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1、蛋白質(zhì)是一切生命的物質(zhì)基礎(chǔ),是細(xì)胞的重要組成部分,是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者。而對(duì)蛋白質(zhì)測(cè)定,尤其是對(duì)作為生命標(biāo)志物的蛋白質(zhì)進(jìn)行特異性測(cè)定,在疾病診斷、食品安全等領(lǐng)域中有著廣泛而頻繁的應(yīng)用。而提高蛋白質(zhì)測(cè)定效率,實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定更是可以應(yīng)用到全球疫病防控等重要領(lǐng)域,這對(duì)于社會(huì)、國(guó)家乃至全人類是非常重要的。所以,如何有效完成現(xiàn)場(chǎng)蛋白質(zhì)測(cè)定一直都是國(guó)內(nèi)外研究學(xué)者的關(guān)注熱點(diǎn)。本文查閱和研究了國(guó)內(nèi)外大量參考文獻(xiàn),發(fā)現(xiàn)當(dāng)前蛋白質(zhì)測(cè)定方法因?yàn)榇嬖谝韵聠栴}而
2、無(wú)法實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定:測(cè)定過程耗時(shí)長(zhǎng),每一次測(cè)定需要數(shù)小時(shí)甚至數(shù)天;測(cè)定流程繁瑣,測(cè)定人員需要進(jìn)行專業(yè)技能培訓(xùn);測(cè)定環(huán)境通常要求在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行;測(cè)定成本高。
本研究主要內(nèi)容包括:①在了解蛋白質(zhì)概念與蛋白質(zhì)測(cè)定意義的基礎(chǔ)上,分析了當(dāng)前國(guó)際上常用的蛋白質(zhì)測(cè)定的方法,總結(jié)了目前蛋白質(zhì)測(cè)定所面對(duì)的種種問題,并歸納了當(dāng)前國(guó)內(nèi)外研究人員在蛋白質(zhì)測(cè)定技術(shù)的研究方向,最后確定了基于微流控技術(shù)、光電傳感與檢測(cè)技術(shù)來實(shí)現(xiàn)快速、操作簡(jiǎn)單、低成本、高靈敏的
3、蛋白質(zhì)測(cè)定系統(tǒng)以順利完成現(xiàn)場(chǎng)蛋白質(zhì)測(cè)定的研究目標(biāo)。②設(shè)計(jì)了兩種基于微芯片加工技術(shù)、微粒操控技術(shù)等微流控技術(shù)以及光電傳感與檢測(cè)等技術(shù)的現(xiàn)場(chǎng)蛋白質(zhì)測(cè)定系統(tǒng)的總體方案。對(duì)以下現(xiàn)場(chǎng)微流控蛋白質(zhì)測(cè)定系統(tǒng)的關(guān)鍵技術(shù)、方法與理論展開了深入研究:基于免疫吸附測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理;基于硅片、PDMS、軟光刻等方法制作微流控芯片與通道;基于多種交流動(dòng)電效應(yīng)操控微粒的原理與方法;基于LED誘導(dǎo)熒光的原理與設(shè)計(jì)方法;溶液中電極電阻抗的測(cè)量原理與方法等。③基于交
4、流動(dòng)電效應(yīng)操控微粒的原理與方法以及基于 LED誘導(dǎo)熒光的原理與設(shè)計(jì)方法,提出了一種利用以交流電熱效應(yīng)為主,于流體內(nèi)部在微米尺度范圍內(nèi)制造微小旋渦流以攪動(dòng)局部液體運(yùn)動(dòng)以加速蛋白質(zhì)吸附的機(jī)制,同時(shí)結(jié)合誘導(dǎo)熒光方法,給出了一種交流電熱熒光現(xiàn)場(chǎng)蛋白質(zhì)測(cè)定方案與對(duì)應(yīng)的儀器設(shè)計(jì),首次于國(guó)內(nèi)外實(shí)現(xiàn)了主動(dòng)引導(dǎo)目標(biāo)蛋白質(zhì)往探針蛋白質(zhì)靠攏的現(xiàn)場(chǎng)蛋白質(zhì)檢驗(yàn)方法和系統(tǒng)。④提出了一種利用以介電泳力為主的交流動(dòng)電效應(yīng)來主動(dòng)吸引目標(biāo)蛋白質(zhì)到探針蛋白質(zhì)附近以加速蛋白質(zhì)
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