常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)用溶液的配制方法

1、常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)用溶液的配制方法作者：佚名實(shí)驗(yàn)頻道來(lái)源：生物谷點(diǎn)擊數(shù)：2985更新時(shí)間：20041221一.常用貯液與溶液常用貯液與溶液1molL亞精胺（Sperine）:溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于20℃。1molL精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于20℃。10molL乙酸胺（ammoniumacetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加

2、水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。10mgml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級(jí)，無(wú)DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動(dòng)，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于20℃。1molL二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水，分成小份貯存于20℃?；蜣D(zhuǎn)移100m

3、g的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65ml的水配制成1molL二硫蘇糖醇溶液。8molL乙酸鉀（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100ml。1molL氯化鉀（KCl）：溶解7.46g氯化鉀于足量的水中，加水定容到100ml。3molL乙酸鈉（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。0.5molLEDTA

4、:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5molL），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1molLHEPES：將23.8gHEPES溶于約90ml的水中，用NaOH調(diào)pH（6.88.2），然后用水定容至100ml。1molLHCl：加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。25mgmlIPGT：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代βD半乳糖苷）于10

5、ml水中，分成小份貯存于20℃。1molLMgCl2:溶解20.3gMgCl26H2O于足量的水中，定容到100ml。100mmolLPMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中，定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于20℃。20mgml蛋白酶K（proteinaseK）：將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于

6、20℃。10mgmlRnase（無(wú)DNase）（DNase－freeRNase）：溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA酶于1ml的10mmolL的乙酸鈉水溶液中（pH5.0）。溶解后于水10mmolLdCTP10mmolLdGTP10mmolLdTTP水2ul100mmolLdCTP貯液2ul100mmolLdGTP貯液2ul100mmolLdTTP貯液12ul20％PEG80002.5MNaCl成分及終濃度配制10ml溶液各成分的用量質(zhì)量濃度為

7、20％聚乙二醇2.5molL氯化鈉水20g50ml5molL氯化鈉或14.6g固體氯化鈉補(bǔ)足100ml加聚乙二醇于含有氯化鈉的燒杯中，加水至終體積100ml，用磁力攪拌器攪拌溶解。20SSC成分及終濃度配制1L溶液各成分的用量300mmolL檸檬酸三鈉（二水）3molL氯化鈉水88.2g175.3g補(bǔ)足1L溶解檸檬酸三鈉（二水）和氯化鈉于約0.9L水中，加幾滴10NNaOH溶液調(diào)pH為7.0，用水補(bǔ)足體積至1L。DEPC（焦碳酸二乙酯）

8、處理水加100ulDEPC于100ml水中，使DEPC的體積分?jǐn)?shù)為0.1％。在37℃溫浴至少12h，然后在15psi條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC失活。DEPC會(huì)與胺起反應(yīng)，不可用DEPC處理Tris緩沖液。甲酰胺（deionizedfmae）直接購(gòu)買或加DowexXG8混合樹(shù)脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中，用磁力攪拌器輕輕攪拌1h，可去除甲酰胺中的離子。經(jīng)Whatman1號(hào)濾紙過(guò)濾除去樹(shù)脂后分成小份，充氮?dú)庥?0℃貯存（防止