草除靈高效降解菌的分離鑒定、降解特性及降解途徑的研究.pdf

1、從農(nóng)藥廠污水處理池的活性污泥中分離得到一株能以草除靈為唯一碳源生長的菌株。根據(jù)其表型特征、生理生化特性,結(jié)合菌株的16S rRNA基因序列同源性分析,將此菌株初步鑒定為Methyloversatilis sp.,命名為cd-1。
　　 菌株cd-1液體培養(yǎng)時呈絮狀生長,在溫度為30℃、pH8.0的R2A培養(yǎng)基中生長最好;利用有機氮源和有機碳源生長較好;茵株對通氣量沒有特殊要求;該菌株不耐鹽,NaCl濃度對菌株生長影響很大,NaC

2、l濃度在0g/L～5g/L時生長最好;菌株cd-1對氯霉素和氨芐青霉素有抗性,對供試的其他抗生素均敏感。
　　 菌株cd-1在溫度為30℃、pH為8.0時降解草除靈最好;接種量為2％時,菌株在草除靈濃度為100mg·L-1的無機鹽液體培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后,草除靈殘留濃度僅為0.85mg·L-1,降解率達到99%;接種量由0.5%提高到8%,可以迅速加快草除靈的降解;當草除靈濃度為25 mg·L-1時,16h時草除靈殘留濃度僅為1.

3、44 mg·L-1,草除靈濃度提高到400 mg·L-1時,48h時草除靈濃度仍高達284.56mg·L-1,說明高濃度會對菌株產(chǎn)生毒害作用,抑制菌株對草除靈的降解;菌株利用有機氮源降解草除靈最快;通氣量對菌株降解草除靈沒有影響;加入蛋白胨、酵母粉和LB溶液可以提高菌株對草除靈的降解率。在土壤中接種降解菌cd-1可以加快草除靈的降解,土著微生物與外源投加的降解菌以協(xié)同作用的方式降解草除靈,提高了土壤中草除靈的降解速率。
　　 通

4、過MS/MS和GC-MS聯(lián)合檢測,研究了草除靈在高效降解菌株cd-1作用下的降解途徑,總共檢測到了3個新的代謝產(chǎn)物。通過質(zhì)譜圖分析及代謝產(chǎn)物累積轉(zhuǎn)換關(guān)系,鑒定3個代謝產(chǎn)物分別為benazolin、7-chloro-3-Methylbenzo[d]thiazol-2(3H)-one和2-claloro-6-(methyle-neamino)benzenethiol。初步確定代謝途徑,先由benazolin-ethyl轉(zhuǎn)化為benazoli

5、n,接著由benazolin轉(zhuǎn)化為7-chloro-3-methylbenzo[d]thiazol-2(3H)-one,最終轉(zhuǎn)化為2-chloro-6-(methyle-neamino)benzenethiol。
　　 為了便于菌株的實際應用,還對菌株的固定化進行了研究.采用海藻酸鈉包埋法固定高效降解菌,結(jié)果表明海藻酸鈉濃度為3%,CaCl2濃度為3%,固化時間為12h時,制得的固定化小球機械強度最好,對草除靈的降解效果也最好。