面神經(jīng)損傷后MnTBAP對面神經(jīng)元的保護作用.pdf

1、面神經(jīng)顱外段走行距離較長，與腮腺等器官關(guān)系密切，隨著耳外科、腫瘤以及包括機械性損傷、物理化學性損傷、醫(yī)源性損傷在內(nèi)的創(chuàng)傷性面神經(jīng)節(jié)段損傷正處于上升趨勢，發(fā)生率約為17-32％。面神經(jīng)損傷后不僅導致頜面部畸形，而且會影響到口、眼等的功能，從生理、心理、社會等方面給患者造成不良影響。因此，面神經(jīng)損傷的修復是相關(guān)領(lǐng)域重要的研究課題之一。月前臨床上雖然采用精細的顯微外科技術(shù)以較好地恢復神經(jīng)的連續(xù)性，但神經(jīng)功能的恢復仍不令人滿意。當面神經(jīng)受到損傷

2、后，神經(jīng)體液微循環(huán)發(fā)生紊亂，從而引起糖皮質(zhì)激素水平急劇升高、氧化應激產(chǎn)物大量產(chǎn)生、細胞因子（Cytokine）大量釋放及胞內(nèi)離子變化、神經(jīng)元通過軸漿逆性運輸靶組織或支持組織所產(chǎn)生的神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTF）中斷等，最終線粒體膜損傷，細胞色素C（Cyto-c）釋放。Cyto-c在有ATP的參與下活化凋亡活化因子（Apaf-1），活化的Apaf-1經(jīng)其caspase補允結(jié)構(gòu)域（CARD）與caspase-9前體原結(jié)構(gòu)域結(jié)合，導致caspase-

3、9自身活化。Cyto-C、Apaf-1與caspase-9前體組成“凋亡體”（apotosome），活化的caspase-9進一步誘導效應caspase如caspase-3的活化引起細胞凋亡。本研究目的旨在觀察MnTBAP（Mn（Ⅱ）tetrakis（4-Benzoic acid）porphyrin chloride）對大鼠面神經(jīng)總干壓榨傷的保護作用及對TUNEL、Cyto-c、Caspase-9、Caspase-3表達的影響。

4、　　 方法：
　　 選取SD大鼠40只，體質(zhì)量250～300 g之間，雌雄不限，手術(shù)制作大鼠雙側(cè)面神經(jīng)總干壓榨傷模型，左側(cè)損傷局部給予MnTBAP，右側(cè)損傷局部給予鹽水作為對照，假手術(shù)組僅暴露雙側(cè)面神經(jīng)總干而不損傷神經(jīng)。分別在術(shù)后1、3、7、14、28、42d，大體觀察大鼠面癱恢復情況；HE染色的方法觀測術(shù)后各期面神經(jīng)元的形態(tài)學變化；原位末端標記（TUNEL）法檢測神經(jīng)元胞體的凋亡；免疫組化染色檢測面神經(jīng)元Cyto-c、Cas

5、pase-9、Caspase-3蛋白表達。
　　 結(jié)果：
　　 MnTBAP對總干壓榨傷后的面神經(jīng)有明顯的功能恢復作用；傷后第3d開始MnTBAP側(cè)和對照側(cè)面神經(jīng)元存活率逐漸下降，第7d開始MnTBAP側(cè)面神經(jīng)元存活率明顯高于對照側(cè)；傷后第7d開始MnTBAP側(cè)和對照側(cè)可見TUNEL陽性表達，第14d數(shù)量達到高峰，各時間點表達水平MnTBAP側(cè)較對照側(cè)低；傷后第1d，Cyto-c、Caspase-9陽性表達增加，第7d時