甘油二酯激酶ζ、蛋白激酶Cδ和Tis21在發(fā)育中大鼠腦的表達(dá)和定位.pdf

1、目的：
　　探討甘油二酯激酶ζ（DGKζ）、蛋白激酶Cδ（PKCδ）和Tis21在大鼠胚胎腦的時(shí)空表達(dá)模式以及與腦發(fā)育的關(guān)系。
　　方法：
　　胚齡E9.5-E18.5大鼠胚胎各5只，連續(xù)切片用于免疫組織化學(xué)方法檢測DGKζ、p-PKCδ和Tis21在大鼠胚胎腦的表達(dá)；22只胚齡E11.5、E12.5、E14.5、E16.5和E18.5的大鼠胚胎用于Western blotting，檢測DGKζ、p-PKCδ、PKCδ

2、和Tis21在大鼠胚胎腦組織的表達(dá)，成鼠的腦組織作為陽性對照。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組織化學(xué)顯示，E9.5，p-PKCδ和Tis21在神經(jīng)溝的神經(jīng)上皮呈陽性表達(dá)，而DGKζ為陰性表達(dá)；E10.5-E11.5，DGKζ、p-PKCδ和Tis21在腦泡壁均呈陽性表達(dá)；E12.5，三者均表達(dá)于端腦、間腦、中腦腹側(cè)和腦橋處的神經(jīng)上皮，而在中腦背側(cè)、峽部和小腦原基處僅DGKζ呈陽性表達(dá)，p-PKCδ和Tis21呈陰性表達(dá)；E13.

3、5，三者沿海馬、隔、蒼白球及嗅腦呈陽性分布，在新皮質(zhì)呈陰性表達(dá)，p-PKCδ和Tis21在峽部和小腦原基出現(xiàn)陽性表達(dá)；E14.5，DGKζ的表達(dá)延伸到新皮質(zhì)和脈絡(luò)叢，在腦的各個(gè)區(qū)域呈現(xiàn)出全陽性。而p-PKCδ和Tis21的陽性表達(dá)僅延伸到中腦頂蓋和脈絡(luò)叢，在新皮質(zhì)仍為陰性表達(dá)；E15.5，p-PKCδ和Tis21在新皮質(zhì)出現(xiàn)陽性表達(dá),在腦的各個(gè)區(qū)域均呈陽性；E16.5-E18.5，三者在小腦和腦橋表達(dá)范圍縮??；DGKζ和p-PKCδ可表

4、達(dá)在神經(jīng)上皮細(xì)胞的胞漿，或胞漿和細(xì)胞核。
　　2.蛋白免疫印跡結(jié)果顯示，DGKζ和Tis21在E11.5-E14.5表達(dá)逐漸增多，E12.5較E11.5顯著增多，在E16.5和E18.5逐漸下降；p-PKCδ/PKCδ顯示PKCδ活性變化趨勢與DGKζ和Tis21表達(dá)趨勢一致。
　　結(jié)論：
　　1.DGKζ、p-PKCδ和Tis21的時(shí)空表達(dá)與腦的發(fā)育模式一致，DGKζ與p-PKCδ和Tis21的時(shí)空表達(dá)模式略有差異，