細(xì)胞因子在乙肝相關(guān)性肝病病人血清中的表達(dá)及意義.pdf

1、【背景】
　　乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）感染可導(dǎo)致急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化以及肝癌等一系列肝病。病毒感染導(dǎo)致這些疾病發(fā)展過(guò)程的原因還不清楚。一些研究表明乙肝病毒可能沒(méi)有直接損害肝細(xì)胞，肝細(xì)胞的損害可能是由細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)引起的，而這些免疫反應(yīng)與體內(nèi)產(chǎn)生的細(xì)胞因子密切相關(guān)。細(xì)胞因子是一類由致敏或活化的淋巴細(xì)胞及某些組織細(xì)胞合成與釋放的具有免疫活性的小分子多肽，主要包括：I型細(xì)胞因子，由Th1細(xì)胞亞群產(chǎn)

2、生包括干擾素-γ（IFN-γ）、白介素-2（IL-2）和腫瘤壞死因子（TNF）等；Ⅱ型細(xì)胞因子，由Th2細(xì)胞亞群產(chǎn)生，主要包括IL-4、IL-6和IL-10等。既往研究主要探討細(xì)胞免疫及I型細(xì)胞因子在HBV感染中的作用，對(duì)Ⅱ型細(xì)胞因子關(guān)注不多。
　　環(huán)氧合酶（Cyclooxygenase，COX）是前列腺素（Prostaglandin，PG）合成的限速酶，COX至少有兩種亞型，即COX-1和COX-2。其中COX-2在炎癥、癌前病

3、變以及腫瘤中的作用已成為研究的熱點(diǎn)。并且國(guó)內(nèi)外研究表明，COX-2與各種肝病的發(fā)生密切相關(guān)［1，2］。然而COX-2及相關(guān)細(xì)胞因子在乙肝相關(guān)性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用及其臨床意義尚不明確。
　　重癥肝炎是各種原因?qū)е赂喂δ芩ソ叩慕K末階段，預(yù)后差，死亡率一般在70％以上，長(zhǎng)期以來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了大量的研究，但至今其臨床治療尚無(wú)突破性進(jìn)展[3，4]。
　　葡萄糖-胰島素-鉀（GIK）極化液作為一種重要的能量合劑，應(yīng)用于缺血性心臟

4、病的治療已近40年。然而胰島素是否能像保護(hù)缺血/再灌注心肌細(xì)胞一樣對(duì)肝損傷細(xì)胞也具有保護(hù)作用，并在急性肝衰竭臨床治療上發(fā)揮重要的作用尚不清楚。
　　【目的】
　　探討Th2類細(xì)胞因子在不同的乙肝病毒相關(guān)性肝病中的表達(dá)水平及意義；進(jìn)一步研究細(xì)胞因子相關(guān)的COX-2代謝產(chǎn)物與重癥肝炎的關(guān)系；觀察應(yīng)用大劑量GIK治療急性肝衰竭對(duì)Th2類相關(guān)細(xì)胞因子及臨床各項(xiàng)指標(biāo)的影響。
　　【方法】
　　所有受試者均按要求采集空腹靜脈

5、血5ml，待血液凝固后2000r/min離心，分離血清，置－70℃待測(cè)，1周內(nèi)完成檢測(cè)。所有細(xì)胞因子均采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)。血清TXB2和6-keto-PGF1α含量測(cè)定試劑盒由美國(guó)R&D公司提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，用BioRad公司的酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。治療對(duì)照研究中，對(duì)照組常規(guī)保肝、抗病毒及對(duì)癥治療，試驗(yàn)組應(yīng)用大劑量極化液：25％葡萄糖注射液500ml+25單位胰島素+1.5g氯化鉀注射液每12小時(shí)，微量泵維持給藥1次/

6、日,15天。治療前后均采集空腹靜脈血待測(cè)。
　　【結(jié)果】
　　1、Th2類細(xì)胞因子與乙肝相關(guān)性肝病的關(guān)系
　　ELISA法檢測(cè)57例肝病患者和25例正常對(duì)照血清IL-4、IL-6和IL-10的水平?；颊哐錓L-4和IL-6的表達(dá)水平均顯著高于正常人（肝病患者vs正常對(duì)照，IL-4，t=3.19，P=0.002；肝病患vs正常對(duì)照，IL-6，t=3.26，P=0.002），但肝病患者各組間細(xì)胞因子水平無(wú)顯著性差異。肝病

7、患者和正常人的IL-10水平均低，無(wú)明顯差異。
　　2、細(xì)胞因子相關(guān)的COX-2代謝產(chǎn)物與重癥肝炎的關(guān)系研究
　　ELISA法檢測(cè)50例重癥肝炎患者（其中急性重癥肝炎13例，亞急性重癥肝炎12例，慢性重癥肝炎25例）和25例普通乙肝相關(guān)性患者血清中PGs代謝產(chǎn)物TxB2和6-keto-PGF1α的水平。結(jié)果顯示，各組重癥肝炎患者血清TXB2和6-keto-PGF1α的水平均明顯高于普通肝病患者（急性重癥肝炎vs正常對(duì)照，t=

8、4.79，P<0.005；亞急性重癥肝炎vs正常對(duì)照，t=4.53，P＜0.002；慢性重癥肝炎vs正常對(duì)照，t=4.39，P<0.001），隨著病情的轉(zhuǎn)歸，T/6-K比值明顯下降，但不同程度重肝組間細(xì)胞因子水平無(wú)顯著性差異。
　　3、大劑量極化液調(diào)節(jié)細(xì)胞因子治療急性肝衰竭的應(yīng)用
　　應(yīng)用大劑量極化液治療后，急性肝衰竭患者血清ALT、AST、總膽紅素、TNF-α、IL-1、4、6水平均較治療前明顯降低，而IL-10水平則升高