兩胃交界處擴張,乳

31、頭界限不清,IBV對呼吸道、腎臟、生殖道的影響是共同的，只是以明顯受害嚴重的臟器而劃分成不同類型。IBV對不同組織所造 成的損傷與當時發(fā) 病雞群生存狀態(tài)有 關(guān)。臨床上單純從 嗜組織性劃分類型， 甚至以此選擇疫苗 是比較困難的。,傳支病毒的變異會持續(xù)進行,1、IBV的高傳染性2、國際家禽貿(mào)易的復雜性3、巨大的易感雞群體4、傳支病毒的持續(xù)傳播5、放養(yǎng)，與野禽接觸機會增加,IBV疫苗使用和在雞群中的保護效果,現(xiàn)

32、在IBV疫苗的使用 疫苗株: H120、類4/91、類QX (LDT3) 免疫程序:通常兩個血清型疫苗交叉免疫IBV疫苗在雞群中的使用效果 沒有大范圍爆發(fā) Mass + x (4/91,或者LDT3)能防控很多毒株 但長期、零星發(fā)病----有出現(xiàn)新強毒株的危險,IBV的流行病學分析,1、 IBV發(fā)病時間統(tǒng)計,2010 ~20

33、12 期間，本實驗室共分離鑒定了700多株IBV。根據(jù)分離時間對這些分離株進行統(tǒng)計，結(jié)果顯示我國IB主要在冬春季節(jié)（11~4月）發(fā)生，占總數(shù) 的將近70%,2、 IBV發(fā)病天齡統(tǒng)計,,11~40天齡為IB高發(fā)天齡，比例高達66%。10天齡之前和70天齡以后發(fā)病率則明顯降低,3、2010-2013各年度IBV分型統(tǒng)計情況,第1分支病毒是我國近年IBV主要流行類型；第6分支病毒始終很少分到；第3、4分支病毒呈逐年減少趨勢；第2、5分支病毒變

34、化不大，大概分別占總的分離株的15%左右,2010-2013總的IBV分型統(tǒng)計情況,a,近年來主要流行的仍然是類QX IBV，且有不斷擴大的趨勢,小 結(jié),中國大陸IBV仍在不斷變異，至少存在6個基因型，類QX基因型是我國目前主要流行的基因型，在很多省市都分離到，且所有分離株與國內(nèi)所用疫苗毒親緣關(guān)系較遠。,8株IBV致病力的測定,ZJ-YWZ2010排毒規(guī)律,ZJ-YWZ2010組攻毒后第5天可以在氣管、肝脾、肺和腎中檢測到病毒，到攻

35、毒后20天就不能檢測到病毒.,JX/WTF09排毒規(guī)律,JX/WTF09第3天就能在腎檢測到病毒，到攻毒后20天就不能檢測到病毒。,IB的控制,不同免疫程序?qū)BV流行株的攻毒保護效果,血清檢測結(jié)果,病理評分,“-”表示未見，“+”表示輕微，“++”表示中度，“+++”表示明顯，“++++”表示嚴重,,,病毒分離結(jié)果,IBV不同基因型毒株交叉保護試驗,臨床癥狀,,,,,血清抗體檢測結(jié)果,,,熒光定量PCR測定病料中IBV 含量,,,,,

36、IB免疫——建議,IBV變異株普遍存在，目前的優(yōu)勢毒株是類QX，因此，使用新的疫苗是必要的一個好的IB疫苗，對同一時期不同地區(qū)的流行株也是有效的兩個不同基因型的IBV活疫苗聯(lián)合免疫，能使其免疫譜大大增加，對多種血清型的IBV流行株能提供保護,其他措施,1、腎型IB可用腎腫靈或100克NaCl 、200克檸檬酸鉀加水90升飲服；0.15—0.2%碳酸氫鈉飲水1 —2天。2、腎型IB，降低飼料中蛋白水平，補充多維、葡萄糖及電解質(zhì)。3

37、、小雞適當提高室溫，保持墊料干燥。,結(jié)語,IB是不可能根除的。變異株普遍存在，新的毒株類型層出不窮，和IBV的斗爭是長期的長期監(jiān)測，及時發(fā)現(xiàn)新的變異株，是控制IB的前提條件優(yōu)質(zhì)的IB疫苗，合理的免疫程序，是控制IB的技術(shù)關(guān)鍵兩個不同基因型的IBV活疫苗聯(lián)合免疫，能應對多種類型IBV流行株,新城疫：VG/GA株,1987年，美國佐治亞大學P.Villegas 和Glisson博士從火雞糞便分離出副粘病毒血清Ⅰ型毒—新城疫病毒。用該病

