白蟻腸道細(xì)菌的多樣性和生物活性研究.pdf

1、白蟻腸道是一個(gè)比較封閉的微環(huán)境，白蟻腸道內(nèi)的共生微生物也具有其獨(dú)特的性質(zhì)，它們可以幫助白蟻分解難消化的木質(zhì)纖維素，產(chǎn)生白蟻生長所必需的刺激代謝產(chǎn)物等。本研究從白蟻腸道內(nèi)微生物的多樣性出發(fā)，利用免培養(yǎng)的高通量測(cè)序技術(shù)和純培養(yǎng)的方法研究白蟻腸道細(xì)菌的多樣性，篩選具有木質(zhì)纖維素分解能力和抗菌活性的菌株。為以后的研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本研究通過高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)白蟻腸道樣品中的細(xì)菌進(jìn)行16SrDNA基因的V4區(qū)進(jìn)行測(cè)序，最終獲得6

2、2404條有效的序列，總共630個(gè)OTUs。鑒定出厚壁菌門（Firmicutes）、擬桿菌門（Bacteroidetes）、變形菌門（Proteobacteria）、放線菌門（Actinobacteria）、螺旋體門（Spirochaetes）等13個(gè)門的細(xì)菌，其中放線菌門占16.95％。
　　本研究通過不同的培養(yǎng)基和分離方法分離白蟻腸道內(nèi)的微生物。一共挑取1458株菌，最后得到放線菌327株，其中包括一個(gè)放線菌目（Actinob

3、acterales），放線菌目下的5個(gè)亞目，分別為：微球菌亞目（Micrococcineae）的4個(gè)科；鏈霉菌亞目（Streptomycineae）的1個(gè)科；棒桿菌亞目（Corynebacterineae）的2個(gè)科；丙酸桿菌亞目（ Propionibacterineae）的1個(gè)科；小單孢菌亞目（Micromonosporineae）的1個(gè)科，總共有10個(gè)科，18個(gè)屬。并且分離到一株新分類單元，通過初步分析，鑒定YIM110061為明串珠

4、菌科（Leuconostocaceae）下的一個(gè)新屬。
　　本研究對(duì)分離得到的菌株篩選長勢(shì)良好的菌株進(jìn)行纖維素酶活和木質(zhì)素酶活的測(cè)定。最終測(cè)量四株菌株的纖維素酶活隨時(shí)間的變化曲線，比較發(fā)現(xiàn) YIM110167分解纖維素的活性整體最好，并在第五天酶活達(dá)到最大值為23.69/ml。本研究測(cè)量菌株的三種木質(zhì)素酶活，分別是：漆酶、過氧化物酶、猛過氧化物酶。其中發(fā)現(xiàn)YIM110063的過氧化物酶活性最高，這株菌株還檢測(cè)到其他兩種酶的活性，后