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文檔簡介
1、現(xiàn)代分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料現(xiàn)代分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料第一章第一章緒論緒論分子生物學(xué)分子生物學(xué):是研究核酸、蛋白質(zhì)等所有生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及其重要性、規(guī)律性和相互關(guān)系的科學(xué)分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容1、DNA重組技術(shù)2、基因表達(dá)調(diào)控研究3、生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究——結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)4、基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究5、DNA的復(fù)制轉(zhuǎn)錄和翻譯第二章第二章染色體與染色體與DNA半保留復(fù)制半保留復(fù)制:DNA在復(fù)制過程中堿基
2、間的氫鍵首先斷裂,雙螺旋解旋并被分開,每條鏈分別作為模板合成新鏈,產(chǎn)生互補的兩條鏈。這樣新形成的兩個DNA分子與原來DNA分子的堿基順序完全一樣,因此,每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,所以這種復(fù)制方式被稱為DNA半保留復(fù)制DNA半不連續(xù)復(fù)制半不連續(xù)復(fù)制:DNA雙螺旋的兩條鏈反向平行,復(fù)制時,前導(dǎo)鏈DNA的合成以5′3′方向,隨著親本雙鏈體的解開而連續(xù)進(jìn)行復(fù)制;后隨鏈在合成過程中,一段親本DNA單鏈?zhǔn)紫缺┞冻鰜恚?/p>
3、然后以與復(fù)制叉移動相反的方向、按照5′3′方向合成一系列的岡崎片段,然后再把它們連接成完整的后隨鏈,這種前導(dǎo)鏈的連續(xù)復(fù)制和后隨鏈的不連續(xù)復(fù)制稱為DNA的半不連續(xù)復(fù)制原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點:1、基因組很小,大多只有一條染色體2、結(jié)構(gòu)簡練3、存在轉(zhuǎn)錄單元,多順反子4、有重疊基因真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點:1、真核基因組龐大,一般都遠(yuǎn)大于原核生物的基因組2、真核基因組存在大量的重復(fù)序列3、真核基因組
4、的大部分為非編碼序列,占整個基因組序列的90%以上,該特點是真核生物與細(xì)菌和病毒之間最主要區(qū)別4、真核基因組的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子5、真核基因是斷裂基因,有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)6、真核基因組存在大量的順式作用元件,包括啟動子、增強(qiáng)子,沉默子等7、真核基因組中存在大量的DNA多態(tài)性8、真核基因組具有端粒結(jié)構(gòu)DNA轉(zhuǎn)座(移位轉(zhuǎn)座(移位)是由可移位因子介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象DNA轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng):1、轉(zhuǎn)座引入插入突變2、轉(zhuǎn)座產(chǎn)生新的基因3
5、、轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的染色體畸變4、轉(zhuǎn)座引起生物進(jìn)化轉(zhuǎn)座子分為轉(zhuǎn)座子分為插入序列和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子兩大類環(huán)狀環(huán)狀DNA復(fù)制方式:復(fù)制方式:θ型、滾環(huán)型和D環(huán)型第三章第三章生物信息的傳遞(上)生物信息的傳遞(上)從DNA到RNA轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄:指拷貝出一條與DNA鏈序列完全相同的RNA單鏈的過程啟動子啟動子:是一段位于結(jié)構(gòu)基因5′段上游區(qū)的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準(zhǔn)確地結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性原核生物啟動子結(jié)構(gòu)原核生物啟動子結(jié)構(gòu):存
