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文檔簡介
1、A228浪險工作室收集制作1第五章微生物的代謝新陳代謝簡稱代謝,泛指發(fā)生在活細(xì)胞中的各種分解代謝和合成代謝的總和。第一節(jié)微生物的酶合成代謝和分解代謝、耗能代謝和產(chǎn)能代謝是一個對立統(tǒng)一的過程,它們在生物體中偶聯(lián)進行。細(xì)胞靠什么完成這些反應(yīng)?是酶,微生物的新陳代謝是在酶系統(tǒng)的催化下協(xié)調(diào)地進行的。一、酶與一般催化劑的比較(一)催化共性(二)酶的特性(三)微生物酶產(chǎn)生的特點1微生物繁殖快、生活周期短、產(chǎn)量高2微生物種類繁多,酶的品種齊全3工業(yè)生
2、產(chǎn)效益高二、酶的分類(一)根據(jù)酶在細(xì)胞中的活動部分分類培養(yǎng)時存在于細(xì)胞內(nèi)的酶稱為胞內(nèi)酶,分泌到細(xì)胞外的稱胞外酶。(二)根據(jù)酶的生成方式分類分為誘導(dǎo)酶和固有酶。(三)根據(jù)酶催化反應(yīng)的類型分類四、工業(yè)上常用的微生物酶(一)淀粉水解酶類葡萄糖生成酶β—淀粉酶α—淀粉酶異淀粉酶(二)蛋白質(zhì)酶來自微生物的蛋白酶主要是枯草桿菌蛋白酶、黑曲霉蛋白酶等。(三)纖維素酶纖維素酶的產(chǎn)生菌有:細(xì)菌、放線菌、霉菌以及各種高等真菌(如蘑菇)等。但真正用于生產(chǎn)的纖
3、維素酶的菌種主要是霉菌,特別是綠色木霉、黑曲霉、青霉和根霉。第二節(jié)微生物的產(chǎn)能代謝能量代謝是新陳代謝的核心問題最初能源→1.有機物(化能異養(yǎng)菌)→通用能源(ATP)最初能源→2.日光(光能營養(yǎng)菌)→通用能源(ATP)最初能源→3.無機物(化能自養(yǎng)菌)→通用能源(ATP)能量(3個去處)1.直接利用;2.ATP;3.環(huán)境中一、微生物細(xì)胞中能量的釋放——生物氧化生物氧化:物質(zhì)在生物體內(nèi)經(jīng)過一系列的氧化還原反應(yīng),逐步分解并釋放能量的過程,稱為
4、生物氧化。生物氧化的功能:產(chǎn)能(ATP)、產(chǎn)還原力[H]、產(chǎn)小分子中間代謝物生物氧化的類型:有氧呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵(一)發(fā)酵概念:在生物氧化中發(fā)酵是指在無氧條件下,微生物以有機物分解不徹底的中間產(chǎn)物為受氫體,同時產(chǎn)生各種代謝產(chǎn)物并釋放少量能量的生物氧化過程。在發(fā)酵工業(yè)上,發(fā)酵是指任何利用厭氧或好氧微生物來生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物的一類生產(chǎn)方式。發(fā)酵途徑:葡萄糖在厭氧條件下分解產(chǎn)能的途徑主要有EMP、HMP、ED和磷酸解酮酶途徑。發(fā)酵類型:根據(jù)
5、發(fā)酵產(chǎn)物的種類有乙醇發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、丙酸發(fā)酵、丁酸發(fā)酵、混合酸發(fā)酵、丁二醇發(fā)酵及乙酸發(fā)酵等。酵母型乙醇發(fā)酵酵母菌的乙醇發(fā)酵應(yīng)嚴(yán)格控制三個條件:厭氧、培養(yǎng)基中不含NaHSO3、pH﹤7.6。(二)呼吸作用概念:底物在脫氫酶作用下脫下的氫和電子,經(jīng)過呼吸鏈的傳遞,最終與外源的分子氧或無機氧化物結(jié)合,并釋放能量的過程。呼吸作用與發(fā)酵作用的根本區(qū)別在于:電子載體不是將電子直接傳遞給底物降解的中間產(chǎn)物,而是交給電子傳遞系統(tǒng),逐步釋放出能量后再交給
6、最終電子受體。1.有氧呼吸概念:是以分子氧作為最終電子(或氫)受體的氧化過程;是最普遍、最重要的生物氧化方式。特點:必須指出,在有氧呼吸作用中,底物的氧化作用不與氧的還原作用直接偶聯(lián),而是底物在氧化過程中釋放的電子先通過電子傳遞鏈(由各種電子傳遞體,如NAD,F(xiàn)AD,輔酶Q和各種細(xì)胞色素組成)最后才傳遞到氧。2.無氧呼吸概念:以無機氧化物中的氧作為最終電子(和氫)受體的氧化作用。一些厭氧和兼性厭氧微生物在無氧條件下進行無氧呼吸。無機氧化
