LncRNA PANDA通過抑制細(xì)胞凋亡調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過程.pdf

1、【背景】：
　　動(dòng)脈粥樣硬化是威脅人類生存的常見疾病之一，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程的重要生物學(xué)過程，而p53同樣參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和進(jìn)展。此外人類基因組中約98％為非編碼RNA（ncRNA），且已被證實(shí)參與微觀調(diào)控疾病的發(fā)生發(fā)展，但是在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中具體并不清晰。動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過程中發(fā)生DNA損傷，有研究表明lncRNA PANDA在DNA損傷時(shí)，可通過p53依賴信號(hào)通路激活進(jìn)一步抑制凋亡，

2、促進(jìn)細(xì)胞生存。基于以上背景，我們旨在研究PANDA是否參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過程和其在心血管疾病中的可能作用機(jī)制，進(jìn)一步了解lncRNA的作用。
　　【方法】：
　　抽取44例冠狀動(dòng)脈造影確診的冠狀動(dòng)脈狹窄>50%冠心病患者(atherosclerosis group)，性別不限，排除高血壓、糖尿病等血管相關(guān)性疾病，其中14例為急性心肌梗死患者，以及52例對(duì)照志愿組(NC group)外周血，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)外周血

3、單個(gè)核細(xì)胞中長鏈非編碼基因PANDA和BCL-2的表達(dá)水平。在內(nèi)皮細(xì)胞模型中，通過RNA干擾技術(shù)對(duì)PANDA基因進(jìn)行沉默，細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、轉(zhuǎn)染試劑組、siRNA干擾組。通過流式細(xì)胞學(xué)和hochest33258核染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平，EdU和CCK8方法檢測(cè)細(xì)胞增殖水平。
　　【結(jié)果】：
　　RT-qPCR結(jié)果提示所有的冠心病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中PANDA和BCL-2的表達(dá)高于對(duì)照組。而在冠心病組中，急性心?；颊?/p>

4、中PANDA和BCL-2的表達(dá)明顯高于非急性心梗患者。在內(nèi)皮細(xì)胞模型中，通過對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行PANDA基因沉默后，PCR結(jié)果表明PANDA表達(dá)明顯受到抑制，EdU實(shí)驗(yàn)和CCK8均發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖水平下降，通過流式細(xì)胞術(shù)和hochest33258核染色法發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡水平增高。
　　【結(jié)論】：
　　在動(dòng)脈粥樣硬化患者中，PANDA和BCL-2表達(dá)明顯升高，內(nèi)皮細(xì)胞中進(jìn)行siPANDA
　　發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖水平受到抑制，凋亡水平升