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文檔簡介
1、附錄1生物實驗室常用試劑的配制一、檢驗酸堿性的試劑1.酚酞試液取0.1g酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里,裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。酚酞試液在堿性溶液中呈紅色。2.甲基橙試液甲基橙是橙黃色粉末或晶狀鱗片。取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸餾水里制成。當pH值由3.1~4.4時,顏色為紅至黃色。3.甲基紅試液甲基紅是紅紫色晶體或紅色粉末。把0.1g甲基紅溶在100mL60%乙醇里制得。當pH值由4.4~6.2時,顏色由紅色至黃色
2、。4.麝香草酚酞(百里酚酞)試液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL90%乙醇里制得。當pH值由9.4~10.6時,顏色為無色至藍色。5.溴甲酚紫指示劑將0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02molL氫氧化鈉溶液中,加蒸餾水稀釋至250mL制得。當pH值由6.2~6.8時,顏色由淡黃色變?yōu)榈仙?,變色點在pH6.7。6.溴甲酚綠試液溴甲酚綠是黃色晶體或紅棕色粉末。把0.1g溴甲酚綠溶于100mL20%乙醇中,或把0.1g溴甲酚綠
3、與2.9mL0.05molL氫氧化鈉溶液研勻,用水稀釋到100mL制得。當pH值由3.8~5.4時,顏色由黃至藍色。7.甲基紫(結(jié)晶紫)試液把0.1g深綠紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。當pH值由0.13~0.5時,顏色由黃至綠;pH值由1.0~1.5時,顏色由綠至藍;pH值由2.0~3.0時,顏色由藍至紫。8.甲酚紅指示劑把0.1g深紅色的甲酚紅溶解于100mL50%的乙醇中,或?qū)?.1g甲酚紅與5.3mL0.05molL氫氧
4、化鈉研勻,用水稀釋到100mL制得。當pH值由0.2~1.8時顏色由紅至黃;pH值由7.0~8.8時,顏色由亮黃至紫紅。甲酚紅指示劑遇少量二氧化碳,能快速變色,反應(yīng)靈敏,效果明顯。9.剛果紅試紙(紅色)把0.5g峋果紅溶解于1L水中,加入5滴乙酸,濾紙用溫熱溶解液浸透后,取出晾干。遇酸性溶液變藍色。當pH值變化范圍為3.0~5.2時,顏色由藍至紅。二、反應(yīng)試劑1.鑒定葡萄糖的試劑(1)班氏(Benedict)試劑①在600mL蒸餾水中溶
5、解173g檸檬酸鈉和100g無水碳酸鈉,冷卻后稀釋到850mL。②在100mL熱蒸餾水中溶解17.4g無水硫酸銅。冷卻后稀釋到150mL。把硫酸銅溶液緩緩倒入上述檸檬酸鈉一碳酸鈉溶中,邊加邊攪拌,如產(chǎn)生沉淀。要過濾,班氏試劑配制后能長期使用。如存放較久而產(chǎn)生沉淀時,可取上層清液使用,不必重配。(2)斐林氏(Fehling’sSolution)試劑①取35g硫酸銅,溶解在400mL蒸餾水里,加蒸餾水到500mL。②取85g氫氧化鉀(或70
6、g氫氧鈉)和175g酒石酸鉀鈉,溶解在400mL蒸餾水里,加水餾水到500mL。上述兩種溶液要分別保存,使用時再等量地混和并攪拌。如溶液里有葡萄糖,加等量斐林試劑,煮沸,會產(chǎn)生紅色的氧化亞銅沉淀。2.鑒定淀粉用的碘液取2g碘化鉀,溶解在10mL蒸餾水中,再加1g碘,待溶解后用蒸餾水稀釋到300mL,即成碘液。溶液在光亮處容易變成氫碘90mL水里,密閉保存。6.用于分離植物木質(zhì)部細胞的試劑—硝酸鉻酸溶液取1%硝酸和10%鉻酸各1份配成。7
7、.用于細胞質(zhì)壁分離的試劑(1)30%蔗糖液(2)5%氯化鈉溶液(3)5%硝酸鉀溶液。8.用于分離上皮細胞的試劑(1)甲醛一生理鹽水溶液(配方同前述);(2)水合氯醛溶液取5g水合氯醛,用蒸餾水溶解,再稀釋到100mL制得。上皮組織浸泡時間為一二天。9.用于分離植物細胞中綠體的試劑0.3molL蔗糖0.01molL3氯化鉀0.05molL磷酸鹽緩沖液(PH=7.2)。0.05molL磷酸鹽緩沖液的配制法是:A液:取0.05molL的Na2
8、HPO412H2O(1.79g)溶解在100mL蒸餾水里。B液:取0.05molL的KH2PO4(0.58g)溶解在100mL蒸餾水里。取A液80mL和B液20mL混和后調(diào)整PH=7.2即可。四、染色劑有些動植物組織和大多數(shù)細胞及細胞器是無色透明的,必須經(jīng)染色劑染色,才能在顯微鏡下觀察清楚,常用染色劑的制法和適用范圍如下表。名稱制法適用范圍洋紅溶液取5g明礬溶解在95mL蒸餾水里,再加0.5克洋紅,煮沸,冷卻,過濾,可加少許石炭酸防霉細
9、胞核、整體標本、如水螅、血吸蟲乙酸洋紅溶液取100mL45%乙酸,煮沸30秒,加入1克洋紅,攪拌,再煮2-5min,冷卻,過濾染色體、洋蔥表皮細胞、口腔上皮細胞硼砂洋紅溶液取4g硼砂溶解在96mL蒸餾水里,再加3g洋紅,加熱到溶解,復用100mL70%乙醇沖淡。經(jīng)24h過濾細胞核、淀粉粒、整體標本銨明礬洋紅溶液取5g硫酸鋁銨(銨明礬)溶解在95mL蒸餾水里,再加0.5g洋紅,煮沸,冷卻,過濾??杉由僭S防腐劑整體標本、蕨類原葉體、植物表皮
10、中性紅溶液取0.1g中性紅溶解在500mL的蒸餾水里原生動物食物泡、動植物組織活細胞內(nèi)含物石炭酸品紅(苯酚品紅)溶液取10g石炭酸溶解在190mL蒸餾水里,成甲液。另取0.3g堿性品紅(品紅)溶解在10mL95%乙醇里,成乙液。把甲液倒入乙液,以蒸餾水稀釋5倍現(xiàn)用細菌、放線菌、原球藻,膠原纖維、彈性纖維。中樞神經(jīng)組織核質(zhì)酸性品紅溶液取1g酸性品紅(品紅)溶解在99mL蒸餾水里細胞中白質(zhì)體,動物細胞細胞質(zhì),植物皮層、髓部的薄壁細胞和纖維素
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