孟魯司特鈉經(jīng)直腸、鼻腔給藥的吸收及促進(jìn)劑對(duì)吸收影響的研究.pdf

1、研究目的：
　　哮喘作為一種常見(jiàn)的變態(tài)反應(yīng)，誘發(fā)因素眾多。臨床治療哮喘通常是使用長(zhǎng)效吸入型β2受體激動(dòng)劑(LABA)和吸入型糖皮質(zhì)激素(ICS)，茶堿類，抗膽堿類藥物等。采用呼吸道吸入，或是口服給藥的形式。我國(guó)的哮喘發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，且兒童的患病率高于成年人。而我們國(guó)家兒童人數(shù)大，且兒童越來(lái)越受到重視，因此關(guān)注兒童給藥制劑成為一種趨勢(shì)，國(guó)家近年來(lái)為兒童用藥出臺(tái)相關(guān)文件，越來(lái)越多的企業(yè)會(huì)生產(chǎn)適合兒童使用的藥物劑型，兒童用藥將會(huì)得到支

2、持和普及。目前兒童常用劑型有：分散片、咀嚼片、泡騰制劑、顆粒劑等，但不宜于嬰幼兒吞咽且依從性差。
　　孟魯司特鈉作為抗哮喘藥物，常用的給藥劑型為片劑、顆粒劑等口服制劑，尚無(wú)通過(guò)直腸、鼻腔給藥的制劑。結(jié)合直腸、鼻腔給藥部位的藥物吸收特點(diǎn)，制備孟魯司特鈉的直腸、鼻腔給藥劑型，有可能達(dá)到快速緩解哮喘癥狀的治療效果;本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖且造o脈注射為對(duì)照，考察孟魯司特鈉經(jīng)直腸和鼻腔的吸收情況，為直腸、鼻腔給藥劑型提供依據(jù)。
　　研究方法：

3、r>　　第一部分:孟魯司特鈉血藥濃度測(cè)定方法的建立
　　實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法和熒光檢測(cè)建立孟魯司特鈉家兔體內(nèi)血藥濃度測(cè)定方法，對(duì)該測(cè)定方法的精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性等進(jìn)行考察，評(píng)價(jià)該方法的可行性，為實(shí)驗(yàn)后期提供依據(jù)。孟魯司特鈉對(duì)照品用甲醇溶解、稀釋成系列標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液、再用空白血漿稀釋成系列標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液后，按擬定的血漿樣品處理方式及色譜條件進(jìn)行分析測(cè)定，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，在設(shè)定的最低定量限、低、中、高四個(gè)濃度制備血漿樣品

4、并處理測(cè)定，對(duì)方法的精密度、回收率、穩(wěn)定性等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià).
　　第二部分:孟魯司特鈉經(jīng)直腸、鼻腔給藥的生物利用度考察
　　選取禁食24小時(shí)的家兔，以靜注給藥途徑作為對(duì)照，進(jìn)行孟魯司特鈉經(jīng)直腸、鼻腔給藥的絕對(duì)生物利用度考察。孟魯司特鈉按50mg/kg、10mg/kg的劑量對(duì)家兔進(jìn)行直腸、鼻腔給藥。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在給藥后0.17、0.33、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00h和1、3、5、10、20、30

5、、45、60、90、120、180分鐘時(shí)間點(diǎn)經(jīng)耳緣靜脈取血，按確定的孟魯司特鈉血藥濃度測(cè)定方式測(cè)定其濃度，得出血藥濃度曲線并使用藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件DAS3.1.6進(jìn)行分析，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，由公式F直=AUC直腸/AUC靜脈、F鼻=AUC鼻腔/AUC靜脈計(jì)算絕對(duì)生物利用度。
　　第三部分:不同類型促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉經(jīng)直腸給藥吸收影響的研究
　　根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選取癸酸鈉、吐溫-80、月桂酸鈉、膽酸鈉、L-精氨酸、月桂氮卓酮、E

6、DTA-2NA、鹽酸氯丙嗪8種吸收促進(jìn)劑，與孟魯司特鈉制成灌腸液，按50mg/kg的劑量對(duì)禁食24小時(shí)的家兔進(jìn)行直腸給藥。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在給藥后的0.17、0.33、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00h時(shí)間點(diǎn)經(jīng)耳緣靜脈取血，按確定的孟魯司特鈉血藥濃度測(cè)定方式測(cè)定其濃度，每個(gè)濃度使用5只家兔平行測(cè)定，得出血藥濃度曲線并使用藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件DAS3.1.6進(jìn)行分析，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，對(duì)促進(jìn)劑的促吸收作用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

7、
　　第四部分:不同類型促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉經(jīng)鼻腔給藥吸收影響的研究
　　選取吐溫-80、膽酸鈉、癸酸鈉3種不同類型吸收促進(jìn)劑，與孟魯司特鈉制成滴鼻液，按10mg/kg的劑量對(duì)禁食24小時(shí)的家兔進(jìn)行鼻腔給藥。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在給藥后的1、3、5、10、20、30、45、60、90、120、180分鐘時(shí)間點(diǎn)經(jīng)耳緣靜脈取血，按確定的孟魯司特鈉血藥濃度測(cè)定方式測(cè)定其濃度，每個(gè)濃度使用5只家兔平行測(cè)定，得出血藥濃度曲線并使用藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)統(tǒng)

8、計(jì)軟件DAS3.1.6進(jìn)行分析計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，對(duì)促進(jìn)劑的促吸收作用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　研究結(jié)果：
　　第一部分:孟魯司特鈉血藥濃度測(cè)定方法的建立
　　1.1.標(biāo)準(zhǔn)曲線：孟魯司特鈉在0.1～10μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998。
　　1.2.精密度
　　日內(nèi)精密度：在定量下限、低、中、高濃度為0.1、0.2、1、8μg/mL時(shí)，RSD分別是7.70％、5.05％、1.97％、3.65％。<