7、物:如NO3、NO2、SO42、S2O32等。在無氧呼吸過程中,電子供體和受體之間也需要細(xì)胞色素等中間電子遞體,并伴隨有磷酸化作用,底物可被徹底氧化,可產(chǎn)生較多能量,但不如有氧呼吸產(chǎn)生的能量多。以無機物作為電子最終受體的呼吸作用(化合物氧化脫下的氫和電子經(jīng)呼吸鏈傳遞,最終交給無機氧化物NO3、NO2、SO42、S或CO2等或延胡索酸等有機物的過程。)二、能量的轉(zhuǎn)換——磷酸化作用將生物氧化過程中釋放出的自由能轉(zhuǎn)移,使ADP(腺苷二磷酸)形
8、成ATP(腺苷三磷酸)的過程稱為磷酸化作用。ADP能量→ATP(一)氧化磷酸化利用生物氧化放出的能量進行磷酸化生成ATP的過程。底物水平磷酸化電子傳遞磷酸化(二)光合磷酸化以光合色素為媒介,將光能轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W(xué)能的過程。1環(huán)式光合磷酸化2非環(huán)式光合磷酸化第三節(jié)微生物的代謝產(chǎn)物初級代謝產(chǎn)物:如氨基酸、核苷酸、蛋白質(zhì)、核酸、糖類等,是菌體生長繁殖所必需的。次級代謝產(chǎn)物二、微生物的次生代謝產(chǎn)物概念:次生代謝物是指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后,以結(jié)構(gòu)
9、簡單、代謝途徑明確、產(chǎn)量較大的初生代謝物作前體,通過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化學(xué)物。種類:抗生素、生長刺激素、維生素、毒素、色素等(一)抗生素根據(jù)抗生素的生物來源分類:放線菌產(chǎn)生的抗生素。迄今約有80%的抗生素是由放線菌產(chǎn)生的。其中鏈霉菌屬產(chǎn)生的抗生素最多。常用的抗細(xì)菌抗生素有鏈霉素、卡那霉素、四環(huán)素、土霉素、紅霉素等。真菌產(chǎn)生的抗生素。主要來源于半知菌亞門的青霉菌屬和頭孢菌屬,如青霉菌屬的青霉素和灰黃霉素、頭孢菌屬的頭孢菌
10、素等。A228浪險工作室收集制作3干重法濕重法(2)含氮量測定法(3)核酸含量測定法(4)生理指標(biāo)法(二)單細(xì)胞微生物的群體生長規(guī)律1.細(xì)菌的群體生長特征細(xì)菌以裂殖的方式繁殖,一個細(xì)菌細(xì)胞分裂成兩個細(xì)胞的間隔被稱為世代,一個世代所需的時間就是代時,有時也被稱為倍增時間。2.細(xì)菌生長曲線把少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中后,在適宜的條件下培養(yǎng),它們的群體就會有規(guī)律地生長起來。如果以細(xì)胞數(shù)目的對數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時間作橫坐標(biāo)
11、,就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長曲線。典型生長曲線:不補充營養(yǎng)物不移去培養(yǎng)物保持培養(yǎng)體積不變(1)延滯期概括說:分裂遲緩、代謝活躍將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。A、特點:①生長速率常數(shù)等于零②細(xì)胞形態(tài)變大或增長③細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高④合成代謝活躍,核糖體、酶類和ATP的合成加快⑤對外界不良條件例如NaCl溶液濃度、溫度和抗生
12、素等化學(xué)藥物的反應(yīng)敏感。B、原因:延滯期的出現(xiàn),可能是因為在接種到新鮮培養(yǎng)液的細(xì)胞中,一時還缺乏分解或催化有關(guān)底物的酶,或是缺乏充足的中間代謝物。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成有關(guān)的中間代謝物,就需要有一段適應(yīng)期,于是出現(xiàn)了生長的延滯期。C、影響延滯期長短的因素:(1)菌種的特性(2)接種齡(3)接種量(4)培養(yǎng)基成分D、在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施縮短延滯期:①通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短;②利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為“種子”
