k,v4.2和k,v1.2編碼鉀通道在非洲爪蟾卵母細胞上的表達及雙7他克林對i,kkv1.2的調(diào)制作用

1、華中科技大學碩士學位論文K4.2和K1.2編碼鉀通道在非洲爪蟾卵母細胞上的表達及雙（7）-他克林對I的調(diào)制作用姓名：余雯靜申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)生物學指導教師：李超英;李之望20060401華中科技大學周濟醫(yī)學院 2 0 0 6 屆碩士畢業(yè)論文A b s t r a c tB i s ( 7 ] I - t a e r i n e , a n o v e l d i m e r i eA C h E i n h i b i t o

2、 r f o r t r e a t m e n t o f A D ，n o t o n l y i n h i b i t e dA C h E ，b u t a l s om o d u l a t e s o m e l i g a n d - g a t e d i o n c h a n n e l s s u c h 勰G A B A A - ，n A C h - ，5 - H T 3 一，N M D A - r e c

3、e p t o r s ．D y s f t m e t i o n so fV o l t a g e - g a t e dp o t a s s i u mc h a n n e l sp l a ya l li m p o r t a n t r o l e i n t h e m e c h a n i s m u n d e r l y i n g A D ．T h ep r e s e n te x p e r i m e

4、 n t s w e r ec o n d u c t e d0 1 3X e n o p u so o e y t e $ e x p r e s s e dK “．2 a n dK v l ．2p o t a s s i u m e h a r m e l su s i n gt w o - e l e c t r o d e v o l t a g ec l a m p t e c h n i q u e t oi n v e s

5、 t i g a t et h e m o d u l a t o r ye f f e c to f b i s ( 7 ) - t a e r i n e ，a n o v e l A C h E i n h i b i t o r , O nI K ( K V l ．2 ) ．T h e r e s u l t so b t a i n e df r o mO l i n “ w o r ki d e n t i f i e dt

6、 h a t “ ①a t t e rm i e r o i n j e e t i o no f K v 4 ．2m R N A , t h e d e f o l l i c u l a ro o e y t e sw e r ei n c u b a t e df o r4 8h o u r s , a n d t h e nt h e t r a n s i e n to u t ' w a r d c u r r e

7、n t sw e r er e c o r d e da c c o r d i n gt o as t e p d e p o l a r i 7 = ；n g p r o t o c o l ，w h i l ei no o e y t e si n j e c t e dw i t h K v l ．2 m R N A t h es l o wa n ds u s t a i n e do u t w a r d c u r r

8、e n t s W e l “ er e c o r d e d ．H o w e v e r , 1 1 ．oa n yc u 玎枷w a s o b s e r v e di nc o n t r o lo o c y t e $ i n j e c ：t e dn o t h i n g O rw i t hd dH 2 0 o n l y ．②b i s ( 7 ) - t a e r i n ea n d t a e r i

9、n ei n h i b i t e dK v l ．2e n e o d i n gK c h a n n e l se x p l f e s s e di no o c y t e so f X e n o p u s l a e v i si na m a n n e ro f c o n c e n t r a t i o n - d e p e n d e n c e ．③b i s ( 7 ) - t a e r i n

10、ew a sm O l e p o t e n t t h a nt a c r i n ea b o u t t w oo r d e ro f m a g n i t u d ei ni n h i b i t i n gI K ( K V l ．2 ) ．B i s ( 7 ) - t a e r i n ea n d t a c l t i n ei n h i b i t e dI i q K v l ．2 ) w i t h

11、I C s ov a l u e so f 0 ．2 4 1 i - 0 ．0 6 u Ma n d1 0 2 ．1 = L 2 1 ．5 州r e s p e c t i v e l y ．( Dt h ee f f e c t so fb i s ( 7 ) - t a e r i n ea n dt a I ：r i m O nI - VC U l ' V ef o r I r , 4 K v l ．2 ) d e m o

12、 n s t r a t e dt h a tb i s ( 7 ) - t a e r i n ea n d t a 廿i n es u p p r e s s e d I K ( K V l 2 ．) a ta l lh o l d i n g p o t e n t i a l s , w h i l e t h ec o n d u c t a n c eW a Su n c h a n g e d ．⑤e f f e c t

13、so fb i s ( 7 ) - t a e r i a e a n dt a c r i n e0 1 3 ．s t e a d y - s t a t ea c t i v a t i o no fI r , ．( K v l ．2 ) s h o w e dt h a tt h es t e a d y - s t a t e ：a c t i v a t i o nG U I ^ ，ef o rI K ( K V l ．2 )

14、 ' w a s s h i n e db yb i s ( 7 ) - t a e r i n e a n dt a e r i n et o t h el e f t , a n dt h eh a l fm a x i m a la c t i v a t i o nv o l t a g ed e c r e a s e df r o m - 6 ．6 0 7 a = 1 ．2 2 m Vo f t h ee o n t

15、 r o lt o 一1 6 ．3 7 3 4 d = 1 ．1 2 m Va n d- 1 1 ．I ：L - O ．9 6 5 m Vi nt h ep r e s e n c e o f b i s ( 7 ) - t a e r i n ea n d t a c r i n e ，r e s p e c t i v e l y ．I th a s b e e n i d e n t i f i e di nt h e p r e

16、 s e n t s t u d y t h a tb i s ( 7 ) - t a e r i n ea n d t a e r i n ei n h i b i t e dI K ( K V l ．2 ) m a r k e d l y , w h i l eb i s ( 7 ) - t a e r i n ew a s m O l r e p o t e n t t h a n t l l c l r i l l e ．T h