9、br>　　日間精密度：在定量下限、低、中、高濃度為0.1、0.2、1、8μg/mL時(shí)，RSD分別是7.40％、5.51％、3.63％、4.66％。
　　結(jié)果表明，方法重現(xiàn)性良好，滿足實(shí)驗(yàn)要求。
　　1.3.回收率
　　方法回收率：在定量下限、低、中、高濃度為0.1、0.2、1、8μg/mL時(shí)，RSD分別是8.86％、4.94％、2.71％、2.72％。
　　絕對(duì)回收率：在低、中、高濃度為0.2、1、8μg/mL時(shí)

10、，SD分別是2.66％、1.51％、5.33％
　　結(jié)果表明，方法的靈敏度、準(zhǔn)確度滿足實(shí)驗(yàn)要求。
　　第二部分:孟魯司特鈉經(jīng)直腸、鼻腔給藥的生物利用度考察
　　孟魯司特鈉按50mg/kg的劑量直腸給藥后的Tmax為0.33h，Cmax為0.92mg/L，絕對(duì)生物利用度為0.51％;75mg/ml孟魯司特鈉鼻腔給藥后，Tmax為0.75h，Cmax為0.39mg/L，絕對(duì)生物利用度為3.23％。
　　結(jié)果：表明孟魯

11、司特鈉本身可通過(guò)直腸、鼻腔進(jìn)行吸收，但生物利用度低，直腸、鼻腔為該藥物的非良好吸收部位;經(jīng)直腸、鼻腔給藥的Tmax遠(yuǎn)小于資料報(bào)道的孟魯司特鈉口服后Tmax3h，表明孟魯司特鈉經(jīng)直腸和鼻腔吸收迅速。
　　第三部分:不同類型促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉經(jīng)直腸給藥吸收影響的研究
　　在不同濃度促進(jìn)劑作用下，孟魯司特鈉按50mg/kg的劑量直腸給藥后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及絕對(duì)生物利用度為：
　　3.1.癸酸鈉在濃度為1％時(shí)孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利

12、用度是3.01％，是未加吸收促進(jìn)劑的5.9倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是2.49h、1h、3.46mg/L、10.62mg/L*h。促進(jìn)效果和該促進(jìn)劑使用濃度有關(guān)：1％＞0.5％＞0.2％。
　　3.2.吐溫-80在濃度為10％時(shí)孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是5.28％，是未加吸收促進(jìn)劑的10.4倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是1.38h、1h、6.18mg/h、18.62mg/L*h。促進(jìn)

13、效果和該促進(jìn)劑使用濃度有關(guān)：10％＞5％＞15％。
　　3.3.月桂氮卓酮在濃度為4％時(shí)孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是2.33％，是未加吸收促進(jìn)劑的4.6倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是4.98h、1h、2.30mg/L、8.22mg/L*h。促進(jìn)效果和該促進(jìn)劑使用濃度有關(guān)：4％＞2％＞10％。
　　3.4.膽酸鈉在濃度為0.2％時(shí)孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是2.12％，是未加吸收促進(jìn)劑的4.15倍，T1/

14、2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是2.36h、0.5h、2.30mg/L、7.48mg/L*h。促進(jìn)效果和該促進(jìn)劑使用濃度有關(guān)：0.2％＞0.5％＞0.1％。
　　第四部分:不同類型促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉經(jīng)鼻腔給藥吸收影響的研究
　　在孟魯司特鈉給藥劑量為10mg/kg時(shí)，不同促進(jìn)劑作用下孟魯司特鈉的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與絕對(duì)生物利用度為：
　　4.1.癸酸鈉在濃度為1％時(shí)，孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是7.4％，是未加吸收促

15、進(jìn)劑的2.3倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是8.08h、3h、0.60mg/L、1.39mg/L*h。
　　4.2.膽酸鈉在濃度為1％時(shí)，孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是4.4％，是未加吸收促進(jìn)劑的1.4倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是1.07h、0.5h、0.82mg/L、0.82mg/L*h。
　　4.3.吐溫-80在濃度為5％時(shí)，孟魯司特鈉的絕對(duì)生物利用度是5.3％，是未加吸收促進(jìn)劑

16、的1.7倍，T1/2、Tmax、Cmax、AUC0-t分別是3.25h、0.75h、0.55mg/L、1.00mg/L*h。
　　結(jié)果：表明，上述促進(jìn)劑均能提高孟魯司特鈉在鼻腔的吸收，但促進(jìn)效果不明顯。
　　研究結(jié)論：
　　1.所建立測(cè)定孟魯司特鈉在家兔體內(nèi)血藥濃度的HPLC檢測(cè)方法，其線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性等滿足實(shí)驗(yàn)要求。
　　2.孟魯司特鈉能夠經(jīng)直腸和鼻腔吸收，但生物利用度較低，表明直腸和鼻腔不是該

17、藥物的良好吸收部位。
　　3.所考察的8種直腸吸收促進(jìn)劑均能促進(jìn)孟魯司特鈉的直腸吸收，促進(jìn)劑的作用與使用濃度有關(guān)，大多隨濃度的增加而提高;不同促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉直腸吸收促進(jìn)作用為：10％吐溫-80＞1％癸酸鈉＞0.2％膽酸鈉＞4％月桂氮卓酮＞3％月桂酸鈉＞1.5％L-精氨酸，2％鹽酸氯丙嗪與1％EDTA-2Na效果相近。所考察的吸收促進(jìn)劑對(duì)孟魯司特鈉生物利用度提高不夠理想，需進(jìn)一步的考察與篩選。然而，孟魯司特鈉灌腸液直腸給藥后的T