分子生物學試題及答案重點版

1、1廣石化分子生物學試題及答案一、名詞解釋1．cDNA cDNA 與 cccDNA cccDNA：cDNA 是由 mRNA 通過反轉錄酶合成的雙鏈 DNA；cccDNA 是游離于染色體之外的質粒雙鏈閉合環(huán)形 DNA。2．標準折疊單位 標準折疊單位：蛋白質二級結構單元 α－螺旋與 β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結構塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級結構。幾乎所有的三級結構都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因

2、此又將其稱為標準折疊單位。3．CAP CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白 CRP（cAMP receptor protein ） ，cAMP 與 CRP 結合后所形成的復合物稱激活蛋白 CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列 回文序列：DNA 片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。5．micRNA micRNA：互補干擾 RNA 或稱反義 RNA，與 mRNA 序列互補，可抑制 mRNA

3、的翻譯。6．核酶 核酶：具有催化活性的 RNA，在 RNA 的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7．模體 模體：蛋白質分子空間結構中存在著某些立體形狀和拓撲結構頗為類似的局部區(qū)域8．信號肽 信號肽：在蛋白質合成過程中 N 端有 15~36 個氨基酸殘基的肽段，引導蛋白質的跨膜。9．弱化子 弱化子：在操縱區(qū)與結構基因之間的一段可以終止轉錄作用的核苷酸序列。10．魔斑 魔斑：當細菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時，細菌將會產生一個應急反應，

4、停止全部基因的表達。產生這一應急反應的信號是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp） 。PpGpp 與 pppGpp 的作用不只是一個或幾個操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級調控子或稱為魔斑。11．上游啟動子元件 上游啟動子元件：是指對啟動子的活性起到一種調節(jié)作用的 DNA 序列，-10 區(qū)的TATA、-35 區(qū)的 TGACA 及增強子，弱化子等。12．DNA DNA 探針 探針：是帶有標記的一段已知序列 DNA，用以

5、檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應用。13．SD SD 序列 序列：是核糖體與 mRNA 結合序列，對翻譯起到調控作用。14．單克隆抗體 單克隆抗體：只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。15．考斯質粒 考斯質粒：是經過人工構建的一種外源 DNA 載體，保留噬菌體兩端的 COS 區(qū)，與質粒連接構成。16．藍-白斑篩選 白斑篩選：含 LacZ 基因（編碼 β 半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物 X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半

6、乳糖苷)產生藍色，從而使菌株變藍。當外源 DNA 插入后，LacZ 基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細菌。稱之為藍-白斑篩選。17．順式作用元件 順式作用元件：在 DNA 中一段特殊的堿基序列，對基因的表達起到調控作用的基因元件。18．Klenow Klenow 酶：DNA 聚合酶 I 大片段，只是從 DNA 聚合酶 I 全酶中去除了 5’ → 3’外切酶活性19．錨定 錨定 PCR PCR：用于擴增已知一端序列的目的 DNA。

7、在未知序列一端加上一段多聚 dG 的尾巴，然后分別用多聚 dC 和已知的序列作為引物進行 PCR 擴增。20．融合蛋白 融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時表達翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結合在一起所組成的蛋白質。二、填 空1． DNA 的物理圖譜是 DNA 分子的（限制性內切酶酶解 限制性內切酶酶解 ）片段的排列順序。2． RNA 酶的剪切分為（自體催化 自體催化 ） 、 （異體催化 異體催化 ）兩種類型。3．原核生物中有三種

8、起始因子分別是（IF-1 IF-1） 、 （ IF-2 IF-2 ）和（IF-3 IF-3 ） 。4．蛋白質的跨膜需要（ 信號肽 信號肽 ）的引導，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構象3分別是（ TFIID ） 、 （ SP-1 SP-1 ）和（ CTF/NF1 CTF/NF1 ） 。21．RNA 聚合酶Ⅱ的基本轉錄因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E 他們的結合順序是： （ D、A、B、E ） 。其中 TFII

9、-D 的功能是（與 TATA TATA 盒結合 盒結合 ） 。22．與 DNA 結合的轉錄因子大多以二聚體形式起作用，轉錄因子與 DNA 結合的功能域常見有以下幾種（ 螺旋 螺旋-轉角 轉角-螺旋 螺旋 ） 、 （ 鋅指模體 鋅指模體 ） 、 （堿性 堿性-亮氨酸拉鏈模體 亮氨酸拉鏈模體 ） 。23．限制性內切酶的切割方式有三種類型分別是（在對稱軸 在對稱軸 5' 5' 側切割產生 側切割產生 5' 5'

10、 粘端 粘端 ） 、 （在對稱軸 對稱軸 3' 3' 側切割產生 側切割產生 3' 3' 粘端 粘端） （在對稱軸處切割產生平段 在對稱軸處切割產生平段） 。24．質粒 DNA 具有三種不同的構型分別是：（ SC SC 構型 構型 ） 、 （ oc oc 構型 構型 ） 、 （ L 構型 構型 ） 。在電泳中最前面的是（ SC SC 構型 構型 ） 。25．外源基因表達系統(tǒng)，主要有（大腸桿菌

11、大腸桿菌 ） 、 （ 酵母 酵母） 、 （ 昆蟲 昆蟲 ）和（ 哺乳類細胞表 哺乳類細胞表 ） 。26．轉基因動物常用的方法有：（逆轉錄病毒感染法 逆轉錄病毒感染法） 、 （DNA DNA 顯微注射法 顯微注射法） 、 （胚胎干細胞 胚胎干細胞法 ） 。三、簡 答1． 分別說出 分別說出 5 種以上 種以上 RNA RNA 的功能？ 的功能？轉運 RNA tRNA 轉運氨基酸 ；核蛋白體 RNA rRNA 核蛋白體

12、組成成 ；信使 RNA mRNA 蛋白質合成模板 ；不均一核 RNA hnRNA 成熟 mRNA 的前體 ；小核 RNA snRNA 參與 hnRNA 的剪接；小胞漿 RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白質內質網定位合成的信號識別體的組成成分；反義 RNA anRNA/micRNA 對基因的表達起調節(jié)作用；核酶 Ribozyme RNA 有酶活性的 RNA2．原核生物與真核生物啟動子的主要差別？ ．原核生物與真

13、核生物啟動子的主要差別？原核生物TTGACA --- TATAAT------起始位點 -35 -10真核生物增強子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位點 -110 -70 -253．對天然質粒的人工構建主要表現在哪些方面？ ．對天然質粒的人工構建主要表現在哪些方面？天然質粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對之進行改造構建：a、加入合適的選擇標記基因，如兩個以上，易于用作選擇,通常是抗生素基

14、因。b、增加或減少合適的酶切位點，便于重組。 c、縮短長度，切去不必要的片段，提高導入效率，增加裝載量。d、改變復制子，變嚴緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。e、根據基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件 4．舉例說明差示篩選組織特異 ．舉例說明差示篩選組織特異 cDNA cDNA 的方法？ 的方法？制備兩種細胞群體，目的基因在其中一種細胞中表達或高表達，在另一種細胞中不表達或低表達，然后通過雜交對比找到目的基因。 例如：在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中