催化共振散射光譜法測定α-淀粉酶、過氧化氫和葡萄糖.pdf

1、第一部分：緒論 介紹了共振散射技術(shù)理論。綜述了近年來共振散射技術(shù)在分析化學(xué)中的應(yīng)用，介紹了α-淀粉酶、過氧化氫和葡萄糖的分析進展。 第二部分：可溶性淀粉的共振散射光譜研究及其在α-淀粉酶活力測定中的應(yīng)用在0.8mg/ml聚丙烯酰胺(PAM)存在條件下，可獲得較穩(wěn)定的平均粒徑為317nm的淀粉微粒。它在423nm處有一較強的共振散射峰。在50℃，pH為5.3的磷酸鹽緩沖溶液中，淀粉微粒被α-淀粉酶(α-amylase,AM

2、S)催化水解成小分子，導(dǎo)致423nm處共振散射峰強度降低。在選定條件下，AMS酶活力濃度在0.00835～0.501μg/ml(或0.00138-0.0827U/ml)范圍內(nèi)與共振散射強度降低值△I呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為△I=155C+13，相關(guān)系數(shù)R=0.9857。本法應(yīng)用于人體唾液α-淀粉酶活力測定，結(jié)果滿意。 第三部分：HRP酶催化-陽離子表面活性劑締合微粒共振散射光譜法測定痕量過氧化氫在醋酸緩沖溶液中，辣根

3、過氧化物酶(HRP)可以催化H2O2與過量的I-反應(yīng)生成I3-，I3-分別與陽離子表面活性劑TDMBA、DDAC、CTAB、ODC、CPCM、DPC和TBAB等形成締合物微粒TDMBA-I3、DDAC-I3、CTAB-I3、ODC-I3、CPCM-I3、DPC-I3和TBAB-I3，該締合物微粒均在460nm處有一個共振散射峰。過氧化氫的濃度在0.17～172.8、0.432～172.8、1.728～259.2、1.728～86.4、1

4、.728～216、0.864～259.2和0.864～86.4×10-7mol/L范圍內(nèi)分別與各體系在460nm處的共振光譜強度呈線性關(guān)系。其檢出限分別為0.086、0.34、1.72、0.46、0.36、0.64和0.44×10-7mol/L。本法應(yīng)用于過氧化氫測定，結(jié)果滿意。 第四部分：雙酶催化-陽離子表面活性劑締合微粒共振散射光譜法測定痕量葡萄糖在醋酸緩沖溶液中，葡萄糖(G)在葡萄糖氧化酶(GOD)的作用下生成葡糖糖酸和H

5、2O2，HRP可以催化H2O2與過量的I-反應(yīng)生成I3-，I3-分別與陽離子表面活性劑十四烷基芐基二甲基氯化銨(TDMBA)、氯代十六烷基吡啶(CPCM)和十二烷基芐基二甲基氯化銨(DDAC)形成締合物微粒TDMBA-I3、CPCM-I3和DDAC-I3，該締合物微粒分別在460nm、540nm和430nm處有一個共振散射峰。對于TDMBA、CPCM和DDAC體系，葡萄糖的濃度分別在0.2～20×10-7mol/L、0.2～60×10-