38、毒接種SPF雞，不出現(xiàn)呼吸道反應且可產(chǎn)生抗體，并對新城疫強毒的攻毒表現(xiàn)出非常的保護性。為紀念該病毒的發(fā)現(xiàn)者，定名為VG/GA株（VG代表兩位發(fā)現(xiàn)者姓名的開頭字母，GA代表佐治亞州）。此后梅里亞集團完成了利用該毒株研發(fā)制成商品疫苗的工作，疫苗取名為AVINEW（新威靈）,VG/GA株既能在呼吸道繁殖，也能在腸道繁殖，對VVND的預防來說, 腸道的局部免疫力要比呼吸道的局部免疫力更重要, 因為腸道是VVND的主要侵入門戶自1991年新威靈

39、問世以來，新威靈所含有的獨特病毒株VG/GA已為新城疫的控制帶來了一次革命。無論是在實驗室還是田間，所有結(jié)果都充分證明新威靈不但具有絕佳的免疫原性，表現(xiàn)出優(yōu)于或至少與Lasota相當?shù)谋Ｗo力，而且免疫后幾乎沒有呼吸道不良反應，明顯降低了由于使用傳統(tǒng)新城疫疫苗而引發(fā)的呼吸道癥候群,VG/GA＋H120,威支靈是由新城疫VG/GA毒株和傳支的H120毒株制備而成的二聯(lián)活疫苗，包括傳統(tǒng)的凍干威支靈疫苗和在中國首家推出的液氮威支靈疫苗。威支靈秉

40、承了VG/GA毒株和H120毒株固有的高免疫原性和低呼吸道副反應的優(yōu)點，并有效克服了傳統(tǒng)新城疫活疫苗與傳支活疫苗的互相干擾,VG/GA＋H120,新城疫、傳支的最佳組合一日齡噴霧免疫,傳染性喉氣管炎——越來越嚴重的威脅,曹永長教授caoych@mail.sysu.edu.cn中山大學生命科學學院有害生物控制與資源利用國家重點實驗室,1925年，一篇名為“Tracheolaryngotracheitis in poultr

41、y”的科學文獻發(fā)表在J Am Vet Med Assoc（Journal of the American Veterinary Medical Association）上 由May和Tittsler共同發(fā)表的此文首次提到了喉氣管炎這種病，當時對此病沒有統(tǒng)一的命名。曾被命名為喉氣管炎、傳染性支氣管炎、支氣管肺炎等 1931年，美國獸醫(yī)協(xié)會禽病專業(yè)委員會采用了傳染性喉氣管炎這一名稱,歷

42、 史,歷 史,1934年Brandly和Busnell基于禽泄殖腔強毒的應用設(shè)計出一種針對雞的免疫方法。喉氣管炎也是第一個研制出疫苗的禽類主要病毒性疾病 1937年 Beaudette 在“Infectious Laryngotracheitis”一文中首次證實ILT是一個濾過性的病毒,屬于皰疹病毒科的α皰疹病毒亞科傳染性喉氣管炎病毒屬病毒粒子呈球形，為二十面體立體對稱，核衣殼由162個殼粒組成，在細胞內(nèi)呈散在或結(jié)晶狀排列

43、只有一個血清型，但有強毒株和弱毒株之分,傳染性喉氣管炎病毒,ILTV基因結(jié)構(gòu),ILTV 基因組是典型的 α-皰疹病毒基因組，大小為 150 kb，由一個長獨特區(qū)(UL)和一個短獨特區(qū)(Us)組成，在短獨特區(qū)兩端排列著一個內(nèi)部反向重復序列（IR）和末端重復序列（TR），長獨特區(qū)和短獨特區(qū)的大小分別為 108 kb 和 12 kb, 內(nèi)部反向重復序列和末端重復序列的大小都為 15 kb,癥 狀,傳染性喉氣管炎（Infectious