13、;③盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大;④適當(dāng)擴大接種量等方式縮短遲緩期,克服不良的影響。E、應(yīng)用:發(fā)酵工業(yè)上需盡量縮短該期,以降低生產(chǎn)成本;在食品工業(yè)上,盡量在此期進行消毒或滅菌。(2)對數(shù)期概括說:菌體數(shù)目按幾何級數(shù)增加特點:①生長速率常數(shù)R最大②細(xì)胞進行平衡生長,菌體內(nèi)各種成分最為均勻③酶系活躍,代謝旺盛應(yīng)用:指數(shù)期的微生物因其整個群體的生理特性較一致、細(xì)胞成分平衡發(fā)展和生長速率恒定,故可①作為代謝、生理等研究的良好材料
14、;②是增殖噬菌體的最適宿主菌齡;③也是發(fā)酵生產(chǎn)中用作“種子”的最佳種齡。(3)穩(wěn)定期概括說:菌體產(chǎn)量達到了最高點A、特點:①生長速率常數(shù)R等于0,總菌數(shù)達到最高水平;②細(xì)胞開始貯存糖原、異染顆粒和脂肪等貯藏物;③某些細(xì)菌在穩(wěn)定期開始合成抗生素等次生代謝產(chǎn)物;④多數(shù)芽孢桿菌在這時開始形成芽孢。B、穩(wěn)定期到來的原因:①營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;②營養(yǎng)物的比例失調(diào),例如C/N比值不合適等;③酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的累積;④
15、pH、氧化還原勢、溫度等物化條件越來越不適宜。C、獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物采取措施:補充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件,如對好氧菌進行通氣、攪拌或振蕩等。D、應(yīng)用:穩(wěn)定期是以生產(chǎn)菌體或與菌體生長相平行的代謝產(chǎn)物,例如單細(xì)胞蛋白、乳酸等為目的的一些發(fā)酵生產(chǎn)的最佳收獲期。此外,由于對穩(wěn)定期到來的原因進行研究,還促進了連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)的設(shè)計和研究。(4)衰亡期概括說:整個群體呈現(xiàn)出負(fù)生長A、特點:①個體死亡的速度超過新生的速度;②細(xì)胞形
16、態(tài)多樣,部分自溶;③產(chǎn)生或釋放抗生素等次生代謝產(chǎn)物;芽孢釋放B、產(chǎn)生衰亡期的原因:主要是外界環(huán)境對繼續(xù)生長越來越不利,從而引起細(xì)胞內(nèi)的分解代謝大大超過合成代謝,繼而導(dǎo)致菌體死亡。(三)絲狀微生物的群體生長絲狀微生物的純培養(yǎng)采用孢子接種,在液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)或深層通氣加攪拌培養(yǎng),菌絲體通過斷裂繁殖不形成產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)??梢杂镁z干重作為衡量生長的指標(biāo),即以時間為橫坐標(biāo),以菌絲干重為縱坐標(biāo),繪制生長曲線。第二節(jié)微生物生長的環(huán)境條件微生物與所處的
17、環(huán)境之間具有復(fù)雜的相互影響和相互作用:一方面,各種各樣的環(huán)境因素對微生物的生長和繁殖有影響;另一方面,微生物生長繁殖也會影響和改變環(huán)境。研究環(huán)境因素與微生物之間的關(guān)系,可以通過控制環(huán)境條件來利用微生物有益的一面,同時防止它有害的一面。一、溫度從微生物整體來看:生長的溫度范圍一般在12℃~100℃極端下限為30℃,極端上限為105~300℃。但對于特定的某一種微生物:只能在一定溫度范圍內(nèi)生長,在這個范圍內(nèi),每種微生物都有自己的生長溫度三基
18、點,即最低、最適、最高生長溫度。(二)pH微生物生長過程中機體內(nèi)發(fā)生的絕大多數(shù)的反應(yīng)是酶促反應(yīng),而酶促反應(yīng)都有一個最適pH范圍,在此范圍內(nèi)只要條件適合,酶促反應(yīng)速率最高,微生物生長速率最大,因此微生物生長也有一個最適生長的pH范圍。微生物最低pH最適pH最高pH細(xì)菌3~56.5~7.58~10酵母菌2~34.5~5.57~8霉菌1~34.5~5.57~8為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑、備用堿,或在進行工業(yè)發(fā)酵
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