面神經(jīng)切除后運(yùn)動皮層面區(qū)與合谷穴區(qū)神經(jīng)投射研究.pdf

1、目的:
　　通過切除面神經(jīng)干，運(yùn)用運(yùn)動皮層皮層內(nèi)電刺激和神經(jīng)示蹤方法，研究大鼠和恒河猴面區(qū)與合谷穴區(qū)的功能重組及其結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，探討病理狀態(tài)下“面口合谷收”的經(jīng)脈特異性聯(lián)系的生物學(xué)機(jī)制。
　　方法:
　　首先為了摸索面區(qū)傳出通路神經(jīng)投射情況和觀察精細(xì)神經(jīng)結(jié)構(gòu)的最佳條件，先對神經(jīng)示蹤技術(shù)在面區(qū)傳出通路的應(yīng)用作前期研究。選取17只成年雄性大鼠為研究對象，在丘腦腹后內(nèi)側(cè)核壓力注射高分子量生物素化葡聚糖胺，觀察丘腦至皮層，皮層至丘

2、腦通路順行和逆行的示蹤效果，并探討其示蹤效果與注射后動物存活時(shí)長的關(guān)系，從而了解其神經(jīng)示蹤特性。
　　然后把神經(jīng)示蹤技術(shù)運(yùn)用在大鼠實(shí)驗(yàn)。選取10只大鼠，5只大鼠為模型組，5只為空白對照組。予模型組大鼠面神經(jīng)干切除，20至30天后，進(jìn)行運(yùn)動皮層皮層內(nèi)電刺激，繪制大鼠運(yùn)動皮層軀體定位圖，并與對照組作對比分析。皮層內(nèi)電刺激結(jié)束后，分別在運(yùn)動皮層面區(qū)注射生物素化葡聚糖胺，在運(yùn)動皮層手區(qū)注射霍亂毒素B亞單位。7天后予灌流取腦，進(jìn)行形態(tài)學(xué)研究

3、，觀察運(yùn)動皮層面區(qū)手區(qū)神經(jīng)元、神經(jīng)纖維的標(biāo)記情況及皮層之間的投射情況，比較兩組單位面積內(nèi)單根軸突上膨體數(shù)。
　　在前兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的研究基礎(chǔ)上，最后在恒河猴上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選取4只恒河猴，兩只為模型組，兩只為空白對照組。予模型組兩只恒河猴進(jìn)行面神經(jīng)干切除，一只造模時(shí)長為一年，一只造模時(shí)長為1個(gè)月。分別對四只恒河猴進(jìn)行運(yùn)動皮層皮層內(nèi)電刺激，繪制恒河猴運(yùn)動皮層軀體定位圖。皮層內(nèi)電刺激結(jié)束后，分別在運(yùn)動皮層面區(qū)注射生物素化葡聚糖胺，在運(yùn)動皮層合谷

4、穴區(qū)注射霍亂毒素B亞單位。7至10天后灌流取腦和脊髓進(jìn)行形態(tài)學(xué)研究。主要觀察運(yùn)動皮層面區(qū)與合谷穴區(qū)、脊髓的神經(jīng)元、神經(jīng)纖維的標(biāo)記情況及面神經(jīng)核中神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)。
　　結(jié)果:
　　1.研究發(fā)現(xiàn)高分子量生物素化葡聚糖胺是一種靈敏的雙向示蹤劑，在最佳的存活期可以展現(xiàn)出精細(xì)的神經(jīng)元、樹突、軸突的形態(tài)。高分子量生物素化葡聚糖胺在丘腦-皮層投射通路和皮層-丘腦投射通路的最佳存活期是十天。另外其結(jié)合熒光染料鏈霉親和素-Alex

5、a Fluor594在激光掃描共聚焦顯微鏡下可以展現(xiàn)細(xì)致清楚的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，比ABC染色法好。
　　2.大鼠面神經(jīng)干切除后，進(jìn)行皮層內(nèi)電刺激，兩組總記錄點(diǎn)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩組手區(qū)記錄點(diǎn)在軀體定位圖X軸分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），手區(qū)向面區(qū)擴(kuò)展。比較兩組軸突單位面積內(nèi)單根軸突上膨體數(shù)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，模型組軸突上的膨體密度比對照組少。運(yùn)動皮層與同側(cè)感覺皮層、對側(cè)運(yùn)動皮層、對側(cè)感覺皮層存在相互

6、投射關(guān)系。
　　3.恒河猴面神經(jīng)干切除后，進(jìn)行沿中央溝運(yùn)動皮層皮層內(nèi)電刺激，發(fā)現(xiàn)合谷穴區(qū)向面區(qū)擴(kuò)展。面神經(jīng)切除1月恒河猴運(yùn)動皮層膨體稀疏。通過觀察面神經(jīng)核神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)切除面神經(jīng)干后患側(cè)面神經(jīng)核神經(jīng)元出現(xiàn)病理變化，星形膠質(zhì)細(xì)胞增多，考慮造模后患側(cè)面神經(jīng)核發(fā)生退行性病變。
　　結(jié)論:
　　面神經(jīng)干切除后，大鼠和恒河猴運(yùn)動皮層合谷穴區(qū)向面區(qū)擴(kuò)展，說明運(yùn)動皮層面區(qū)合谷穴區(qū)發(fā)生功能重組。面區(qū)軸突的膨體密度減小，推測