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文檔簡介
1、蜂膠是自然界中黃酮含量最高、種類最多的物質(zhì),具有廣泛的生物藥理學價值。國內(nèi)因生產(chǎn)技術水平的問題,所得蜂膠產(chǎn)品中總黃酮含量較低,影響出口價格,如何提高蜂膠總黃酮含量是現(xiàn)今急需解決的問題。另外,蜂膠中單體黃酮若能逐個分離,將對有關于黃酮的新藥開發(fā)與研究有著重大的意義。本文主要圍繞蜂膠總黃酮的提取和單體黃酮的分離進行研究。 蜂膠黃酮類含量測定方法研究:比較了AlCl<,3>比色法和NaNO<,2>-Al(NO<,3>)<,3>比色法測
2、定蜂膠總黃酮,研究表明,AlCl<,3>比色法測定蜂膠總黃酮含量更可靠。研究了測定過程中顯色劑濃度、放置溫度及時間等對測定的影響,確立了快速準確測定蜂膠總黃酮的方法,蜂膠中總黃酮與AlCl<,3>絡合形成穩(wěn)定的黃色配合物,在波長420nm處測定顯色吸光度,以蘆丁為標樣,在0~40μg/mL范圍內(nèi),服從比耳定律,回歸方程A=0.0237p-0.0004,r=0.9997。方法的平均加樣回收率達97.8%,相對標準偏差(RSD)為1.6%,
3、檢測限為0.002mg/mL。 樹脂法富集蜂膠總黃酮工藝研究:1)醇提水沉法制備蜂膠乙醇水溶液作為樹脂法富集蜂膠總黃酮的樣品液。通過單因素及正交實驗探討了蜂膠水溶液制備條件對總黃酮得率的影響,結(jié)果顯示影響總黃酮得率的因素主次順序為加水量>乙醇中溶解的蜂膠量>溫度>時間。2)通過合成不同物理、化學性能的大孔樹脂研究樹脂骨架結(jié)構、比表面積、孔徑對吸附蜂膠總黃酮的影響。研究發(fā)現(xiàn)極性共聚單體(甲基丙烯酸甲酯或丙烯酰胺)的加入、較大的比表
4、面積和孔徑對吸附總黃酮都有利。合成富集總黃酮條件較優(yōu)的樹脂(2%丙烯酰胺共聚單體、比表面積700m<'2>/g,孔徑14nm的大孔苯乙烯樹脂)對蜂膠總黃酮工藝進行研究,得出大孔樹脂法富集蜂膠總黃酮的條件:35℃下靜態(tài)吸附5h,動態(tài)洗脫時75%(v/v)乙醇為最佳洗脫劑,7Bv用量即能洗脫90%以上吸附在柱上的總黃酮。最終產(chǎn)物的總黃酮含量為36~38%,相對于未經(jīng)樹脂法處理的蜂膠中25%左右的總黃酮含量有較大提高,總回收率70%以上。
5、 黃酮單體分離研究:1)通過pH梯度萃取法分離了蜂膠中酸性不同的7,4′-二羥基類黃酮和7-羥基類黃酮。研究了酸化pH對最終產(chǎn)物中黃酮單體含量及回收率的影響。最終分別得產(chǎn)物1(主要含蘆丁11.8%、楊梅素12.7%、槲皮素17.7%和芹菜素3.9%)、產(chǎn)物2(柯因16.1%、高良姜素12.4%)、產(chǎn)物3(松屬素15.3%),相對于未經(jīng)分離的乙醇提取蜂膠中這幾種單體黃酮含量提高了2~13倍不等。2)通過硅膠薄層層析研究了硅膠處理條件及
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