炎癥大鼠下丘腦弓狀核神經(jīng)元敏感化的NMDA受體機(jī)制.pdf

1、研究目的:本實(shí)驗(yàn)旨在研究在外周組織炎癥時(shí)下丘腦弓狀核( arcuate nucleus ofhypothalamus，ARC)產(chǎn)生中樞敏感化的NMDA受體機(jī)制和受體后信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
　　 研究方法:建立完全弗氏佐劑(complete Freund's adjuvant，CFA)炎癥痛模型;用3管玻璃微電極在體細(xì)胞外記錄ARC神經(jīng)元的自發(fā)放電及其對(duì)傷害性刺激的反應(yīng);微電泳MK-801（NMDA受體非競爭性拮抗劑）、PP2（Src家

2、族蛋白酪氨酸激酶抑制劑）、Chelerythrine（蛋白激酶C抑制劑），觀察阻斷NMDA受體或受體后激酶Src和PKC的磷酸化對(duì)大鼠ARC神經(jīng)元自發(fā)放電和痛誘發(fā)放電的影響。
　　 研究結(jié)果:(1) CFA炎癥組大鼠ARC神經(jīng)元的自發(fā)放電頻率明顯高于生理鹽水對(duì)照組(Saline)大鼠，前者的放電頻率為2.17±0.22Hz，后者為3.63±0.25Hz，兩者比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);(2) CFA炎癥組大鼠ARC

3、中痛興奮型神經(jīng)元(PEN，pain-excitatory neuron)的痛誘發(fā)放電頻率明顯高于對(duì)照組，前者的放電頻率為3.92±0.19Hz，后者為4.95±0.29Hz，兩者比較具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);(3)微電泳MK-801(3mM，+20～30nA，30s)、PP2(1mM，+20～30nA，10～15min)和Chelerythrine(2mM，+20～30nA，10～15min)可抑制CFA炎癥組大鼠ARC中P

4、ENs的自發(fā)放電，放電頻率分別降低了52.36％(P＜0.001)、25.5％(P＜0.05)和25％(P＜0.05)，比較給藥前后放電頻率，皆具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;微電泳相同藥物對(duì)對(duì)照組大鼠的自發(fā)放電頻率不產(chǎn)生影響。(4)微電泳MK-801(3mM,+20～30nA,30s)、PP2(1mM,+20～30nA,10～15min)和Chelerythrine(2mM，+20～30nA，10～15min)可抑制CFA炎癥組大鼠ARC中PENs的

5、痛誘發(fā)放電，放電頻率分別降低了89.15％(P＜0.001)、77.09％(P＜0.001)和54.65％(P＜0.001);微電泳相同藥物對(duì)對(duì)照組大鼠ARC中PENs的痛誘發(fā)放電頻率也產(chǎn)生同樣的抑制作用，放電頻率分別降低了90.63％(P＜0.001)、79.18％(P＜0.001)和47.06％(P＜0.01)。
　　 研究結(jié)論:(1)外周CFA炎癥時(shí)，ARC作為脊髓上水平痛覺調(diào)節(jié)的一個(gè)高位中樞核團(tuán)，其中的神經(jīng)元可產(chǎn)生敏感化

6、現(xiàn)象，表現(xiàn)為ARC中神經(jīng)元的自發(fā)放電增加，PENs對(duì)傷害性刺激的反應(yīng)增強(qiáng)，放電頻率增加。(2) NMDA受體、Src和PKC參與了CFA大鼠ARC中PENs的敏感化，表現(xiàn)為MK-801、PP2和Chelerythrine可以抑制ARC中PENs自發(fā)放電的增加和對(duì)傷害性刺激反應(yīng)的增強(qiáng);(3)NMDA受體、Src和PKC參與了CFA大鼠和對(duì)照組大鼠對(duì)傷害性刺激的反應(yīng)，表現(xiàn)為MK-801、PP2和Chelerythrine可以抑制其PENs痛