TLR-9相關(guān)因子在急性肺挫傷中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：Toll受體9（Toll-like receptors-9，TLR-9）在胸部創(chuàng)傷所致大鼠急性肺挫傷中表達(dá)的意義。
　　方法:選取2016年4月～5月購(gòu)自貴州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的40只健康、雄性SD（Sprague-Dawley，SD）大鼠作為研究對(duì)象。利用小型生物撞擊機(jī)（由第三軍醫(yī)大學(xué)予以提供），在500kpa下對(duì)大鼠胸部進(jìn)行撞擊，形成重度肺挫傷。參照 AIS-90標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)受傷后大鼠進(jìn)行評(píng)分，大鼠受傷后會(huì)出現(xiàn)頻繁、深沉的

2、呼吸，較之前更明顯，呼吸急促、口唇發(fā)鉗、蘇醒延遲、精神萎靡、食欲減退、活動(dòng)減少。上述提示：代謝性呼吸增快在大鼠身上已經(jīng)出現(xiàn)，目的在于適應(yīng)氧供。因此，采用500kpa撞擊較好的模擬了大鼠急性肺挫傷。隨機(jī)分為5組，每組8只：正常對(duì)照組；胸部創(chuàng)傷致急性肺挫傷模擬組（500kpa）撞擊后5，24，48，72小時(shí)，于股動(dòng)脈放血處死。取大鼠血清及肺組織。HE染色觀察大鼠肺組織病理學(xué)改變、肺組織濕／干質(zhì)量比、采用免疫組織化學(xué)法、Elisa法檢測(cè)血清及

3、肺泡灌洗液中 TLR-9受體的蛋白表達(dá)水平、予RT-PCR（Reverse transcription-PCR，RT-PCR）法檢測(cè)肺組織 TLR-9、IL-6（Interleukin-6，IL-6)的mRNA表達(dá)水平；Western blot法檢測(cè)肺組織TLR-9的蛋白水平。
　　結(jié)果：肺組織病理學(xué)檢查顯示：與空白對(duì)照組比較，胸部創(chuàng)傷組大鼠肺水腫、肺組織充血、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、炎性滲出較明顯。免疫組織化學(xué)法回示：胸部創(chuàng)傷組大鼠光鏡

4、下顯色呈明顯棕黃色，空白對(duì)照組大鼠光鏡下未見(jiàn)黃色，其中以胸部創(chuàng)傷48小時(shí)組大鼠染色最為明顯。胸部創(chuàng)傷組大鼠肺組織濕/干質(zhì)量比：胸部創(chuàng)傷組大鼠與空白對(duì)照組大鼠相比，胸部創(chuàng)傷組大鼠肺組織濕/干質(zhì)量比明顯低于空白對(duì)照組。ELISA：血清及肺泡灌洗液中TLR-9、IL-6表達(dá)水平，胸部創(chuàng)傷組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。RT-PCR回示：胸部創(chuàng)傷組肺組織中TLR-9 mRNA、IL-6 mRNA的表達(dá)較空白對(duì)照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)