激光共聚焦顯微鏡_第1頁
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文檔簡介

1、1. 論述激光共聚焦顯微鏡的工作原理,并分析其與普通顯微鏡的區(qū)別?激光共聚焦顯微鏡的工作原理 激光共聚焦顯微鏡的工作原理1)用激光做光源因為激光的單色性非常好,光源波束的 波長相同,從根本上消除了色差。采用點光源照射標(biāo)本,在焦平面上形成一個輪廓分明的小的光點,該點被照射后發(fā)出的熒光被物鏡收集,并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構(gòu)成的分光器。分光器將熒光直接送到探測器。2)采用共聚焦技術(shù)光源和探測器前方都各有一個針孔(照明針孔和探測針孔) 。

2、直徑約 100-200nm;相對于焦平面上的光點,兩者是共軛的,即光點通過一系列的透鏡,最終同時聚焦于照明針孔和探測針孔。這樣,來自焦平面的光,可以會聚在探測孔范圍之內(nèi),而來自焦平面上方或下方的散射光都被擋在探測孔之外而不能成像。3)采用點掃描技術(shù)激光逐點掃描樣品,探測針孔后的光電倍增管也逐點獲得對應(yīng)光點的共聚焦圖像,轉(zhuǎn)為數(shù)字信號傳輸至計算機,最終在屏幕上聚合成清晰的整個焦平面的共聚焦圖像。4)用計算機采集和處理光信號,并利用光電倍增管

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