妊娠期糖尿病對(duì)子代行為的影響及機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：
　　研究妊娠期糖尿病對(duì)子代行為的影響，并初步探討其可能機(jī)制。
　　方法：
　　給予懷孕第三天大鼠尾靜脈注射鏈脲佐菌素(STZ40 mg/kg)建立大鼠妊娠期糖尿病(GDM)模型，給藥后第3天測(cè)孕鼠空腹血糖，血糖大于11.1 mmol/L則為造模成功者。一部分孕鼠正常生產(chǎn)，分別測(cè)子代2月齡、4月齡及10月齡的行為學(xué)指標(biāo)，收取腦組織前額葉皮層(PFC)分別以WesternBlot法、qPCR法及免疫組織化學(xué)檢測(cè)5-

2、HT1A受體表達(dá)量變化;一部分孕鼠在孕21天開腹取胎鼠分別稱量其腦重及體重以分析其相應(yīng)的發(fā)育狀態(tài)、檢測(cè)發(fā)育相關(guān)的生物學(xué)指標(biāo)；另一部分孕鼠第18天取胎鼠胎腦皮層培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞，分別給25 mM、50 mM、100 mM葡萄糖和50μM、125μM、250μM H2O2處理24小時(shí)后檢測(cè)細(xì)胞活力；對(duì)原代神經(jīng)元細(xì)胞給50 mM葡萄糖、0.5 mM維生素C處理，檢測(cè)ROS產(chǎn)生量。
　　結(jié)果：
　　大鼠行為學(xué)測(cè)試結(jié)果顯示，黑白箱實(shí)驗(yàn)中

3、在10月齡ODM組黑箱所處時(shí)間較OCM組變長(zhǎng)(P<0.05)、穿梭次數(shù)減少(P<0.05)，2月齡和4月齡時(shí)黑箱所處時(shí)間與穿梭次數(shù)在兩組之間并無(wú)顯著差異(P>0.05)；曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)在4月齡和10月齡時(shí)ODM組較OCM組中間區(qū)域所待時(shí)間、運(yùn)動(dòng)路程以及10 min內(nèi)在測(cè)試箱運(yùn)動(dòng)總路程較OCM組減少(P<0.05)，而2月齡時(shí)兩組并無(wú)顯著差異(P>0.05)；高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中4月齡、10月齡時(shí)ODM組較OCM組進(jìn)入開放臂的時(shí)間和次數(shù)都明顯減少

4、(P<0.05)，2月齡時(shí) ODM組較 OCM組僅是進(jìn)入開放臂的次數(shù)減少(P<0.05)、進(jìn)入開放臂的時(shí)間兩組并無(wú)顯著性差異(P>0.05)。對(duì)孕21天胎鼠生長(zhǎng)狀態(tài)分析發(fā)現(xiàn)：GDM胎鼠體重和腦重都比正常對(duì)照組輕(P<0.05)而腦重系數(shù)并無(wú)顯著性差異(P>0.05)；GDM胎鼠發(fā)育相關(guān)生物因子胰島素、BDNF表達(dá)量都下降(P<0.05)。Western Bloting、qPCR及免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示在10月齡時(shí)ODM組腦前額葉皮層組織5

5、-HT1A受體表達(dá)量較OCM組低。原代神經(jīng)元細(xì)胞在50 mM葡萄糖刺激后ROS的產(chǎn)生量明顯比正常組大，而給與0.5 mM VC后此明顯改善,在25 mM、50 mM、100 mM葡萄糖處理下，GDM胎鼠神經(jīng)元死亡較對(duì)照組明顯(P<0.05)；及250μM H2O2處理后GDM胎鼠神經(jīng)元死亡較對(duì)照組明顯(P<0.05)而在50μM、125μM H2O2條件下GDM胎鼠神經(jīng)元死亡與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：