44、Laryngotracheitis)是雞的一種病毒性呼吸道傳染病，該病能引起雞的死亡或產(chǎn)蛋量下降，給生產(chǎn)帶來嚴重的損失,根據(jù)臨床癥狀此病又可分為急性型和溫和型兩種,急 性 型,主要在成年雞發(fā)生，傳播迅速，短期內(nèi)全群感染 病雞精神沉郁、厭食、呼吸困難，每次呼吸時突然向上 向前伸頭張口并伴有鳴音和喘氣,喘氣和咳嗽嚴重，咳嗽多呈痙攣性，并咳出帶血的粘液或血凝塊。病重者頭頸卷縮，嘴喙下垂，眼全閉,檢查喉部，可見粘膜上附有黃色或帶血的濃稠

45、粘液或豆渣樣物質(zhì),（氣管內(nèi)帶血濃稠粘液）,（氣管內(nèi)豆渣樣物質(zhì)）,溫 和 型,溫和型的感染癥狀較輕。病初眼角積聚泡沫性分泌物，流淚，出現(xiàn)眼結(jié)膜炎；病的后期角膜混濁、潰瘍，鼻腔有持續(xù)性的漿液性分泌物，眶下竇腫脹,GD2011，分離于華南地區(qū)某養(yǎng)殖場非免疫雞群，該病毒導致100%的發(fā)病率，死亡率在30%左右,攻毒方案,ITPI值觀察記錄,臨床癥狀記錄按照參考文獻(Guy et al., 1990)進行。每只雞攻毒5天后記錄臨床癥狀并計分

46、0 = 正常,1= 溫和 (噴嚏, 咳嗽)2 = 中等 (呼吸困難, 張口呼吸)3 = 嚴重 (死亡) ITPI指數(shù)等于臨床分數(shù)總和除以攻毒雞只總數(shù),樣品收集方案,A組攻毒后5天宰殺，采集14個器官組織，包括喉頭、氣管、肺、脾臟、胰臟、心臟、胸腺、腺胃、食道、法氏囊、腎臟、盲腸、肝臟和大腦。B組分別在攻毒后3、4、5、6、7 和 8天宰殺3只雞，同樣采集14個器官組織。C組都在攻毒后5天全部宰殺，同樣采集14個器官組織

47、。,臨床癥狀及病變,ILTV組織嗜性,ILTV組織嗜性,ILTV組織嗜性,ILTV動態(tài)分布,A. 100倍胰臟組織顯示細胞溶解和局灶性壞死；B.100倍氣管組織顯示粘膜上皮細胞壞死、脫落、大量炎性細胞侵潤；C.40倍食道組織顯示腺體腫脹、壞死；D. 100倍肺組織顯示氣管內(nèi)壞死、腫脹及炎性細胞侵潤；E.100倍腎組織顯示彌散性充血，腎小管變性、壞死；F.100倍喉頭組織顯示粘膜壞死，纖維素性滲出；G.100倍盲腸組織顯示淋巴

48、組織增生、壞死；H.100倍胸腺組織無可見病變,嗜性器官組織切片結(jié)果,流行特點,1.一年四季均會發(fā)生，但以秋冬干燥寒冷季節(jié)較為嚴重2.大小雞均會感染發(fā)病，但多發(fā)生于中成雞3.主要通過空氣傳播，病雞、康復雞或接種過疫苗的雞成為帶毒者而長時間排毒，均可成為傳染源4.雞舍擁擠、通風不良、飼料中缺乏維生素Ａ等，都會促進本病的發(fā)生,2007-2010年9個省和地區(qū)ILT發(fā)病統(tǒng)計結(jié)果,發(fā)病嚴重的地區(qū)有廣、廣西、云貴等地。江蘇、浙江、兩湖發(fā)病情

49、況相對廣東等地較輕。安徽、京津、福建等地有零星發(fā)病。發(fā)病時間多集中在1-3月份和9-12月份。西南地區(qū)未見ILT病例,2013年1月-2014年2月針對十三個省和地區(qū)做了疾病統(tǒng)計調(diào)查從圖中可看出2013年1月、2月、11月、12月，2014年1月、2月的病例相比其他月份明顯增多,發(fā)病群數(shù),2013年1月-2014年2月ILT發(fā)病情況,發(fā)病率統(tǒng)計,主要集中于40-59日、60-79日次之,發(fā)病日齡統(tǒng)計,序列比對結(jié)果,分離株gM序列與已

