三葉委陵菜中黃酮類化合物成分的研究.pdf

1、三子葉植物綱原始花被亞綱委陵菜屬植物三葉委陵菜(Protentilla freynianaBornm)或是其變種中華三葉委陵菜為多年生草本植物，分布于華東，華中，西南地區(qū)的山坡草地，具有清熱解毒之功效，民間以其根莖或全草入藥。但遺憾的是迄今為止三葉委陵菜尚未被作為一種中藥材為中國藥典(2000年)或各地地方標(biāo)準(zhǔn)所收錄，亦少見國內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分以及生物活性的研究報(bào)道。本文研究了微波輔助提取三葉委陵菜的方法和工藝，大孔吸附樹脂分離純化三葉委

2、陵菜中黃酮類化合物的最佳條件，采用高效液相色譜-質(zhì)譜儀分析了三葉委陵菜中黃酮類化合物的成分和含量，從五個(gè)方面測(cè)定了三葉委陵菜中黃酮類化合物的抗氧化性和清除自由基的能力。
　　 課題對(duì)三葉委陵菜的研究包括四個(gè)部分：
　　 (1)研究了三葉委陵菜中黃酮類物質(zhì)的微波提取工藝，采用微波輔助水蒸氣蒸餾法提取三葉委陵菜黃酮，單因素試驗(yàn)考察乙醇濃度、微波功率、提取時(shí)間、回流溫度、料液比對(duì)三葉委陵菜黃酮提取率的影響，確定了微波萃取儀提取

3、三葉委陵菜黃酮的最佳工藝條件為：以75％乙醇作溶劑，在料液比為1:25，溫度70℃，功率400W的條件下微波提取5min，效果最好，提取率為4.24％。
　　 (2)以三葉委陵菜黃酮的吸附率、解析率為指標(biāo)，考察了六種大孔吸附樹脂對(duì)三葉委陵菜中總黃酮的分離純化性能，篩選出最佳的大孔吸附樹脂，同時(shí)采用高效液相色譜法進(jìn)行分析檢測(cè)表征了分離純化的效果；分析了原液濃度、pH和樹脂用量以及洗脫劑濃度和pH對(duì)吸附解析的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大孔

4、吸附樹脂D101對(duì)三葉委陵菜總黃酮有很好的吸附和解析性能，并確定了合適的吸附解析條件為：吸附液濃度為2.0mg/mL、pH=6、樹脂用量與吸附液量比(g.mL-1)為1:30；平衡濃度達(dá)0.36 mg/mL時(shí)，即樹脂已達(dá)到吸附飽和，飽和吸附量為49.1mg/g干樹脂；洗脫劑乙醇濃度為50％，pH=6。
　　 (3)利用了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析法來分析并測(cè)定三葉委陵菜黃酮中的生物活性物質(zhì)的成分和含量，最終確定了7種主要成分，它

5、們分別是表兒茶素，二苯乙烯苷，牡荊素，金絲桃苷，蘆丁，淫羊藿苷和斛皮苷，同時(shí)利用外標(biāo)法確定了其含量分別為73.02mg/g，14.53mg/g，15.05mg/g，12.51mg/g，160.35mg/g，27.10mg/g和144.52mg/g；同時(shí)根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)信息推斷出了兩種成分，其分別為橙皮苷和槲皮素-3-蕓香糖鼠李糖苷。
　　 (4)從總體抗氧化能力、對(duì)Fe2+誘發(fā)卵黃脂蛋白PUFA過氧化體系的抑制能力、清除羥基自由基能