肥胖狀態(tài)下牙周感染對(duì)小鼠牙周組織和脾臟組織中B-1a細(xì)胞的影響.pdf

1、動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，B-1a細(xì)胞能在感染性炎癥或慢性炎癥疾病的固有免疫機(jī)制中起到保護(hù)作用，它能在病毒或細(xì)菌入侵的早期快速清除感染源。牙周炎與肥胖，可分別引起局部感染性炎癥與全身慢性炎癥狀態(tài)，二者相關(guān)聯(lián)的流行病學(xué)報(bào)道很多，但是它們之間的免疫機(jī)制還尚不明了。本研究建立肥胖復(fù)合牙周炎小鼠模型，基于B-1a細(xì)胞存在牙周病損局部和肥胖與牙周炎相關(guān)聯(lián)的理論基礎(chǔ)，對(duì)B-1a細(xì)胞在肥胖和牙周炎兩種炎癥狀態(tài)中發(fā)揮的病理機(jī)制進(jìn)行探索。
　　第一章 肥胖狀態(tài)

2、下牙周感染對(duì)小鼠牙周組織中B-1a細(xì)胞的影響
　　目的：
　　本章主要探討肥胖狀態(tài)下牙周感染對(duì)小鼠牙周組織中B-1a細(xì)胞的表達(dá)水平及功能的影響，分析肥胖伴牙周感染小鼠牙周組織中B-1a細(xì)胞膜表面特異性蛋白CD5，及B-1a細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-10(IL-10)炎癥因子和抗Ⅰ膠原抗體（抗COLⅠ抗體）的蛋白和mRNA表達(dá)變化。
　　方法：
　　動(dòng)物模型分組：將24只小鼠隨機(jī)分成兩組，每組各12只。其中一組喂以高脂

3、飼料，為肥胖組(high fat diet，HF)，另一組喂以低脂飼料，為正常體重組(low fat diet，LF)。飼料誘導(dǎo)30周后，分別從肥胖組和正常體重組中隨機(jī)抽取6只做牙周真性結(jié)扎處理(periodontitis，P)，每組剩余的6只做假性結(jié)扎處理(control，C)，結(jié)扎處理5天，隨即產(chǎn)生牙周炎組(LFP組)、正常體重對(duì)照組（LFC組）、肥胖組(HFC組)、肥胖復(fù)合牙周炎組(HFP組)。
　　免疫組化染色定量分析和實(shí)

4、時(shí)定量PCR基因水平檢測(cè)：通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR和免疫組化染色方法對(duì)牙周組織中CD5、抗COLⅠ抗體、IL-10的蛋白和mRNA表達(dá)水平進(jìn)行定量檢測(cè)。
　　牙周組織中CD5、抗COLⅠ抗體、IL-10的表達(dá)水平分別與體重和牙周組織浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性分析：小鼠稱重;牙周組織HE染色后對(duì)浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞定量計(jì)數(shù);將體重、炎癥細(xì)胞數(shù)與三種蛋白之間進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　　牙周組織中B-1a細(xì)胞的mR

5、NA及蛋白的表達(dá)水平：B-1a細(xì)胞相關(guān)三種蛋白的牙周炎主效應(yīng)均有顯著性，牙周炎組中的IL-10、CD5、抗COLⅠ抗體的mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組(P＜0.001)。
　　肥胖和牙周炎對(duì)牙周組織中B-1a細(xì)胞功能的影響：CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達(dá)水平與炎癥細(xì)胞數(shù)之間均呈顯著正相關(guān)性(r＞0，P＜0.001);但三者與體重之間的相關(guān)性均不顯著(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　B-1a細(xì)胞在

6、牙周炎癥早期表達(dá)上調(diào)，所分泌的抗COLⅠ抗體可以抵御細(xì)菌初期對(duì)牙周組織的破壞。但肥胖并未對(duì)炎性牙周組織中B-1a細(xì)胞的表達(dá)水平及功能產(chǎn)生顯著性影響。
　　第二章 肥胖狀態(tài)下牙周感染對(duì)小鼠脾臟組織中B-1a細(xì)胞的影響.
　　目的：
　　本章主要探討肥胖狀態(tài)下牙周感染對(duì)小鼠脾臟組織中B-1a細(xì)胞表達(dá)水平及功能的影響，分析肥胖伴牙周感染小鼠脾臟組織中B-1a細(xì)胞膜表面特異性蛋白CD5，及B-1a細(xì)胞分泌的抗COLⅠ抗體和IL

7、-10炎癥因子的蛋白表達(dá)變化。
　　方法：
　　蛋白質(zhì)印跡定量分析：用蛋白質(zhì)印跡方法對(duì)脾臟組織中CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達(dá)水平進(jìn)行定量檢測(cè)。
　　將脾臟組織中CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的表達(dá)水平分別與體重和牙周組織浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞數(shù)之間進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　　脾臟組織中B-1a細(xì)胞的表達(dá)水平：B-1a細(xì)胞相關(guān)三種蛋白的肥胖主效應(yīng)均有顯著性，肥胖組中的CD5、I

8、L-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達(dá)水平均顯著高于正常體重組(P＜0.001)。
　　肥胖和牙周炎對(duì)脾臟組織中B-1a細(xì)胞功能的影響：CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達(dá)水平與體重之間均呈顯著正相關(guān)性（r＞0，P＜0.001），但三者與牙齦炎癥細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性均不顯著(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　B-1a細(xì)胞在肥胖機(jī)體內(nèi)表達(dá)上調(diào)，但其發(fā)揮的功能尚不明確。牙周感染并未對(duì)肥胖機(jī)體脾臟組織中B-1a細(xì)胞的表達(dá)產(chǎn)