50、發(fā)表序列同源性為99.7~100%分離株gB序列與已發(fā)表序列同源性為99.9~100%分離株TK序列與已發(fā)表基因序列同源性為100%分離株gD序列與已發(fā)表基因序列同源性為100%分離株ILTV的ICP4p (688bp)的序列與已發(fā)表序列同源性為96.9~100%。ICP4基因(635bp)的與已發(fā)表序列同源性為96.7~100%,2013分子流行病學調(diào)查,2013年分離到6株毒株，分別對每個毒株的gM、gB、TK、gD

51、、ICP4635、ICP4688通過PCR擴增獲得相應基因片段，將其克隆到PMD18-T載體，對相關(guān)基因測序，然后與已發(fā)表的ILTV相關(guān)基因進行比對，獲得ILTV分子流行病學信息,序列相似性與進化樹分析,6個分離株gM的序列與已知序列同源性在99.8%~100%之間6個分離株gB的序列與已知序列同源性在99.6%~100%之間6個分離株TK的序列與已知序列同源性在99.3%~100%之間6個分離株gD的序列與已知序列同源性在

52、99.2%~100%之間6個分離株ICP的序列與已知序列同源性在99.1%~100%之間,結(jié) 論,ILTV高度保守，不同時間、不同地域的分離株其主要基因的序列相似性在99%~100%之間,診 斷,病毒主要存在于病雞的氣管及其滲出物中，從死后不久患病雞的氣管分泌物和肺部采集病料，采用包涵體檢查的方法可以做出初步診斷,病毒的分離與鑒定,同時可以將病料接種雞胚肝、雞胚腎組織培養(yǎng)細胞，或者接種CAM進行分離。分離病毒后，可用電鏡觀察進

53、行病原的初步鑒定,病料接種CAM分離病毒，痘斑的形成,血清學診斷,病毒中和試驗瓊脂擴散實驗熒光抗體試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗,分子生物學技術(shù),DNA 酶切圖譜分析技術(shù)、PCR 技術(shù)和分子雜交技術(shù)使ILTV 的診斷更加準確、方便和快捷。常用 PCR 對 ILTV 特異性核酸進行檢測，從而達到檢測 ILTV 的目的!PCR 技術(shù)檢測 ILTV 病毒比較簡潔準確，是目前應用最為廣泛的方法，且在技術(shù)上不斷改進和提高,PCR鑒定核酸電泳,預 防

54、和 控 制,管理措施 由于野毒感染或者疫苗接種可引起雞的潛伏感染，因此避免將免疫雞或康復雞同易感雞群混養(yǎng)極為重要 采用嚴格的定點檢疫和衛(wèi)生措施，防止有潛在污染的工作人員、飼料、設(shè)備和雞的流動是成功預防LT的關(guān)鍵,環(huán)境消毒,消毒劑或高溫條件能很快殺滅雞體外ILTV，因此在空舍期間進行徹底的清洗能夠有效預防ILT 將所有可能污染的尸體、羽毛、飼料、飲水和垃圾桶存放于同一雞舍內(nèi)，而后將雞舍加熱至38&

55、#176;C 100h進行殺毒，徹底清洗建筑物和設(shè)備 采用消毒劑如酚鹽、次氯酸鈉、碘伏或季銨鹽復合物進行噴霧消毒,預 防,疫苗接種是預防本病的有效方法，即使發(fā)病早期的雞群也可進行緊急接種未發(fā)生過本病的雞場不主張接種疫苗，因疫苗的弱毒進入雞體后，毒力逐漸增強，傳播一段時間后具有一定的致病性，對未接疫苗的雞群造成威脅,,疫苗預防,強/弱毒株疫苗,缺點：1.引起臨床癥狀2.在雞體內(nèi)形成潛伏感染3. 疫苗的使用會干擾疫

56、情的監(jiān)測和診斷,,基因工程疫苗,,基因工程缺失疫苗,基因工程亞單位疫苗,重組活載體疫苗,核酸疫苗,主要針對TK基因的缺失,選取糖蛋白 gB基因來制作,ILTV gB基因與病毒載體重組,將抗原基因通過載體導入宿主細胞,治 療,目前對ILT尚無特效藥物治療，常用對癥綜合療法，以緩解癥狀，減少并發(fā)癥的發(fā)生!如投服清熱解毒的中成藥以減少死亡，為防止繼發(fā)感染在飲水中添加強力霉素或阿莫西林等抗生素，增加機體抵抗力用復合多維，加倍量飲水以及適當增加

