款冬花中萜類和黃酮類化合物分離技術(shù)研究.pdf

1、款冬花作為重要的中藥材，具有潤肺止咳、化痰平喘等功效，在《本草綱目》、《中國藥典》中均有收錄。以款冬花為原料的中成藥已有1000多種（規(guī)格），如寒喘丸、止咳平喘片等。植物化學研究發(fā)現(xiàn)：其有效成分為萜類組分及黃酮類組分等。其中，款冬酮具有升壓作用，款冬花素和款冬花素內(nèi)酯具有抑制血小板的聚集作用、而款冬花黃酮類組分具有顯著的抗衰老作用。廣泛用于祛咳平喘類中成藥和保健品中。本文建立了基于高速逆流色譜技術(shù)和查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附技術(shù)的分離純

2、化款冬花有效成分的方法。
　　采用離線二維高速逆流色譜技術(shù)分離純化款冬酮等萜類有效成分。采用HPLC技術(shù)測定款冬花石油醚萃取部分主要組分在不同溶劑體系中的濃度，計算分配系數(shù)。實驗在正己烷-正丁醇-乙腈（V/V=10:3:6），溫度25℃，轉(zhuǎn)速為850rpm/min，流速1.5mL/min下，采取正向洗脫，擠壓洗脫等方式，進行一維HSCCC分離，隨后在正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（V/V=8:1:6:3）溫度25℃，轉(zhuǎn)速1000rpm

3、/min，流速1.0mL/min下進行離線二維HSCCC分離，可定向獲得指標性組分款冬酮。同時，也獲得14-去乙酰基-3,14-去氫-1α-(2-甲基丁酸)款冬花素內(nèi)酯和2,2-二甲基-6-乙?；讲⒍溥拎?，純度均達到了90％以上。由此，建立了基于高速逆流色譜技術(shù)對款冬酮的定向、高效地純化方法。
　　利用殼聚糖和硅膠各自的優(yōu)勢，制備了對黃酮類化合物具有良好選擇性的查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附材料。以槲皮素為吸附過程的研究對象，通

4、過等溫吸附實驗，發(fā)現(xiàn)查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對槲皮素的吸附過程為吸熱過程，擬合Langmiur吸附等溫模型，其相關(guān)系數(shù)達到0.995、查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素表現(xiàn)為單層吸附。研究了吸附時間對查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素的影響，實驗結(jié)果顯示，二級吸附動力學方程能更好的描述槲皮素在查耳酮接枝殼聚糖上的吸附行為，查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素的吸附過程可能受多個步驟共同控制；在蘆丁和槲皮素競爭吸附研究發(fā)現(xiàn)，查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對

5、槲皮素具有較高的選擇性，選擇性系數(shù)達到了4.85。對比了查耳酮接枝殼聚糖/硅膠、殼聚糖/硅膠和硅膠吸附槲皮素的能力，結(jié)果顯示：查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對槲皮素的吸附量達到了17.49mg/g，為殼聚糖/硅膠和硅膠吸附量3.84mg/g和1.59mg/g的4.6倍和11.2倍。將制備的查耳酮接枝殼聚糖/硅膠應(yīng)用于款冬花黃酮類化合物的分離純化，在上樣液濃度為5mg/mL，pH值為4，流速為1BV/h的優(yōu)化條件下，進行上樣吸附；在70%EtOH