6、在位于10bp處的TATA區(qū)和35bp處的TTGACA區(qū),其是RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合位點,能與σ因子相互識別而具有很高的親和力終止子終止子:是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號的DNA序列(促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止的DNA序列)終止子的類型終止子的類型:不依賴于ρ因子和依賴于ρ因子增強(qiáng)子增強(qiáng)子:能增強(qiáng)或促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始的序列增強(qiáng)子的特點增強(qiáng)子的特點:1、遠(yuǎn)距離效應(yīng)2、無方向性3、順式調(diào)節(jié)4、無物種和基因的特異性5、具3.SRP與SRP受體相結(jié)合,核糖體與
7、膜結(jié)合,翻譯重新開始4.信號肽進(jìn)入膜結(jié)構(gòu)5.蛋白質(zhì)過膜,信號肽被切除,翻譯繼續(xù)進(jìn)行6.蛋白質(zhì)完全過膜,核糖體解離第五章第五章SNP是指基因組DNA序列中由于單個核苷酸的突變而引起的多肽性。RACE技術(shù)技術(shù)是一項在已知cDNA序列的基礎(chǔ)上克隆5′端或3′端缺失序列的技術(shù),在很大程度上依賴于RNA連接酶連接和寡聚帽子的快速擴(kuò)增核酸凝膠電泳技術(shù)原理:核酸凝膠電泳技術(shù)原理:PCR原理:原理:首先將雙鏈DNA分子在臨近沸點的溫度下加熱分離成兩條單
8、鏈DNA分子,DNA聚合酶以單鏈DNA為模板并利用反應(yīng)混合物中的四種脫氧核苷三磷酸合成新生的DNA互補鏈。基因組文庫:基因組文庫:把某種生物的基因組DNA切成適當(dāng)大小,分別與載體組合,導(dǎo)入微生物細(xì)胞,形成克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段集合即基因組DNA文庫。cDNA文庫:文庫:以組織細(xì)胞中mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄合成的雙鏈cDNA。第七章第七章基因表達(dá):基因表達(dá):從DNA到蛋白質(zhì)或功能RNA的過程稱為基因表達(dá)?;虮磉_(dá)調(diào)控
9、:基因表達(dá)調(diào)控:對從DNA到蛋白質(zhì)或功能RNA的過程的調(diào)節(jié)就稱為基因表達(dá)調(diào)控。乳糖操縱子模型的主要內(nèi)容:乳糖操縱子模型的主要內(nèi)容:1.Z,Y,A基因的產(chǎn)物是由同一條多順反子的mRNA分子所編碼的。2.該mRNA分子的啟動區(qū)(P)為于遏制基因(I)與操縱區(qū)(O)之間,不能單獨起始半乳糖苷酶和透過酶基因的高效表達(dá)。3操縱區(qū)是DNA上的一小段序列,是遏制物的結(jié)合位點。4.當(dāng)阻遏物與操縱區(qū)相結(jié)合時,lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。5.誘導(dǎo)物通
10、過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之不能與操縱區(qū)相結(jié)合,從而激發(fā)lacmRNA的合成。色氨酸操縱子:色氨酸操縱子:(trp操縱子)色氨酸合成分五步完成,有七個基因參與整個合成過程,trpE和trpG編碼鄰氨基苯甲酸合酶,trpD編碼鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,trpF編碼異構(gòu)酶,trpC編碼吲哚甘油磷酸合酶,trpA和trpB則分別編碼色氨酸合酶的α和β亞基,在許多細(xì)菌中,trpE和trpG融合成一個功能基因,trpC和trpB也融合
11、成一個基因,產(chǎn)生具有雙重功能的蛋白質(zhì),trpE基因是第一個被翻譯的基因,和trpE緊鄰的是啟動子區(qū)和操縱區(qū)第八章第八章基因家族:基因家族:真核細(xì)胞中許多相關(guān)的基因常按功能成套組合,被稱為基因家族。簡述真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄,翻譯及簡述真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄,翻譯及DNA的空間結(jié)構(gòu)方面存在的差異的空間結(jié)構(gòu)方面存在的差異一、基因轉(zhuǎn)錄1、原核生物的RNA聚合酶是一種多聚體蛋白質(zhì)真核生物的RNA聚合酶有三種(RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)
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