實驗1 葉綠體的分離與熒光分析

1、中國海洋大學實驗報告姓名：常天易系年級：海洋生命學院2012級專業(yè)：生物科學科目：分子細胞生物學實驗學號：12050011006一、一、實驗目的：實驗目的：（1）、通過對植物葉綠體的分離，了解細胞器分離的一般原理和方法（2）、觀察葉綠體的間接熒光，并了解熒光顯微鏡的使用方法二、實驗原理二、實驗原理顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀和密度，也同離心力以及懸浮介質(zhì)的黏度有關(guān)。在一定的離心場中，同一時間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉

2、降速率不同，一次增加離心力和離心時間，就能使非均一懸浮液中的顆粒按其大小。密度的先后分批沉降在離心管的底部分批收集，即可獲得各個亞細胞的組分。葉綠體的分離應該在等滲溶液中進行，以免滲透壓影響葉綠體，對其造成損傷。在熒光顯微鏡下可以觀察葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光。三、實驗材料三、實驗材料新鮮菠菜。等滲溶液：0.35molL氯化鈉溶液，試劑：0.01%吖啶橙(acridineange)②、上表皮因柵欄組織較致密，可以用刀片將下表皮刮掉，在顯

3、微鏡下觀察上表皮的細胞和氣孔。3、菠菜的葉綠體的觀察、菠菜的葉綠體的觀察在普通光學顯微鏡下，將制得的手撕片放在載玻片的等滲溶液中，游離的葉綠體懸濁液點在在載玻片上，輕輕地蓋上蓋玻片（防止氣泡產(chǎn)生），即可觀察。在熒光顯微鏡下，將游離葉綠體懸濁液的的標本放在熒光顯微鏡下，先后用綠光、藍光對其進行照射，在電腦上觀察其產(chǎn)生的自發(fā)熒光。向手撕片的標本、游離葉綠體懸濁液的的標本中加入12滴0.01%吖啶橙染液，先后用綠光、藍光對其進行照射，在電腦上