57、飼料中的蛋白質(zhì)含量等,呼吸道病的防制對策,劉秀梵《中國禽業(yè)導刊》2001年5期P8~9,⑴ 對該雞場呼吸道疾病可能參與的病原體進行摸底了解，在分析的基礎(chǔ)上，確定主要的致病因素。在呼吸道病原體方面，例如了解支原體的感染率，大腸桿菌的污染情況，ND強毒感染情況，是否有低致病性禽流感，ND和IB活毒疫苗使用情況等等；在免疫抑制病原體方面，了解IBD發(fā)生情況，使用IBD疫苗的種類和使用日齡、MD強毒感染率、雞的來源和活疫苗的來源等；在不利環(huán)境因

58、素方面，了解氨濃度、含塵量、溫度、通風和飼養(yǎng)密度等基本情況,⑵在確定了呼吸道疾病的主要致病因素后，必須針對它們采取有力措施，而對其它參與致病的因素在條件許可的情況下采取改善措施。H9亞型禽流感病毒是致病的主要因素，這時針對AI的免疫是最關(guān)鍵的措施；又如雞群的支原體感染率高，大腸桿菌污染嚴重，又存在IBD疫苗引起的免疫抑制，這時針對這些采取改進措施就是很必要的了；如果肉雞群MD強毒感染率很高，而呼吸道病又很嚴重，則MD引起的免疫抑就可能是

59、呼吸道疾病嚴重的主要原因，在針對呼吸道病原體采取對應措施的同時，一定要通過生物安全或疫苗免疫降低MD強毒感染率,⑶從長遠的觀點看，特別是對大中型養(yǎng)禽企業(yè)，控制呼吸道疾病必須抓種雞群支原體的凈化，降低商品代支原體的感染率，抓環(huán)境的大腸桿菌污染控制，降低大腸桿菌的感染率⑷在做好生物安全的基礎(chǔ)上，重點做好ND、IB、H9AI的防疫接種。活疫苗的使用頻率不宜太高，除非不得已，不使用I系ND活疫苗,⑸做好IBD、MD、CAA等免疫抑制病的預防工

60、作。IBD主要是預防和選擇合適的疫苗，慎用中等偏強毒力的疫苗。建議肉雞群普遍使用MD疫苗⑹要使我國雞的多因素呼吸道病和其它重要傳染病的控制有一大的改進，必需在全國范圍內(nèi)抓3件事：一是抓種雞群胚傳疾病的凈化，提高苗雞的質(zhì)量；二是抓禽用活疫苗的SPF雞胚來源化，防止多種胚傳疾病的人為傳播；三是抓養(yǎng)禽業(yè)的生物安全系統(tǒng)，改變多年來形成的依賴疫苗和藥物控制傳染病的錯誤觀念,謝 謝！,雞支原體病,我國所有商業(yè)雞群都存在支原體 (MG、MS)

61、，感染率10%~60%不等,劉秀梵《中國禽業(yè)導刊》2001年5期P8~9,支原體 Mycoplasmosis,支原體是很小的原核生物，無細胞壁，僅有胞漿包裹。在人類、動物、植物和昆蟲體內(nèi)均發(fā)現(xiàn)了支原體。支原體一般寄生于黏膜表面，多數(shù)對宿主無侵染性。目前已知包括雞毒支原體在內(nèi)的一些支原體可以侵入細胞內(nèi)。雞毒支原體（MG）感染雞稱之為慢性呼吸道病（CRD）其特征是呼吸啰音、咳嗽、流鼻涕、結(jié)膜炎，臨床表現(xiàn)為緩慢發(fā)展且病程很長。當與ND、IB

62、或大腸桿菌并發(fā)時可引起氣囊炎?；耗抑гw（MS）感染最常表現(xiàn)為亞臨床型上呼吸道感染。與ND、IB、或二者混合感染引起氣囊病變。有時MS可引起系統(tǒng)性感染，并導致傳染性滑膜炎，這是雞和火雞的一種急性或慢性傳染性疾病，主要涉及關(guān)節(jié)的滑液囊膜及腱鞘，引起滲出性滑膜炎、腱鞘滑膜炎或黏液囊炎,。,支原體的危害,該病在全世界范圍廣泛分布。雞毒支原體感染是家禽致病性最強，經(jīng)濟損失最大的支原體病。胴體淘汰或降級、飼料利用率和產(chǎn)蛋的降低以及治療費用

63、的增加，使得該病成為世界范圍內(nèi)養(yǎng)禽業(yè)面臨的代價最高的疾病問題之一。雞毒支原體感染的宿主范圍相當窄，有嚴格的宿主特異性 ，沒有公共衛(wèi)生學意義。,減少產(chǎn)蛋10%~20%,印度的研究結(jié)果表明，雞敗血支原體病可使72周 齡的每只入舍母雞產(chǎn)蛋量減少20～25個。,傳播、攜帶者和傳播媒介,易感雞群可以通過直接或間接接觸水平傳播，引起臨床或亞臨床感染，導致雞群的高感染率或疾病流行;上呼吸道和結(jié)膜是氣溶膠和飛沫中的菌株進入機體的通道;增加群體密

64、度會增加雞群水平傳播MG的發(fā)生率;可以經(jīng)種蛋垂直傳播。感染4周后達到蛋傳高峰，大約25%的雞蛋被感染，另一項研究是在感染后的3~6周，有50%的蛋感染。被感染的蛋孵化出來的后代，可以引起MG的水平傳播。,MG的抵抗力,MG在宿主體外存活很少超過幾天，因此MG的攜帶者是該病流行的關(guān)鍵。MG在雞糞中20℃存活1~3天，在棉布上20℃可存活3天或37℃存活1天，在卵黃中37℃可存活18周或20℃存活6周。在人的鼻腔中可存活2天，在人的頭發(fā)

65、中存活3天，在稻草、棉花、橡膠制品中存活2天，在羽毛中存活2~4天。加溫到45.6℃ ，持續(xù)12~14小時，可殺滅感染雞胚中的MG。,發(fā)病率和死亡率,潛伏期6~12天，但臨床癥狀的發(fā)展隨MG菌株毒力、并發(fā)感染、環(huán)境和其他因素的不同而變化較大。在自然條件下，根據(jù)臨床癥狀的出現(xiàn)很難估計可能感染時間。MG感染通常可危及整個雞群，但疾病的嚴重程度和持續(xù)時間有所不同。在寒冷的季節(jié)病情更嚴重，病程更長，對小日齡雞危害比成年雞嚴重，但產(chǎn)蛋雞群由于

66、產(chǎn)蛋量降低造成的損失可能相當大。在成年雞群的死亡率很低，但產(chǎn)蛋量下降。肉雞無并發(fā)感染時死亡率非常低，有并發(fā)感染時死亡率可高達30%尤其是在寒冷的季節(jié)。生長緩慢，胴體等級降低及廢棄等可能造成更進一步的損失。,，,病理變化,大體病變主要是鼻道、副鼻道、氣管、支氣管及氣囊的卡他性滲出液。氣囊可見干酪樣滲出，還可能觀察到一定程度的肺炎。典型的氣囊病例可見到氣囊炎、纖維素性或纖維膿性肝周炎以及心包黏連等三炎病變，引起高死亡率和加工過程中的大量

67、淘汰。但衣原體和敗血癥也可引起類似的病變，并非MG的示病性病變MG引起的商品蛋雞角膜結(jié)膜炎可見面部皮下組織和眼瞼明顯水腫，偶爾可見角膜渾濁。伴隨產(chǎn)蛋下降可能出現(xiàn)輸卵管腫脹，內(nèi)有滲出物,。,。,診斷,血清學試驗呈陽性，結(jié)合病史和典型癥狀可以作出初步診斷。MG的標準診斷方法是病原體的分離和鑒定。氣管懸液或氣囊的滲出物、鼻甲骨、肺臟或鼻竇的滲出液可直接接種于支原體肉湯中或瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。在感染的急性階段（通常是指感染后最初的4~8周

68、），采集10~20只活禽的氣管或鼻后裂拭子，一般就足以分離出該菌；但在感染的后期，則可能需要培養(yǎng)30~100個樣品?？股刂委熆赡芊恋K感染禽MG的分離。,防治,建立清潔的種雞群，防止經(jīng)蛋傳播；嚴格的生物安全措施；適當?shù)目股刂委熆梢越档桶l(fā)病率和死亡率，減少損失和經(jīng)蛋傳播；疫苗免疫：滅活疫苗F株6/85株ts-11株,在印度以及別的一些國家有采用R株(或S6株)制作的高效菌苗(油劑混懸苗)供應用。這些菌苗可減輕或控制雞敗血